บทนำสู่ห้องสมุดแอนติบอดีสังเคราะห์

คลังแอนติบอดีสังเคราะห์ หรือเรียกอีกอย่างว่าคลัง De novo เป็นวิธีการสังเคราะห์ที่ใช้เทคนิคต่างๆ เช่น การสังเคราะห์ DNA หรือการแสดงฟาจ เพื่อออกแบบและสังเคราะห์ภูมิภาคแปรผันของแอนติบอดีที่สมบูรณ์ รวมถึงภูมิภาคกรอบงานและ CDR โดยไม่ต้องพึ่งพาคลังแอนติบอดีแบบไร้เดียงสา

คลังแอนติบอดีกึ่งสังเคราะห์สร้างขึ้นโดยการรวมคลังแอนติบอดีที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติเข้ากับความหลากหลายทางชีวภาพสังเคราะห์ โดยปกติจะเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ดีเอ็นเอโอลิโกนิวคลีโอไทด์เพื่อสร้างชุดภูมิภาคกำหนดองค์ประกอบเสริม (Complementary Defined Region: CDR) ที่แตกต่างกัน ซึ่งจากนั้นจะรวมกับโครงสร้างแอนติบอดีคงที่ที่ได้มาจากแหล่งธรรมชาติ เช่น เซลล์บีของมนุษย์หรือสัตว์ CDR ที่สังเคราะห์ขึ้นจะนำความหลากหลายทางชีวภาพมาสู่คลัง ส่งผลให้แอนติบอดีกำหนดเป้าหมายไปที่เอพิโทปที่หลากหลาย คลังแอนติบอดีกึ่งสังเคราะห์นี้ให้ความสมดุลระหว่างความหลากหลายทางชีวภาพตามธรรมชาติของระบบภูมิคุ้มกันและความหลากหลายทางชีวภาพที่ควบคุมได้ซึ่งเกิดขึ้นจากวิธีการสังเคราะห์

ความแตกต่างระหว่างคลังแอนติบอดีแบบ naïve และแบบสังเคราะห์ขึ้นอยู่กับแหล่งที่มาของยีนอิมมูโนโกลบูลิน ในขณะเดียวกัน ความแตกต่างระหว่างคลังแอนติบอดีแบบกึ่งสังเคราะห์และแบบสังเคราะห์อยู่ที่ คลังแอนติบอดีแบบกึ่งสังเคราะห์ประกอบด้วยส่วนของแอนติบอดีแบบ naïve บางส่วน เช่น ห่วงโซ่เบาหรือห่วงโซ่หนัก และมีเพียงส่วนเดียวเท่านั้นที่สังเคราะห์ในหลอดทดลอง ในขณะที่คลังแอนติบอดีแบบสังเคราะห์ได้มาจากการสังเคราะห์เทียมด้วย PCR ในหลอดทดลอง

Alpha Lifetech สามารถให้บริการได้

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์สามารถนำเสนอคลังแอนติบอดีแบบกึ่งสังเคราะห์/สังเคราะห์จากสัตว์และมนุษย์ โดยอาศัยแพลตฟอร์มการค้นหาแอนติบอดีระดับมืออาชีพของเรา ด้วยประสบการณ์หลายปีด้านการดัดแปลงพันธุกรรมและการสร้างคลังแอนติบอดี เราจึงสามารถสร้างคลังแอนติบอดีสังเคราะห์ที่สามารถผลิตแอนติบอดีสังเคราะห์ที่มีความสัมพันธ์และความจำเพาะเหนือกว่าความสามารถของแอนติบอดีตามธรรมชาติอัลฟา ไลฟ์เทคผู้เชี่ยวชาญมีความภูมิใจที่จะประกาศว่าเราสามารถรับประกันอัตราความสำเร็จที่สูงในการสร้างคลังแอนติบอดีที่มีโคลนอิสระ 10^8 – 10^10 โคลน

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์ภูมิใจที่ได้นำเสนอบริการสร้างคลังแอนติบอดีที่ครอบคลุม เพื่อตอบสนองความต้องการที่หลากหลายของนักวิจัยทั่วโลก ซึ่งรวมถึง scFv, Fab, VHH antibody และคลังแอนติบอดีที่ออกแบบเฉพาะบุคคล เป้าหมายของเราคือการทำความเข้าใจและตอบสนองความต้องการของลูกค้าแต่ละราย และช่วยเหลือเกี่ยวกับปัญหาต่างๆ ที่กำลังจะเกิดขึ้นในงานวิจัย

กระบวนการบริการการสร้างห้องสมุดแอนติบอดีสังเคราะห์

ออกแบบ
ขั้นตอนการออกแบบเกี่ยวข้องกับการเลือกกรอบงานแอนติบอดีและบริเวณที่กำหนดความสมบูรณ์ (Complementarity-determining Region: CDR) โดยอ้างอิงจากลำดับแอนติบอดีที่มีอยู่หรือข้อมูลโครงสร้าง แอนติบอดี CDR สังเคราะห์ยังสามารถออกแบบเพื่อแนะนำฟังก์ชันการทำงานเฉพาะหรือเพิ่มคุณสมบัติการจับได้อีกด้วย

สังเคราะห์
DNA สังเคราะห์ที่เข้ารหัสลำดับแอนติบอดีที่ออกแบบไว้ ซึ่งรวมถึงทั้งบริเวณกรอบและ CDR ได้รับการสังเคราะห์โดยใช้วิธีทางเคมีหรือเอนไซม์

การประกอบ
ชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่สังเคราะห์ขึ้นจะถูกประกอบเป็นเวกเตอร์แสดงออกของแอนติบอดีโดยใช้เทคนิคต่างๆ เช่น PCR การผูก หรือการประกอบแบบกิ๊บสัน จากนั้นเวกเตอร์เหล่านี้สามารถนำเข้าสู่ระบบแสดงออก เช่น เซลล์แบคทีเรีย ยีสต์ หรือสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เพื่อผลิตแอนติบอดี

การคัดกรองและการคัดเลือก
คลังแอนติบอดีที่สร้างขึ้นจะได้รับการคัดกรองและคัดเลือกแอนติบอดีที่มีคุณสมบัติตามต้องการโดยใช้วิธีการคัดกรองแบบความเร็วสูง ซึ่งอาจใช้เทคนิคต่างๆ เช่น การแสดงผลฟาจ การแสดงผลยีสต์ หรือการแสดงผลไรโบโซม ขึ้นอยู่กับรูปแบบและการประยุกต์ใช้ของคลังแอนติบอดี

บริการก่อสร้างห้องสมุดแอนติบอดีสังเคราะห์

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์ให้บริการออกแบบและสังเคราะห์คลังแอนติบอดีแบบครบวงจรแก่ลูกค้า โดยการผูกคลังแอนติบอดี V-gene ทั้งสายหนักและสายเบาเข้ากับเวกเตอร์ฟาจโดยใช้ระบบการรวมตัวเฉพาะจุดของ Cre-lox เพื่อสร้างคลังแอนติบอดี Fabs ที่แสดงบนฟาจซึ่งประกอบด้วยโคลน 6.5 × 10^10 คลังแอนติบอดีนี้ให้ผลเป็น Abs ต่อแอนติเจนจำนวนมาก ซึ่งบางชนิดมีความสัมพันธ์ระดับนาโนโมลาร์ การสร้างคลังแอนติบอดีของมนุษย์ใช้เทคโนโลยีการแสดงผลฟาจ M13 (แสดงในภาพด้านล่าง)