Хадамоти таҳлили хусусиятҳои Аптамер

Alpha Lifetech солҳои зиёд хидматҳои марбут ба адаптерро пешниҳод мекунад ва хидматҳои ҳамаҷонибаи таҳия ва таҳлили адаптерро пешниҳод мекунад.

БО МО ТАМОС ГИРЕД

Хадамоти таҳлили хусусиятҳои Аптамер

Alpha Lifetech солҳои тӯлонӣ хидматҳои марбут ба аптамерро пешниҳод мекунад ва айни замон метавонад нақшаҳои ҳамаҷонибаи таҳияи аптамерҳоро, аз қабили синтези аптамер, скрининги SELEX, пайдарпайии баландсифат ва беҳбудиву тавсифи аптамерро пешниҳод кунад. Бар асоси бартариҳои усули SELEX барои скрининги аптамерҳо, Alpha Lifetech усулҳои бештареро барои скрининги аптамерҳо васеъ кардааст.

Муқаддима ба таҳлили тавсифи Аптамер

Тасдиқи мансубият

Мисли оптимизатсияшудаи аффинитсияи аптамер бо усулҳои дахлдори озмоиши пайвастшавӣ бо истифода аз аптамер тасдиқ карда шуд. Мисолҳо инҳоянд: Калориметрияи титркунии изотермикӣ (ITC), цитометрияи ҷараён (FCM) ва резонанси плазмони сатҳӣ (SPR), микрофлюидикҳо ва ғайра. Аффинитсияи Аптамер одатан бо константаи диссотсиатсия (KD), миқдори физикие, ки барои муайян кардани дараҷаи диссотсиатсияи молекулавӣ дар реаксияи баръакс истифода мешавад, ифода карда мешавад. Ҳар қадар арзиши KD хурдтар бошад, комплекс ҳамон қадар устувортар аст, яъне аффинит қавитар аст; Баръакс, ҳар қадар арзиши KD калонтар бошад, комплекс ҳамон қадар ноустувортар ва аффинит заифтар аст. Ин қадам калиди муайян кардани кори аптамер аст, ки пухта расидани аффинитсияи аптамерро таъмин мекунад ва метавонад бо аффинитсияи баланд ва интихобӣ дар татбиқи амалӣ ба молекулаи мақсаднок пайваст шавад.

Расми 1. Раванди пухта расидани аффинитети аптамер. Манбаи истинод:Кингхорн AB, Фрейзер LA, 2017.

Тасдиқи функсия

Илова бар тасдиқи наздикӣ, вазифаи аптамер низ бояд тасдиқ карда шавад. Ин тасдиқи устуворӣ, хосият ва таъсири мутақобилаи аптамерро бо дигар молекулаҳо дар муҳити мушаххас дар бар мегирад. Натиҷаҳои тасдиқи функсионалӣ ба арзиши аптамерҳо дар таҳқиқоти илмӣ ва татбиқи саноатӣ мустақиман таъсир мерасонанд.

Тасдиқи мушаххас

Таҷрибаи рақобатӣ: Қобилияти аптамер барои пайваст шудан ба ҳадафи мушаххас дар ҳузури дигар ҳадафҳои шабеҳ арзёбӣ карда мешавад. Агар аптамер метавонад ба таври мушаххас ба молекулаи ҳадаф бидуни дахолати молекулаҳои дигар пайваст шавад, ин нишон медиҳад, ки он хосияти баланд дорад.

Таҷрибаи реаксияи салибӣ: Аптамер ба як қатор ҳадафҳои марбут ё номувофиқ пайваст карда мешавад, то бубинад, ки оё он танҳо ба ҳадафи мушаххас пайваст мешавад, то мушаххасияти онро тасдиқ кунад.

Тасдиқи устуворӣ

Таҷрибаи деградатсияи нуклеаза: Аптамерҳо ба консентратсияҳои гуногуни нуклеазаҳо дучор карда шуданд ва деградатсияи онҳо мушоҳида карда шуд. Бо муқоисаи дараҷаи деградатсия дар нуқтаҳои гуногуни вақт, қобилияти зидди деградатсияи нуклеазаи аптамерро метавон арзёбӣ кард.

Таҷрибаи устувории ҳарорат ва вақт: Аптамер дар шароити гуногуни ҳарорат ва вақт ҷойгир карда шуд, то устувории сохторӣ ва функсионалии онро мушоҳида кунад. Ин барои муайян кардани шароити беҳтарини нигоҳдорӣ ва истифодаи апамерҳо кӯмак мекунад.

Муайян кардани фаъолияти биологӣ

Усули мувофиқ одатан мувофиқи ҳадафи мушаххаси татбиқи аптамери кислотаи нуклеинӣ интихоб карда мешавад.

(1) Санҷиши сатҳи молекулавӣ: Бо истифода аз усулҳои биологияи молекулавӣ, ба монанди электрофорези гелӣ, вестерн-блот ва ғайра, барои муайян кардани комплексҳое, ки пас аз якҷоя шудани аптамер бо молекулаи мақсаднок ба вуҷуд омадаанд ё муайян кардани тағйирот дар сатҳи ифодаи молекулаи мақсаднок, ки аз ҷониби аптамер ба вуҷуд омадаанд.

(2) Санҷиши сатҳи ҳуҷайра: Бо истифода аз технологияи парвариши ҳуҷайра, аптамерҳо бо ҳуҷайраҳои мақсаднок инкубатсия карда мешаванд, то тағйироти биологӣ, аз қабили морфологияи ҳуҷайра, афзоиш ва апоптозро мушоҳида кунанд ва фаъолияти биологии аптамерҳоро арзёбӣ кунанд.

(3) Санҷиши модели ҳайвонот: Дар моделҳои мувофиқи ҳайвонот, аптамерҳои кислотаи нуклеинӣ тавассути тазриқ ё ворид кардани дору дода мешаванд ва нишондиҳандаҳои физиологӣ ва тағйироти патологии ҳайвонот барои арзёбии фаъолияти биологӣ ва бехатарии аптамерҳо дар in vivo мушоҳида карда мешаванд.