แพลตฟอร์มการพัฒนาแอนติบอดีแบบ Phage Display
เทคโนโลยีการแสดงผลฟาจ

ขั้นตอนการผลิตแอนติบอดีแบบ Phage Display
| ขั้นตอน | เนื้อหาบริการ | ไทม์ไลน์ |
|---|---|---|
| ขั้นตอนที่ 1: การสร้างภูมิคุ้มกันให้สัตว์ | (1) การฉีดวัคซีนสัตว์ 4 ครั้ง ฉีดวัคซีนกระตุ้น 1 ครั้ง รวมทั้งหมด 5 ครั้ง (2) เก็บซีรั่มที่เป็นลบก่อนการฉีดวัคซีน และทำการ ELISA ในโดสที่สี่เพื่อตรวจหาระดับไทเตอร์ในซีรั่ม (3) หากระดับแอนติบอดีในซีรั่มของวัคซีนเข็มที่สี่เป็นไปตามข้อกำหนด จะมีการให้วัคซีนเพิ่มเติมอีกหนึ่งเข็ม 7 วันก่อนการเก็บตัวอย่างเลือด หากไม่เป็นไปตามข้อกำหนด การฉีดวัคซีนตามปกติจะดำเนินต่อไป (4) ศักยภาพที่มีคุณสมบัติเหมาะสม การเก็บเลือดและการแยกโมโนไซต์ | 10 สัปดาห์ |
| ขั้นตอนที่ 2: การเตรียม cDNA | (1) การสกัด RNA ทั้งหมดจาก PBMC (ชุดสกัด RNA) (2) การเตรียม cDNA ด้วยวิธี RT-PCR ที่มีความแม่นยำสูง (ชุดอุปกรณ์การถอดรหัสย้อนกลับ) | 1 วัน |
| ขั้นตอนที่ 3: การสร้างคลังแอนติบอดี | (1) โดยใช้ cDNA เป็นแม่แบบ ยีนจะถูกขยายด้วย PCR สองรอบ (2) การสร้างและการแปลงฟาจ: เวกเตอร์ฟาจมิดแบบตัดต่อยีน การแปลงแบคทีเรียโฮสต์ TG1 ด้วยอิเล็กโทรโพเรชัน การสร้างคลังแอนติบอดี (3) การระบุ: สุ่มเลือกโคลน 24 ตัว อัตราการระบุ PCR ที่เป็นบวก + อัตราการแทรก (4) การเตรียมฟาจแบบช่วยเหลือ: การขยายและการทำให้บริสุทธิ์ของฟาจ M13 (5) การกู้คืนห้องสมุดแสดงผลฟาจ | 3-4 สัปดาห์ |
| ขั้นตอนที่ 4: การคัดกรองคลังแอนติบอดี (3 รอบ) | (1) การคัดกรอง 3 รอบเริ่มต้น (การคัดกรองเฟสของแข็ง): การคัดกรองแรงดันเพื่อกำจัดแอนติบอดีที่ไม่จำเพาะให้ได้มากที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้ (2) การขยายโคลนเดี่ยวที่เลือกแบคทีริโอเฟจ + การแสดงออกที่เหนี่ยวนำด้วย IPTG + การตรวจจับโคลนบวกด้วย ELISA (3) โคลนบวกทั้งหมดถูกเลือกสำหรับการจัดลำดับยีน | 4-5 สัปดาห์ |
บริการสนับสนุน
เราสามารถให้บริการสร้างคลังภูมิคุ้มกันจากสัตว์และบริการคัดกรองคลังแอนติบอดีธรรมชาติที่หลากหลายตามความต้องการของลูกค้า
เป้าหมายหลายเป้าหมาย
มีบริการค้นหาแอนติบอดีที่มีเป้าหมายหลากหลาย ได้แก่ โปรตีน เปปไทด์ โมเลกุลขนาดเล็ก ไวรัส โปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์ mRNA เป็นต้น
เวกเตอร์หลายตัว
บริการสร้างคลังไวรัสแบคทีริโอเฟจแบบเฉพาะบุคคล เราสามารถจัดหาไวรัสแบคทีริโอเฟจหลากหลายชนิด รวมถึง PMECS, pComb3X และ pCANTAB 5E และปรับแต่งให้ตรงตามความต้องการของลูกค้า
แพลตฟอร์มที่พัฒนาแล้ว
ความจุในการจัดเก็บสามารถสูงถึง 10^8-10^9 อัตราการแทรกสูงกว่า 90% และความสัมพันธ์ของแอนติบอดีที่ได้จากการคัดกรองโดยทั่วไปอยู่ในระดับ nM/pM
บริการพัฒนาแอนติบอดีโมโนโคลนอล
เราสามารถให้บริการพัฒนาแอนติบอดีโมโนโคลนอลคุณภาพสูง ความบริสุทธิ์สูง และความจำเพาะสูง รวมถึงการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนอลจากหนูและกระต่าย
แพลตฟอร์มเทคโนโลยีไฮบริดโดมา
รวมถึงโครงการสร้างภูมิคุ้มกัน บริการเตรียมแอนติบอดี การทำให้แอนติบอดีบริสุทธิ์ การจัดลำดับแอนติบอดีความเร็วสูง การตรวจสอบความถูกต้องของแอนติบอดี เป็นต้น
แพลตฟอร์มการคัดแยกเซลล์บีเดี่ยว
บริษัท Alpha Lifetech มีข้อได้เปรียบในด้านระยะเวลาการคัดกรองและการผลิตแอนติบอดีคุณภาพสูง สามารถให้บริการด้านการออกแบบ สังเคราะห์ และดัดแปลงแอนติเจน ภูมิคุ้มกันในสัตว์ การคัดกรองโดยการเพิ่มจำนวนเซลล์ B เดี่ยว และการจัดลำดับจีโนมของเซลล์เดี่ยวได้
แพลตฟอร์มการพัฒนาแอนติบอดีแบบ Phage Display
บริษัท Alpha Lifetech สามารถให้บริการด้านเทคนิคในการพัฒนาแอนติบอดีแบบ Phage Display ตั้งแต่การเตรียมแอนติบอดี การทำให้บริสุทธิ์ของแอนติบอดี การจัดลำดับดีเอ็นเอของแอนติบอดี เป็นต้น






16 กรกฎาคม 2561 

