Муқаддима ба китобхонаҳои антителоҳои синтезшуда

Китобхонаи антителоҳои синтезшуда, ки ҳамчун китобхонаи De novo маъруф аст, як усули синтетикӣ мебошад, ки аз усулҳо ба монанди синтези ДНК ё намоиши фагҳо барои тарҳрезӣ ва синтез кардани минтақаҳои тағирёбандаи пурраи антитело, аз ҷумла минтақаҳои чаҳорчӯба ва CDR, бидуни такя ба китобхонаҳои антителоҳои содда истифода мебарад.

Китобхонаи антителоҳои нимсинтетикӣ тавассути омезиши китобхонаҳои антителоҳои табиӣ бо гуногунии синтетикӣ сохта шудааст. Он одатан синтези олигонуклеотидҳои ДНК-ро барои тавлиди маҷмӯи минтақаҳои гуногуни муайянкунандаи комплементарӣ (CDR) дар бар мегирад, ки баъдан бо чаҳорчӯбаи доимии антитело аз манбаъҳои табиӣ ба монанди ҳуҷайраҳои B инсон ё ҳайвонот гирифта мешаванд. CDR-и синтезшуда ба китобхона гуногунрангӣ ворид мекунад, ки дар натиҷа антителоҳо ба доираи васеи эпитопҳо нигаронида шудаанд. Китобхонаи антителоҳои нимсинтетикӣ созишро байни гуногунии табиии системаи иммунӣ ва гуногунии назоратшавандаи тавассути усулҳои синтетикӣ ба даст овардашуда таъмин мекунад.

Фарқи байни китобхонаҳои антителоҳои содда ва синтетикӣ аз манбаи генҳои иммуноглобулин вобаста аст. Дар ҳамин ҳол, фарқи байни китобхонаи антителоҳои нимсинтезшуда ва синтезшуда дар он аст, ки аввалӣ аз қисмҳои антителоҳои содда, ба монанди занҷири сабук ё занҷири вазнин иборат аст ва танҳо яке аз онҳо дар vitro синтез карда мешавад; дар ҳоле ки синтезшуда комилан аз синтези сунъӣ тавассути PCR in vitro гирифта шудааст.

Alpha Lifetech метавонад пешниҳод кунад

Ширкати Alpha Lifetech Inc.метавонад дар асоси платформаи кашфи антителоҳои касбии мо китобхонаи нимсинтезшуда/синтезшудаи антителоҳоро аз ҳайвонот ва одамон пешниҳод кунад. Бо таҷрибаи чандинсола дар тағир додани генетикӣ ва сохтани китобхона, китобхонаҳои синтезшударо сохтан мумкин аст, ки метавонанд антителоҳои синтетикиро бо наздикӣ ва хосият аз қобилияти антителоҳои табиӣ тавлид кунанд.Alpha Lifetechкоршиносон бо ифтихор эълон мекунанд, ки мо метавонем сатҳи баланди муваффақиятро дар сохтани китобхонаи антитело, ки дорои 10 ^ 8 - 10 ^ 10 клонҳои мустақил кафолат дода метавонем.

Ширкати Alpha Lifetech Inc.ифтихор дорад, ки хидматҳои ҳамаҷонибаи сохтмони китобхонаи антителоро барои қонеъ кардани ниёзҳои гуногуни муҳаққиқони ҷаҳонӣ, аз ҷумла scFv, Fab, VHH антитело ва китобхонаҳои фармоишӣ пешниҳод кунад. Ҳадафи мо фаҳмидан ва қонеъ кардани талаботи муштариёни гуногун ва кӯмак расонидан дар ҳама гуна мушкилоти дарпешистода ва пайдошаванда дар корҳои тадқиқотӣ мебошад.

Раванди хидматрасонии китобхонаҳои синтезшудаи антитело

Тарҳрезӣ
Марҳилаи тарҳрезӣ интихоби чаҳорчӯбаҳои антитело ва минтақаҳои мукаммалкунанда (CDRs) дар асоси пайдарпайии антитело ё маълумоти сохториро дар бар мегирад. Антителоҳои синтетикии CDR инчунин метавонанд барои ҷорӣ кардани функсияҳои мушаххас ё баланд бардоштани хосиятҳои ҳатмӣ тарҳрезӣ шаванд.

Синтез
ДНК-и синтетикӣ, ки пайдарпаии антителоҳои тарҳрезишударо рамзгузорӣ мекунад, аз ҷумла минтақаҳои чаҳорчӯба ва CDR, бо истифода аз усулҳои кимиёвӣ ё ферментативӣ синтез карда мешавад.

Маҷлис
Қисмҳои ДНК-и синтезшуда ба векторҳои экспрессияи антитело бо истифода аз усулҳо ба монанди PCR, ligation ё assembly Gibson ҷамъ карда мешаванд. Пас аз он ин векторҳоро метавон ба системаҳои экспрессия ба монанди ҳуҷайраҳои бактериявӣ, хамиртуруш ё ширхӯрон барои истеҳсоли антитело ворид кард.

Санҷиш ва интихоб
Китобхонаҳои антителоҳои сохташуда барои антитело бо хосиятҳои дилхоҳ бо истифода аз усулҳои скрининги баландсуръат тафтиш ва интихоб карда мешаванд. Ин метавонад вобаста ба формати китобхона ва барнома, усулҳои монанди намоиши фаг, намоиши хамиртуруш ё намоиши рибосомаро дар бар гирад.

Хадамоти сохтмони китобхонаҳои антитело синтезшуда

Ширкати Alpha Lifetech Inc.ба муштариён тарҳи якдафъаина ва хидмати синтезшудаи китобхонаҳои антителоро тавассути пайваст кардани репертуарҳои вазнин ва сабуки занҷири V-ген ба вектори фаг бо истифода аз системаи рекомбинатсияи мушаххаси Cre-lox барои эҷод кардани репертуари Fabs дар фаг иборат аст аз 6,5 × 10 ^ 10 клон пешниҳод мекунад. Китобхона Abs-ро бар зидди антигенҳои сершумор, ки баъзеи онҳо наздикии наномолярӣ доранд, ба даст овард. Насли китобхонаи антителоҳои инсон ба технологияи намоиши фагҳои M13 асос ёфтааст (дар расми зер нишон дода шудааст).