บริการพัฒนาแอนติบอดีโมโนโคลนอล

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์สามารถให้บริการด้านการทำนายอีพิโทป การสังเคราะห์เปปไทด์ การแสดงออกของโปรตีน การผลิตแอนติบอดีแบบโพลีโคลนอลหรือโมโนโคลนอล รวมถึงการทำให้บริสุทธิ์ของแอนติบอดีจากเซลล์เพาะเลี้ยง ของเหลวในช่องท้อง หรือซีรั่มทั้งหมด

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์เรามีประสบการณ์ในการให้บริการลูกค้าด้วยบริการสร้างเซลล์สายพันธุ์ต่างๆ ที่เสถียร รวมถึงเซลล์ไฮบริดโดมา เซลล์สายพันธุ์สำหรับการแก้ไขจีโนม เซลล์สายพันธุ์สำหรับการลดการแสดงออกของยีน และเซลล์สายพันธุ์สำหรับการเพิ่มการแสดงออกของยีน เราพยายามนำเสนอบริการสร้างเซลล์สายพันธุ์แบบกำหนดเองขั้นสูงแก่ลูกค้าทุกราย และบริการของเราได้รับการพิสูจน์แล้วและเป็นที่ไว้วางใจ

กลยุทธ์การพัฒนาแอนติบอดี

1. การออกแบบและการเตรียมแอนติเจน
แอนติเจนเหล่านี้อาจเป็นโปรตีน เปปไทด์ หรือโมเลกุลอื่นๆ การออกแบบอิมมูโนเจนต้องใช้แนวทางที่ครอบคลุมซึ่งบูรณาการความรู้เกี่ยวกับโครงสร้างของแอนติเจน ภูมิคุ้มกันวิทยา และระบบการนำส่ง Alpha Lifetech มีเทคโนโลยีการออกแบบแอนติเจนที่สามารถออกแบบอิมมูโนเจนให้กับลูกค้าตามความต้องการได้
บริษัท Alpha Lifetech จัดจำหน่ายผลิตภัณฑ์โปรตีนรีคอมบิแนนท์ให้ลูกค้าได้เลือกใช้ เรามีระบบการแสดงออกของโปรตีนหลากหลายชนิด เช่น ระบบการแสดงออกในแบคทีเรีย E. coli, ระบบการแสดงออกในยีสต์, ระบบการแสดงออกในไวรัสบาคุโลและแมลง, ระบบการแสดงออกในเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เป็นต้น เพื่อผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่คุณต้องการสำหรับการวิจัย

2. การสร้างภูมิคุ้มกันในสัตว์
บริษัท Alpha Lifetech สามารถจัดหาสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันให้แก่ลูกค้าได้ และยังมีสัตว์ที่มีภูมิคุ้มกันให้เลือกใช้ เช่น หนู กระต่าย แกะ อัลปากา หนูตะเภา หนูแฮมสเตอร์ เป็นต้น

3. วิธีการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนอล

●การผลิตแมโครฟาจด้วยเทคโนโลยีไฮบริดโดมา
ไฮบริดโดมาคือเซลล์ลูกผสมที่เกิดจากการรวมตัวของเซลล์สองชนิด ได้แก่ เซลล์ไมอีโลมาของหนูและเซลล์พลาสมา (ลิมโฟไซต์ บี) โดยเซลล์เฮเทอโรไซกัสสามารถสร้างแอนติบอดีอย่างต่อเนื่องต่อแอนติเจนที่สนใจในหลอดทดลอง การผลิตเซลล์ไฮบริดโดมาประกอบด้วยสามส่วน ได้แก่ การออกแบบแอนติเจน (แฮปเทน โมเลกุลขนาดเล็ก และเปปไทด์) การสร้างภูมิคุ้มกันในสัตว์ การรวมเซลล์ และการคัดกรองโคลนบวก การใช้ระเบียบวิธีสร้างภูมิคุ้มกันที่เป็นเอกลักษณ์ ทำให้เราได้ประสิทธิภาพการรวมเซลล์ที่สูงเป็นพิเศษ (1-10 ไฮบริดโดมาต่อเซลล์บี 1,000 เซลล์) และระดับแอนติบอดีสูง ซึ่งช่วยเพิ่มอัตราความสำเร็จในการทดสอบวิเคราะห์ในขั้นตอนต่อไป ซึ่งรวมถึงการคัดกรองทางชีวเคมี การทดสอบในหลอดทดลองโดยใช้เซลล์ และการศึกษาในสัตว์

●การผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนอล (MAbs) โดยใช้เทคโนโลยีการแสดงผลฟาจ
วิธีการแสดงผลด้วยฟาจ (Phage display) เป็นอีกวิธีหนึ่งในการสร้างแอนติบอดีโมโนโคลนอล โดยแยกเซลล์ B-lymphocytes ออกจากเลือดสัตว์และสกัด mRNA ออกมา จากนั้นใช้ PCR แปลง mRNA นี้เป็น cDNA ซึ่งจะขยายส่วน VH และ VL ทั้งหมด จากนั้นจึงโคลนส่วนเหล่านี้ลงในเวกเตอร์ โดยทั่วไปจะเป็นชิ้นส่วนตัวแปรแบบโซ่เดี่ยว (scFv) ร่วมกับโปรตีน PIII ของแบคทีริโอฟาจ ต่อมาใช้โครงสร้างนี้ในการติดเชื้อ E. coli ทำให้เกิดไลบรารีที่มีเซลล์ประมาณ 10^10 เซลล์ โดยการฉีดเชื้อด้วยฟาจตัวช่วย E. coli จะสามารถหลั่งแบคทีริโอฟาจที่มีส่วน VH และ VL เป็นส่วนหนึ่งของเปลือกหุ้มได้ หลังจากนั้น สามารถเลือกส่วน VH และ VL ที่จำเพาะซึ่งกำหนดเป้าหมายไปยังแอนติเจนที่สนใจ และนำไปใช้ในการฉีดเชื้อแบคทีริโอฟาจซ้ำไปยัง E. coli จากนั้นจึงแยกเซลล์ที่มีพลาสมิดและทำการลำดับดีเอ็นเอ

4. การคัดกรองฟิวชั่น

●การหลอมรวมและการคัดเลือกเซลล์
จากนั้นเซลล์บีที่เก็บเกี่ยวได้จะถูกรวมเข้ากับเซลล์ไมอีโลมา ซึ่งเป็นเซลล์มะเร็งที่สามารถเพิ่มจำนวนได้อย่างไม่จำกัดในสภาพการเพาะเลี้ยง โดยทั่วไปแล้วการรวมเซลล์จะทำได้โดยใช้เทคนิคต่างๆ เช่น การรวมเซลล์ด้วยโพลีเอทิลีนไกลคอล (PEG)
หลังจากรวมเซลล์ไฮบริดโดมาแล้ว เซลล์เหล่านั้นจะถูกนำไปเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเซลล์แบบคัดเลือก ซึ่งอนุญาตให้เฉพาะเซลล์ไฮบริดโดมาเท่านั้นที่จะอยู่รอดได้ โดยปกติอาหารเลี้ยงเซลล์นี้จะมีอะมิโนเทอริน ซึ่งช่วยป้องกันการเจริญเติบโตของเซลล์ไมอีโลมาที่ไม่รวมตัวกัน

●การคัดกรองและการคัดเลือก
เซลล์ไฮบริดโดมาที่ได้จะถูกคัดกรองเพื่อหาเซลล์ที่สร้างแอนติบอดีจำเพาะต่อแอนติเจนเป้าหมาย โดยทั่วไปจะใช้วิธีการต่างๆ เช่น การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนต์แบบเอนไซม์เชื่อมโยง (ELISA), เวสเทิร์นบลอต, อิมมูโนพรีซิปิเทชัน และโฟลว์ไซโตเมทรี

เมื่อระบุเซลล์ไฮบริดโดมาที่ผลิตแอนติบอดีได้แล้ว จะทำการโคลนเซลล์เหล่านั้นเพื่อสร้างประชากรเซลล์ที่เหมือนกันทุกประการ ซึ่งจะทำให้มั่นใจได้ว่าแอนติบอดีที่ผลิตโดยเซลล์ไฮบริดโดมาแต่ละเซลล์นั้นเหมือนกันทุกประการ

5. การตรวจสอบการทำงานของแอนติบอดี
บริษัท Alpha Lifetech ให้บริการตรวจสอบความถูกต้องของการทำงานของแอนติบอดี เช่น การวิเคราะห์ด้วยวิธี Western blotting, immunohistochemistry หรือการทดสอบการทำงาน เพื่อระบุลักษณะของแอนติบอดีโมโนโคลนอล และยืนยันความจำเพาะ ความสามารถในการจับ และการทำงานของแอนติบอดี

6. การปรับปรุงประสิทธิภาพของแอนติบอดี
การทำให้บริสุทธิ์ของแอนติบอดีจากสารละลายเพาะเลี้ยงโดยใช้เทคนิคต่างๆ เช่น โครมาโทกราฟีแบบอาศัยความสัมพันธ์กับโปรตีน A หรือโปรตีน G และ Alpha Lifetech ยังสามารถจัดหาวิธีการดัดแปลงแอนติบอดีเพื่อปรับปรุงความสามารถในการจับของแอนติบอดีได้อีกด้วย

7. การผลิตแอนติบอดี
บริษัท Alpha Lifetech สามารถประเมินแอนติบอดีที่เหมาะสมสำหรับการคัดกรองปริมาณมาก (high-throughput screening) และการผลิตในระดับขนาดใหญ่ได้