บริการวิเคราะห์ลักษณะเฉพาะของแอพทาเมอร์

ความสามารถในการจับยึดของแอพทาเมอร์ที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมที่สุดได้รับการตรวจสอบโดยเทคนิคที่เกี่ยวข้องกับการทดสอบการจับยึดของแอพทาเมอร์ ตัวอย่างเช่น การวัดความร้อนแบบไอโซเทอร์มอล (Isothermal Titration Calorimetry, ITC), การวิเคราะห์ด้วยเครื่องฟลูออโรไซโตเมตรี (Flow Cytometry, FCM), การเรโซแนนซ์ของพลาสมาบนพื้นผิว (Surface Plasmon Resonance, SPR), ไมโครฟลูอิดิกส์ เป็นต้น ความสามารถในการจับยึดของแอพทาเมอร์มักแสดงด้วยค่าคงที่การแตกตัว (Dissociation Constant, KD) ซึ่งเป็นปริมาณทางกายภาพที่ใช้ในการวัดระดับการแตกตัวของโมเลกุลในปฏิกิริยาผันกลับได้ ยิ่งค่า KD น้อยเท่าไร สารประกอบเชิงซ้อนก็จะยิ่งเสถียรมากขึ้น นั่นคือ ความสามารถในการจับยึดก็จะยิ่งแข็งแกร่งขึ้น ในทางกลับกัน ยิ่งค่า KD มากเท่าไร สารประกอบเชิงซ้อนก็จะยิ่งไม่เสถียรมากขึ้น และความสามารถในการจับยึดก็จะยิ่งอ่อนลง ขั้นตอนนี้เป็นกุญแจสำคัญในการระบุประสิทธิภาพของแอพทาเมอร์ เพื่อให้แน่ใจว่าความสามารถในการจับยึดของแอพทาเมอร์ได้รับการพัฒนาอย่างเต็มที่ และสามารถจับกับโมเลกุลเป้าหมายด้วยความสามารถในการจับยึดและความจำเพาะสูงในการใช้งานจริง

รูปที่ 1 กระบวนการเพิ่มความสามารถในการจับยึดของแอพทาเมอร์ แหล่งอ้างอิง:คิงฮอร์น เอบี, เฟรเซอร์ รัฐลุยเซียนา, 2017

นอกเหนือจากการตรวจสอบความสัมพันธ์แล้ว ยังจำเป็นต้องตรวจสอบการทำงานของแอพทาเมอร์ด้วย ซึ่งรวมถึงการตรวจสอบความเสถียร ความจำเพาะ และปฏิกิริยาของแอพทาเมอร์กับโมเลกุลอื่นๆ ในสภาพแวดล้อมเฉพาะ ผลลัพธ์ของการตรวจสอบการทำงานจะมีผลโดยตรงต่อคุณค่าของแอพทาเมอร์ในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์และการประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรม

การตรวจสอบเฉพาะเจาะจง

โดยปกติแล้ว วิธีการที่เหมาะสมจะถูกเลือกตามเป้าหมายการใช้งานเฉพาะของแอพทาเมอร์กรดนิวคลีอิก

(1) การทดสอบระดับโมเลกุล: การใช้เทคนิคทางชีววิทยาโมเลกุล เช่น เจลอิเล็กโทรโฟเรซิส เวสเทิร์นบลอต เป็นต้น เพื่อตรวจจับสารเชิงซ้อนที่เกิดขึ้นหลังจากที่แอพทาเมอร์รวมเข้ากับโมเลกุลเป้าหมาย หรือตรวจจับการเปลี่ยนแปลงในระดับการแสดงออกของโมเลกุลเป้าหมายที่เกิดจากแอพทาเมอร์

(2) การทดสอบระดับเซลล์: โดยใช้เทคโนโลยีการเพาะเลี้ยงเซลล์ นำแอพทาเมอร์ไปบ่มกับเซลล์เป้าหมายเพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางชีวภาพ เช่น รูปร่างของเซลล์ การเพิ่มจำนวนและการตายของเซลล์ และประเมินกิจกรรมทางชีวภาพของแอพทาเมอร์

(3) การทดสอบแบบจำลองสัตว์: ในแบบจำลองสัตว์ที่เหมาะสม จะมีการให้แอพทาเมอร์กรดนิวคลีอิกโดยการฉีดหรือการให้ยา และจะสังเกตตัวบ่งชี้ทางสรีรวิทยาและการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาของสัตว์เพื่อประเมินกิจกรรมทางชีวภาพและความปลอดภัยของแอพทาเมอร์ในร่างกาย