แพลตฟอร์มห้องสมุดเปปไทด์แบบ Phage Display
ด้วยเทคโนโลยีฟาจดิสเพลย์ (phage display) บริษัท Alpha Lifetech สามารถให้บริการลูกค้าด้วยบริการสร้างและคัดกรองไลบรารีเปปไทด์ฟาจดิสเพลย์คุณภาพสูง ซึ่งรวมถึงไลบรารีเปปไทด์เชิงเส้น 7 ตัว, ไลบรารีเปปไทด์เชิงเส้น 9 ตัว, ไลบรารีเปปไทด์เชิงเส้น 10 ตัว, ไลบรารีเปปไทด์เชิงเส้น 15 ตัว, ไลบรารีเปปไทด์เชิงเส้น 12 ตัว, ไลบรารีเปปไทด์แบบวงจร 7 ตัว และไลบรารีเปปไทด์อื่นๆ โดยมีความหลากหลายของไลบรารี อัตราการแทรก และอัตราความสำเร็จสูงกว่า 90% เพื่อตอบสนองความต้องการที่แตกต่างกันของลูกค้าสำหรับไลบรารีเปปไทด์ฟาจดิสเพลย์
ไลบรารีแบบฟาจดิสเพลย์ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยและการประยุกต์ใช้ทางชีวการแพทย์ ตัวอย่างเช่น ในด้านวิศวกรรมแอนติบอดีและการพัฒนาแอนติบอดี ไลบรารีแบบฟาจดิสเพลย์สามารถใช้ในการคัดกรองและปรับปรุงแอนติบอดีสายพันธุ์ต่างๆ ในการคัดกรองยาและการค้นหาเป้าหมายยา ไลบรารีแบบฟาจดิสเพลย์สามารถใช้ในการค้นหาโปรตีนหรือเปปไทด์ที่มีศักยภาพเป็นยา ในการวิจัยวัคซีน ไลบรารีแบบฟาจดิสเพลย์สามารถใช้ในการคัดเลือกแอนติเจนวัคซีนและการพัฒนาวัคซีน นอกจากนี้ ไลบรารีแบบฟาจดิสเพลย์ยังสามารถใช้ในหลายสาขา เช่น การวิจัยปฏิสัมพันธ์ของโปรตีน การวินิจฉัยและการรักษาโรคมะเร็ง
เทคโนโลยีการแสดงผลฟาจ
เทคโนโลยีการแสดงผลด้วยฟาจ (Phage display technology) เป็นเทคโนโลยีที่รวมยีนโปรตีนเป้าหมายเข้ากับยีนโปรตีนบนพื้นผิวของฟาจ ทำให้โปรตีนเป้าหมายปรากฏบนพื้นผิวของฟาจในรูปของโปรตีนลูกผสมผ่านการแสดงออกของยีน โปรตีนที่แสดงอยู่บนพื้นผิวของฟาจเหล่านี้สามารถรักษาสภาพโครงสร้างเชิงพื้นที่และกิจกรรมทางชีวภาพไว้ได้ และสามารถคัดกรอง ตรวจจับ และจดจำได้โดยการทำปฏิกิริยากับแอนติบอดีจำเพาะหรือโมเลกุลอื่นๆ วัตถุที่ใช้ในการแสดงผลด้วยเทคโนโลยีฟาจ ได้แก่ แอนติบอดี ชิ้นส่วนแอนติบอดี ส่วนของเปปไทด์ ซีดีเอ็นเอ เป็นต้น
ระบบเทคโนโลยีการแสดงผลด้วยฟาจส่วนใหญ่ประกอบด้วยระบบการแสดงผลด้วยฟาจ M13 (เช่น ระบบการแสดงผล PⅢ, ระบบการแสดงผล PⅧ เป็นต้น), ระบบการแสดงผลด้วยฟาจ λ, ระบบการแสดงผลด้วยฟาจ T4, ระบบการแสดงผลด้วยฟาจ T7 เป็นต้น แต่ละระบบมีลักษณะเฉพาะและเหมาะสมกับความต้องการในการวิจัยที่แตกต่างกัน ฟาจ M13 เนื่องจากคุณสมบัติไลโซเจนิค ฟาจ M13 จึงไม่ทำลายเซลล์เจ้าบ้านหลังจากติดเชื้อ ทำให้สามารถจำลองตัวเองและแสดงชิ้นส่วนต่างชาติภายในเซลล์เจ้าบ้านได้อย่างต่อเนื่อง เหมาะสำหรับการคัดกรองในระยะยาวและการแสดงออกที่เสถียร ส่วนฟาจ T7 เนื่องจากมีวงจรชีวิตสั้นและประสิทธิภาพการจำลองตัวเองสูง จึงสามารถผลิตฟาจลูกหลานจำนวนมากได้อย่างรวดเร็ว เหมาะสำหรับการคัดกรองปริมาณมากและการแสดงออกอย่างรวดเร็ว
| เอ็ม13 ฟาจ | ฟาจ T7 | |
|---|---|---|
| 1. โครงสร้างทางสัณฐานวิทยา | ฟาจเส้นใย | ฟาจทรงหลายเหลี่ยม |
| 2. สารพันธุกรรม | โมเลกุล DNA แบบวงกลมสายเดี่ยว | ดีเอ็นเอแบบเส้นตรง สองสาย และส่วนปลายสุดเป็นส่วนเกิน |
| 3. การจำลองแบบและการติดเชื้อ | ฟาจไลโซเจนิค ซึ่งประกอบขึ้นในเพริพลาสม์ สามารถถูกหลั่งออกจากเยื่อหุ้มเซลล์แบคทีเรียได้โดยไม่ทำให้เซลล์เจ้าบ้านแตกสลาย | แบคทีริโอเฟจที่มีความรุนแรง ซึ่งเป็นลูกหลานของแบคทีริโอเฟจที่ประกอบขึ้นในไซโตพลาสซึมของแบคทีเรีย จะถูกปล่อยออกมาโดยการแตกของเยื่อหุ้มเซลล์ |
| 4. ระบบแสดงผล | มีการสร้างระบบแสดงผลโดยใช้โปรตีนแคปซิด pIII และ PVIII ซึ่งเหมาะสมสำหรับการแสดงผลเปปไทด์/โปรตีนต่างชนิดที่มีขนาดแตกต่างกัน | ระบบแสดงผลนี้สร้างขึ้นจากโปรตีนแคปซิด 10B ซึ่งไม่จำเป็นต้องมีกระบวนการหลั่ง และเหมาะสมสำหรับการแสดงผลเปปไทด์/โปรตีนที่มีผลยับยั้งกระบวนการหลั่ง |
| 5. ข้อได้เปรียบด้านการใช้งาน | เหมาะสำหรับการแสดงผลและการคัดกรองเปปไทด์โมเลกุลขนาดเล็กในระยะยาว | วิธีนี้มีข้อดีคือช่วยให้สามารถแสดงออกโปรตีนขนาดใหญ่ได้อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพสูง |
ประเภทของไลบรารีเปปไทด์แบบ Phage Display
บริษัท Alpha Lifetech มีประสบการณ์ในการสร้างและคัดกรองไลบรารีเปปไทด์แบบฟาจดิสเพลย์ และมีไลบรารีเปปไทด์หลากหลายประเภทให้เลือก โดยแบ่งตามความยาวของเปปไทด์ได้เป็นไลบรารีเปปไทด์ 7 ตัว, 9 ตัว, 10 ตัว, 12 ตัว และ 15 ตัว และแบ่งตามโครงสร้างเชิงพื้นที่ของพอลิเปปไทด์ได้เป็นไลบรารีเปปไทด์แบบฟาจเชิงเส้นและไลบรารีเปปไทด์แบบฟาจเชิงวงแหวน
ไลบรารีเปปไทด์ฟาจเชิงเส้น
ยีนเปปไทด์จะถูกแทรกเข้าไปในบริเวณที่เข้ารหัสโปรตีนเปลือกของจีโนมของฟาจ ซึ่งโดยปกติจะเป็น pIII หรือ PVIII และแสดงผลออกมาเป็นสายโซ่ตรง เปปไทด์สายโซ่ตรงอาจสลายตัวได้ง่ายในร่างกาย และความสามารถในการจับและเสถียรภาพของมันอาจได้รับผลกระทบ
ไลบรารีเปปไทด์ฟาจแบบวงจร
เปปไทด์วงแหวนที่ได้รับการดัดแปลงจะก่อตัวเป็นโครงสร้างคงที่ภายใต้การทำงานของพันธะไดซัลไฟด์หรือพันธะการจับยึดอื่นๆ ซึ่งไม่เพียงแต่จะช่วยเพิ่มความเสถียรในการเผาผลาญและการดูดซึมเข้าสู่ร่างกายอย่างมากเท่านั้น แต่ยังตอบสนองความต้องการในการจับยึดของโครงสร้างตัวรับ-ลิแกนด์ (แอนติบอดี-แอนติเจน) ได้ดียิ่งขึ้นอีกด้วย
กระบวนการสร้างไลบรารีเปปไทด์แบบ Phage Display
การคัดเลือกฟาจ
โดยทั่วไปจะเลือกใช้ฟาจชนิด M13 หรือฟาจชนิด T7 เป็นพาหะ
การสร้างไลบรารีเปปไทด์แสดงผลฟาจ
สร้างเวกเตอร์ฟาจที่สามารถบรรจุลำดับรหัสโปรตีนหรือพอลิเปปไทด์จากภายนอก ซึ่งโดยปกติจะรวมถึงโปรโมเตอร์ เครื่องหมายคัดเลือก และองค์ประกอบควบคุมที่เหมาะสม การแทรกรหัสของโปรตีนหรือเปปไทด์จากภายนอกเข้าไปในตัวนำฟาจ โดยปกติจะใช้วิธีการตัดด้วยเอนไซม์จำกัดและการเชื่อมต่อ เวกเตอร์ฟาจที่สร้างขึ้นจะถูกถ่ายโอนเข้าไปในเซลล์เจ้าบ้าน ทำให้ฟาจสามารถจำลองตัวเองและแสดงออกโปรตีนหรือเปปไทด์จากภายนอกภายในเซลล์ได้ ไลบรารีฟาจที่มีโปรตีนหรือเปปไทด์จากภายนอกหลายชนิดจะถูกเตรียมขึ้นผ่านการถ่ายโอนและการขยายพันธุ์อย่างกว้างขวาง
การคัดกรองไลบรารีเปปไทด์ด้วยฟาจดิสเพลย์
ตรึงโมเลกุลเป้าหมาย (เช่น โปรตีน ตัวรับ หรือแอนติบอดี) ไว้บนตัวพาแบบของแข็ง บ่มไลบรารีเปปไทด์แบบฟาจดิสเพลย์ที่สร้างขึ้นกับเป้าหมายที่ตรึงไว้ เพื่อให้เปปไทด์บนฟาจจับกับโมเลกุลเป้าหมาย ในระหว่างกระบวนการนี้ แบคทีริโอฟาจที่ไม่จับจะถูกกำจัดออกโดยการล้าง ในขณะที่แบคทีริโอฟาจที่จับกับเป้าหมายจะยังคงอยู่ และแบคทีริโอฟาจที่จับได้อย่างมีประสิทธิภาพสูงจะถูกชะออกมา แบคทีริโอฟาจที่ได้จะถูกขยายพันธุ์โดยการติดเชื้อ Escherichia coli แล้วจึงนำไปคัดกรองในรอบต่อไป โดยปกติแล้วจะต้องทำการคัดกรอง 3-5 รอบเพื่อให้ได้เปปไทด์ที่มีประสิทธิภาพในการจับสูง
การออกแบบและการสังเคราะห์เปปไทด์
สังเคราะห์เปปไทด์โดยอิงจากตำแหน่งการคัดกรอง

รูปที่ 1 กระบวนการสร้างและคัดกรองไลบรารีเปปไทด์แบบฟาจดิสเพลย์

แพลตฟอร์มการสร้างคลังเปปไทด์แบบ Phage Display
บริษัท Alpha Lifetech มีเทคโนโลยีการสร้างไลบรารีเปปไทด์หลายประเภท โดยหลักๆ แล้วเราให้บริการสร้างไลบรารีเปปไทด์ T7 และบริการสร้างไลบรารีเปปไทด์ M13 ตามประเภทของฟาจ
อ่านเพิ่มเติม
แพลตฟอร์มการคัดกรองไลบรารีเปปไทด์แบบ Phage Display
Alpha Lifetech มีประสบการณ์มากมายในการคัดกรองไลบรารีเปปไทด์ฟาจ โดยให้การสนับสนุนทางเทคนิคที่แข็งแกร่งสำหรับการค้นพบยาโมเลกุลขนาดเล็ก การวินิจฉัยทางคลินิก การรักษาโรค และการวิจัยทางชีววิทยา
อ่านเพิ่มเติม หากคุณมีคำถามใด ๆ โปรดติดต่อเราได้ตลอดเวลา
Leave Your Message
0102





