Муқаддима ба китобхонаҳои синтезшудаи антителоҳо

Китобхонаи антителоҳои синтезшуда, ки бо номи китобхонаи De novo низ маъруф аст, як усули синтетикӣ мебошад, ки аз усулҳо ба монанди синтези ДНК ё намоиши фагҳо барои тарҳрезӣ ва синтези минтақаҳои пурраи тағйирёбандаи антитело, аз ҷумла минтақаҳои чаҳорчӯба ва CDR, бидуни такя ба китобхонаҳои антителоҳои содда истифода мебарад.

Китобхонаи антителоҳои нимсинтетикӣ бо роҳи якҷоя кардани китобхонаҳои антителоҳои табиӣ бо гуногунии синтетикӣ эҷод карда мешавад. Он одатан синтези олигонуклеотидҳои ДНК-ро барои истеҳсоли маҷмӯи минтақаҳои муайянкунандаи гуногуни мукаммал (CDR) дар бар мегирад, ки сипас бо чаҳорчӯбаи антителоҳои доимӣ, ки аз манбаъҳои табиӣ, ба монанди ҳуҷайраҳои В-и инсон ё ҳайвонот гирифта шудаанд, якҷоя карда мешаванд. CDR-и синтезшуда гуногунрангиро ба китобхона ворид мекунад, ки дар натиҷа антителоҳое, ки доираи васеи эпитопҳоро ҳадаф қарор медиҳанд, ба вуҷуд меояд. Китобхонаи антителоҳои нимсинтетикӣ байни гуногунии табиии системаи масуният ва гуногунии назоратшаванда, ки тавассути усулҳои синтетикӣ ба даст оварда мешавад, созиш фароҳам меорад.

Фарқи байни китобхонаҳои антителоҳои содда ва синтетикӣ аз манбаи генҳои иммуноглобулин вобаста аст. Дар айни замон, фарқи байни китобхонаи антителоҳои нимсинтезшуда ва синтезшуда дар он аст, ки китобхонаи аввалӣ аз як қисми сегментҳои антителоҳои содда, ба монанди занҷири сабук ё занҷири вазнин иборат аст ва танҳо яке аз онҳо дар in vitro синтез карда мешавад; дар ҳоле ки китобхонаи синтезшуда пурра аз синтези сунъӣ тавассути PCR дар in vitro гирифта мешавад.

Alpha Lifetech метавонад таъмин кунад

Алфа Лайфтех ҶДММметавонад китобхонаи антителоҳои нимсинтезшуда/синтезшударо аз ҳайвонот ва одамон дар асоси платформаи касбии кашфи антителоҳои мо пешниҳод кунад. Бо таҷрибаи чандинсола дар тағир додани генетикӣ ва сохтани китобхона, китобхонаҳои синтезшударо метавон сохтанд, ки қодиранд антителоҳои синтетикиро бо наздикӣ ва мушаххасӣ берун аз қобилияти антителоҳои табиӣ истеҳсол кунанд.Алфа ЛайфтехКоршиносон бо ифтихор эълон мекунанд, ки мо метавонем сатҳи баланди муваффақиятро дар сохтани китобхонаи антитело, ки дорои 10^8 – 10^10 клонҳои мустақил мебошад, кафолат диҳем.

Алфа Лайфтех ҶДММбо ифтихор хидматҳои ҳамаҷонибаи сохтани китобхонаи антителоҳоро барои қонеъ кардани ниёзҳои гуногуни муҳаққиқони ҷаҳонӣ, аз ҷумла scFv, Fab, антителоҳои VHH ва китобхонаҳои фармоишӣ пешниҳод мекунад. Ҳадафи мо фаҳмидан ва қонеъ кардани талаботи муштариёни гуногун ва кӯмак расонидан ба ҳама гуна мушкилоти дарпешистода ва пайдошаванда дар корҳои тадқиқотӣ мебошад.

Раванди хидматрасонии сохтмонии китобхонаҳои антителоҳои синтезшуда

Тарроҳӣ
Марҳилаи тарроҳӣ интихоби чаҳорчӯбаҳои антитело ва минтақаҳои муайянкунандаи комплементарӣ (CDR)-ро дар асоси пайдарпайии антителоҳои мавҷуда ё маълумоти сохторӣ дар бар мегирад. Антителоҳои синтетикии CDR инчунин метавонанд барои ворид кардани функсияҳои мушаххас ё беҳтар кардани хосиятҳои пайвастшавӣ тарҳрезӣ шаванд.

Синтез
ДНК-и синтетикӣ, ки пайдарпайии антителоҳои тарҳрезишударо, аз ҷумла ҳам минтақаҳои чаҳорчӯба ва ҳам CDR-ро, рамзгузорӣ мекунад, бо истифода аз усулҳои кимиёвӣ ё ферментативӣ синтез карда мешавад.

Маҷлис
Қисмҳои ДНК-и синтезшуда бо истифода аз усулҳо ба монанди PCR, лигатсия ё васлкунии Гибсон ба векторҳои экспрессияи антитело ҷамъ карда мешаванд. Сипас ин векторҳоро барои истеҳсоли антитело ба системаҳои экспрессия, ба монанди ҳуҷайраҳои бактериявӣ, хамиртуруш ё ширхӯрон ворид кардан мумкин аст.

Интихоб ва барраси
Китобхонаҳои антителоҳои сохташуда бо истифода аз усулҳои скрининги баландсифат барои антителоҳо бо хосиятҳои дилхоҳ скрининг ва интихоб карда мешаванд. Ин метавонад усулҳоеро дар бар гирад, ба монанди намоиши фагҳо, намоиши хамиртурушҳо ё намоиши рибосомаҳо, вобаста ба формат ва татбиқи китобхона.

Хизматрасонии сохтмонии китобхонаҳои антителоҳои синтезшуда

Алфа Лайфтех ҶДММба муштариён хидмати яклухт ва синтезшудаи китобхонаҳои антителоро тавассути пайваст кардани репертуарҳои генҳои занҷири вазнин ва сабуки V ба вектори фаг бо истифода аз системаи рекомбинатсияи мушаххаси Cre-lox барои эҷоди репертуари Fabs, ки дар фагҳо намоиш дода мешавад, ки дорои 6.5 × 10^10 клонҳо мебошад, пешниҳод мекунад. Китобхона Abs-ро бар зидди антигенҳои сершумор, ки баъзеи онҳо бо наномолярӣ алоқамандӣ доранд, ба даст овард. Тавлиди китобхонаи антителоҳои инсонӣ ба технологияи намоиши фаги M13 асос ёфтааст (дар расми зер нишон дода шудааст).