Дар соли 1960, консепсияи антителоҳои биспесификӣ пешниҳод карда шуд. Антителоҳои биспесификӣ, ки бо номи антителоҳои моноклоналии биспесификӣ низ маълуманд, антителоҳои сунъӣ мебошанд, ки бо истифода аз технологияи муҳандисии генетикӣ синтез карда шудаанд. Ҳамчун антителои сунъии муҳандисӣ, антителоҳои биспесификӣ одатан ба зерсинфи IgG тааллуқ доранд ва дорои порчаи пайвасткунандаи антиген мебошанд, ки зерқисмати CD3-ро ҳадаф қарор медиҳанд. Антителоҳои биспесификӣ ду макони пайвасткунандаи антигени мушаххас доранд, ки метавонанд ҳамзамон ду антигени гуногун ё ду эпитопи гуногуни антигенро пайваст ва шинохтанд. Дар муқоиса бо антителоҳои моноклоналӣ, антителоҳои биспесификӣ макони иловагии пайвасткунандаи антигени мушаххас доранд, ки аз ин рӯ, хосият ва қобилияти ҳадафгирии қавитар доранд, ки метавонад ҳуҷайраҳои варамро дақиқтар ҳадаф қарор диҳад ва заҳролудии берун аз ҳадафро коҳиш диҳад. Антителоҳои биспесификӣ метавонанд ҳамзамон вазифаҳои сершумори биологиро иҷро кунанд, ба монанди ҷалби ҳуҷайраҳои иммунӣ, бастани роҳҳои сигнализатсия ва куштани мустақими ҳуҷайраҳои варам. Антителоҳои биспесификии аввал асосан тавассути конъюгасияи кимиёвӣ ё омезиши ҳуҷайраҳо омода карда мешуданд, аммо ин усул метавонад аз сабаби омезиши тасодуфӣ ва душворӣ дар ҷудо кардани омезиши ҳадаф оҳиста пеш рафта бошад. Бо рушди пайвастаи технологияи муҳандисии генетикӣ, бисёр платформаҳои нави технологӣ, аз қабили гиреҳҳо дар сӯрохиҳо (KIH), CrossMab, DVD Ig ва ғайра таҳия шудаанд. Ин платформаҳо мушкилотро ба монанди номувофиқатии занҷирҳои вазнин ва сабук самаранок ҳал мекунанд ва якрангӣ ва ҳосили антителоҳои биспесификиро беҳтар мекунанд.

Усулҳои асосии истеҳсоли антителоҳои биспесификӣ иборатанд аз пайвасткунии кимиёвӣ, гибридомаи чор манбаъ ва омодасозии антителоҳои муҳандисии генетикӣ. Дар байни онҳо, усули пайвасткунии кимиёвӣ ду порчаи IgG ё ду порчаи антителои F (ab') 2-и солимро бо истифода аз агентҳои пайвасткунии кимиёвӣ, ба монанди фталимид ва кислотаи дитиоацилбензой, ба антителоҳои биспесификӣ пайваст мекунад. Ин усул содда ва осон аст, аммо он метавонад ба макони пайвастшавии антиген зарар расонад, фаъолияти антителоҳоро коҳиш диҳад ва худи агенти пайвасткунанда низ дараҷаи муайяни канцерогенӣ дорад. Усули гибридомаи чор манбаъ ба омезиши ҳуҷайраҳои соматикӣ аз ду хатти гуногуни ҳуҷайраҳои гибридом барои ифодаи IgG-и мувофиқи муш асос ёфтааст. Тавассути технологияи муҳандисии генетикӣ, антителоҳоро метавон аз ҷиҳати генетикӣ тағйир дод, то антителоҳои биспесификиро ташкил диҳад. Ду антителои гуногуни моноклоналӣ сохта шуданд ва порчаҳои Fab ё минтақаҳои тағйирёбандаи занҷири вазнин ва занҷири сабуки ду антитело алоҳида ҷудо карда шуданд. Тавассути реаксияи пайвасткунии салиб ё технологияи рекомбинатсияи занҷир, ду порча барои ташкили антителои биспесификӣ муттаҳид карда шуданд. Гарчанде ки мураккабии технологияи муҳандисии генетикӣ нисбатан баланд аст, он дар айни замон усули маъмултарин барои истеҳсоли антителоҳои биспесификӣ барои танзими сохтор ва вазифаи антителоҳо мебошад. Ҳангоми гузаронидани тарҳрезии антителоҳои биспесификӣ, принсипи реаксияи салибии антитело метавонад истифода шавад, аммо реаксияи салибии антитело метавонад аксуламалҳои ғайримушаххасро ба вуҷуд орад, аз ин рӯ, он дар татбиқи амалии тарҳрезии антителоҳои биспесификӣ, ба монанди терапияи антителоҳои биспесификӣ, бодиққат баррасӣ карда мешавад.

Тозакунии антителоҳои биспесификӣ раванди ҷудо кардан ва тоза кардани антителоҳои мақсадноки тозагии баланд мебошад. Ду усул, сентрифугакунӣ ва филтратсияи амиқ, барои тоза кардани баъзе ифлосҳои ҳалшаванда истифода мешаванд. Антителои биспесификии мақсаднок аввал тавассути хроматографияи аффинӣ сабт карда мешавад. Барои антителоҳои биспесификии монанд ба IgG, хроматографияи аффинии протеини A истифода мешавад, дар ҳоле ки барои антителоҳои биспесификии ғайри IgG, хроматографияи аффинии занҷири рӯшноӣ метавонад истифода шавад. Баъд аз ин, антитело дар шароити пасти рН барои муддати муайян инкубатсия карда мешавад, ки боиси вайрон шудани сохтори сафеда дар сатҳи лифофаи вирус мегардад ва бо ин роҳ қобилияти сироят кардани ҳуҷайраҳоро аз даст медиҳад. Филтратсияи амиқтари миёна барои тоза кардани минбаъдаи ифлосҳо, ба монанди сафедаҳои ҳуҷайраҳои мизбон (HCP) анҷом дода мешавад. Покии антителоҳо тавассути усулҳо ба монанди хроматографияи мубодилаи ионҳо беҳтар карда мешавад ва ҳама гуна вирусҳои боқимонда тавассути усулҳои нанофилтратсия ё ултрафилтратсия хориҷ карда мешаванд. Дар ниҳоят, намуна консентратсия карда мешавад ва бо буфери мувофиқи формула иваз карда мешавад.