Платформаи технологии Hybridoma

Alpha Lifetech дар соҳаи таҳияи антитело таҷрибаи бой дорад. Дар тӯли солҳо, Alpha Lifetech як платформаи ҳамаҷонибаи таҳияи антитело (аз ҷумла таҳияи антителоҳои моноклоналӣ, таҳияи антителоҳои поликлоналӣ, таҳияи антителоҳои моноклоналии рекомбинантӣ ва дигар хидматрасониҳои омодасозӣ ва таҳияи антитело)-ро таъсис додааст.

Ширкати Alpha Lifetech ба мизоҷон маҳсулот ва хидматҳои антитело ва антителоҳои рекомбинантии босифатро пешниҳод мекунад ва антителоҳои омодашуда дорои хосияти қавӣ ва устувории хуб мебошанд. Асбобҳо ва таҷҳизоти сершумори тозакунии антитело метавонанд барои пешниҳоди хидматҳои тозакунии антитело аз манбаъҳои гуногун, ба монанди антителоҳои моноклоналии харгӯш, гӯсфанд, мурғ, муш, инчунин хидматҳои тозакунии аффинитети сафедаи A/G ва хидматҳои ҷудокунии антитело истифода шаванд.

Бар асоси усулҳои гуногуни омодасозии антитело, ба монанди технологияи ҳуҷайраҳои гибридома, Alpha Lifetech метавонад хидматҳои фармоиширо барои антителоҳои моноклоналӣ ва поликлоналии намудҳои гуногун пешниҳод кунад. Ғайр аз ин, як қатор хидматҳо аз пайдарпайии баландсифат, омодасозии антитело, тозакунии антитело то тасдиқи антитело низ пешниҳод карда мешаванд. Мо усули тозакуниро вобаста ба ҳадафи мушаххаси муштарӣ интихоб хоҳем кард. Бар асоси системаҳои ҳамаҷонибаи платформа, ба монанди платформаи таҳияи антитело ва платформаи сафеда, Alpha Lifetech хидматҳои боло ва поёнии истеҳсоли антителоро фаро мегирад ва тозакунии антитело, пайдарпайии баландсифати антитело, тасдиқи антитело ва дигар хидматҳои техникиро пешниҳод мекунад.

Технологияи гибридома

Технологияи гибридома метавонад барои тайёр кардани антителоҳои моноклоналӣ истифода шавад. Бо якҷоя кардани ҳуҷайраҳои испурч аз мушҳои эмгузаронидашуда бо ҳуҷайраҳои миелома аз одамон ё мушҳо, ҳуҷайраҳои гибридома ташаккул меёбанд ва антителоҳои мушаххас ҷудо мекунанд. Антителоҳои моноклоналии аз муш тавлидшуда метавонанд дар таҳқиқоти илмӣ, ба монанди таҳлили иммуносорбенти ферментӣ, таҳлили радиоиммуноассай, иммуногистохимия, ситометрияи ҷараёнӣ, тозакунии сафедаҳо ва ғайра истифода шаванд. Намунаҳои антителоҳои моноклоналӣ асцит, супернатант гибридома ва ғайраро дар бар мегиранд. Намунае, ки бо ворид кардани ҳуҷайраҳои гибридома ба ковокии шиками ҳайвонот ва истифодаи муҳити физиологии ковокии шиками ҳайвон барои истеҳсоли антителоҳо ба даст оварда мешавад, намунаи асцит номида мешавад. Ҳуҷайраҳои гибридома, ки ба ковокии шиками ҳайвонот ворид карда мешаванд, метавонанд антителоҳои моноклоналиро афзоиш диҳанд ва ҷудо кунанд, ки метавонанд дар асцит ҷамъ шаванд. Аз сабаби эҳтимолияти ифлосӣ (сафедаҳои ҳайвонот, гормонҳо ва ғайра) дар ин антителоҳо, тозакунӣ лозим аст. Дар асоси вазифаи ҷудокунии лимфоситҳои В, антителоҳои моноклоналӣ ҳангоми парвариши ҳуҷайраҳои гибридома аксар вақт ба муҳити парвариш ҷудо мешаванд. Моеъе, ки дар муҳити парваришӣ антителоҳои моноклоналӣ дорад, супернатант гибридома номида мешавад. Покии антителоҳои моноклоналӣ дар супернатант нисбатан баланд аст, аммо барои омодасозии миқёси калон тозакунии минбаъда лозим аст, зеро онҳо тавассути парвариши in vitro ба даст оварда мешаванд.

Тозакунии антитело метавонад антителоҳои тозаи баландро аз комплексҳо ҷудо кунад. Дар айни замон, тозакунии аффинитети антитело ва ҷудокунӣ ва тозакунии антитело усулҳои маъмули тозакунии антитело мебошанд, ки асосан тозакунии сафедаи A/G, хроматографияи мубодилаи ионҳо, филтратсияи гел, боришот ва хроматографияи таъсири мутақобилаи гидрофобӣ мебошанд. Дар байни онҳо, хидмати тозакунии аффинитети сафедаи A/G дар барномаҳои гуногуни тозакунии антитело васеъ маъмул аст. Раванди омода кардани антителоҳои моноклоналии Alpha Lifetech дар асоси технологияи гибридома дар расми 1 нишон дода шудааст.

Расми 1. Диаграммаи раванди тайёр кардани антителоҳои моноклоналӣ дар асоси технологияи гибридома.

Конъюгати доруҳои антитело ва технологияи гибридома

Конъюгати доруи антитело (ADC) як агенти нави биологӣ аст, ки антителоҳоро бо доруҳои цитотоксикӣ ба таври кимиёвӣ пайваст мекунад. Конъюгати доруи антитело қобилияти шинохти мушаххаси антителоҳоро бо таъсири пурқуввати кушандаи доруҳои цитотоксикӣ муттаҳид мекунад ва доруҳои цитотоксикӣ ба ҳуҷайраҳои варам тавассути антителоҳо дақиқ интиқол медиҳад ва бо ин васила табобати дақиқро ба даст меорад. Қисми антитело дар доруҳои ADC аксар вақт тавассути технологияи гибридома ё дигар усулҳои истеҳсоли антитело, ба монанди технологияи антителои муҳандисии генетикӣ, омода карда мешавад. Технологияи гибридома ашёи хоми антителои баландсифатро барои доруҳои ADC таъмин мекунад. Доруҳои ADC ва антителоҳои моноклоналӣ, ки тавассути технологияи гибридома омода карда мешаванд, дар соҳаҳо ба монанди табобати саратон нақши муҳим мебозанд. Онҳоро метавон алоҳида ё якҷоя барои баланд бардоштани самаранокии терапевтӣ истифода бурд.

Антителоҳои моноклоналӣ, ки бо технологияи гибридома омода карда шудаанд, хосияти баланд доранд, метавонанд антигенҳои мушаххасро дақиқ пайваст ва шинохта тавонанд ва дар миқёси калон истеҳсол карда шаванд. Тавассути технологияи секвенсияи гибридома, генҳои антитело дар ҳуҷайраҳои гибридома метавонанд истихроҷ ва секвенсия карда шаванд, то пайдарпайии мувофиқ ба даст оварда шавад, ки барои ифодаи минбаъдаи антитело муфид аст. Антителоҳои моноклоналӣ, ки тавассути технологияи гибридома омода карда шудаанд, метавонанд барои муайян кардани маркерҳои мушаххаси беморӣ, ба монанди маркерҳои варам, антигенҳои вирусӣ ва ғайра истифода шаванд, ки барои ташхиси барвақти бемориҳо дастгирии қавӣ фароҳам меоранд. Илова бар ин, он инчунин метавонад дар таҷрибаҳо ба монанди иммуноблоттинг ва иммуногистохимия барои омӯзиши ифодаи сафеда, маҳаллисозӣ, сохтор ва функсия истифода шавад.

Технологияи гибридома Истеҳсоли ҷараёни хидматрасонии антителоҳо

Қадамҳо	Мундариҷаи хизматрасонӣ	Ҷадвали вақт
Қадами 1: Эмкунии ҳайвонот	(1) Эмкунии ҳайвонот 4 маротиба, эмкунии такрорӣ 1 воя, дар маҷмӯъ 5 воя эм карда шудааст. (2) Пеш аз эмгузаронӣ натиҷаи манфии зардоб гирифта шуд ва барои муайян кардани титри зардоб дар вояи чорум ELISA гузаронида шуд. (3) Агар титри антителоҳои зардобии вояи чорум ба талабот ҷавобгӯ бошад, як вояи иловагии эмгузаронӣ 7 рӯз пеш аз гирифтани хун гузаронида мешавад. Агар он ба талабот ҷавобгӯ набошад, эмгузаронии муқаррарӣ идома меёбад. (4) Қувваи мувофиқ, ҳуҷайраҳои сипурз барои омезиши ҳуҷайраҳо ҷудо карда мешаванд.	10-12 ҳафта
Қадами 2: Омезиш ва скрининг	(1) Омезиш: Пас аз эмгузаронӣ, ҳуҷайраҳои испурчи муш ҷамъоварӣ ва бо ҳуҷайраҳои миелома омехта карда шуданд. (2) Афзоиш ва скрининг: Ҳуҷайраҳои гибридомаи бадастомада барои ба даст овардани клонҳои хеле самаранок аз афзоянда ва скрининги ELISA гузаронида шуданд.	6 ҳафта
Қадами 3: Зерклон	Зерклон кардани 15-25 ҳуҷайраҳои модарии мусбат бо истифода аз усули маҳдуди обёрӣ ва дар ниҳоят муайян кардани 10-15 клони мусбат	3-4 ҳафта
Қадами 4: Истеҳсоли асцит ва тозакунии антителоҳо	(1) Истеҳсоли асцит: 10-15 штамми гибридома барои истеҳсоли асцит дар мушҳо истифода мешаванд (агар шумораи зиёди штаммҳои гибридома ба даст оварда шаванд, онҳо дар шакли ҳуҷайра фиристода мешаванд) (2) Муайян кардани асцит: Муайян кардани асцит бо ELISA, иқтидор (сафеда/вирус>10 ^ 5, молекулаи хурд/пептид>10 ^ 4) барои тозакунии минбаъда (3) Тозакунии сафедаи A/G: Тозакунии асцитҳо	3-4 ҳафта
Қадами 5: Таҳвил	(1) 3-5 штамми гибридомаи антителоҳои моноклоналиро пешниҳод кунед. (2) Ҳар як ҳуҷайраи гибридома 1 мг антителои тозашударо (тозакунии асцит) таъмин мекунад. (3) Ҳисоботи раванди таҷрибавӣ	1 ҳафта

Бартарии технологияи гибридома

Alpha Lifetech дар соҳаи таҳияи антитело таҷрибаи бой дорад. Дар тӯли солҳо, Alpha Lifetech як платформаи ҳамаҷонибаи таҳияи антителоҳоро таъсис додааст.

Намудҳои гуногун

Масуниятро ба ҳайвоноти гуногун, аз ҷумла мушҳо, харгӯшҳо, гӯсфандон ва ғайра, додан мумкин аст.

Ҳадафи сершумор

Бар асоси технологияи гибридома, хидматҳои кашфи антителоҳои мақсадноки сершумор дастрасанд: сафедаҳо, пептидҳо, молекулаҳои хурд, вирусҳо, сафедаҳои мембрана, mRNA ва ғайра.

Сабтҳои пайгирӣ

Стандартҳои назорати сифати QC (қувваи масуният, назорати сифати PBMC, назорати сифати китобхона ва назорати сифати тасдиқи скрининг), гузоришҳои таҷрибавии англисӣ, сабтҳои аслии таҷрибавӣ

Барномаи фардӣ

Танзими як ба як барномаи фардӣ барои қонеъ кардани ниёзҳои лоиҳаҳои тадқиқотии муштариёни гуногун

ХИЗМАТРАСОНИИ марбут

Стратегияҳои сершумори рушди антителоҳо

Хадамоти рушди антителоҳои моноклоналӣ

Платформаи технологии Hybridoma

Платформаи ҷудокунии ҳуҷайраҳои яккасаи B

Платформаи таҳияи антителоҳои намоиши фаг

Рушди антителаҳои моноклоналӣ - Alpha Lifetech

Хадамоти рушди антителоҳои моноклоналӣ

Мо метавонем хидматҳои баландсифат, тозагии баланд ва хеле мушаххаси таҳияи антителоҳои моноклоналӣ, аз ҷумла истеҳсоли антителоҳои моноклоналии муш ва антителоҳои моноклоналии харгӯшро пешниҳод кунем.