บทนำสู่คลังแอนติบอดีสังเคราะห์

ไลบรารีแอนติบอดีสังเคราะห์ หรือที่เรียกว่าไลบรารีเดอโนโว เป็นวิธีการสังเคราะห์ที่ใช้วิธีการต่างๆ เช่น การสังเคราะห์ดีเอ็นเอ หรือการแสดงผลด้วยฟาจ เพื่อออกแบบและสังเคราะห์บริเวณตัวแปรของแอนติบอดีที่สมบูรณ์ รวมถึงบริเวณโครงสร้างและ CDR โดยไม่ต้องอาศัยไลบรารีแอนติบอดีดั้งเดิม

คลังแอนติบอดีกึ่งสังเคราะห์สร้างขึ้นโดยการรวมคลังแอนติบอดีที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติเข้ากับความหลากหลายที่สังเคราะห์ขึ้น โดยปกติแล้วจะเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์โอลิโกนิวคลีโอไทด์ของดีเอ็นเอเพื่อสร้างชุดของบริเวณกำหนดความจำเพาะ (CDR) ที่แตกต่างกัน จากนั้นจึงนำไปรวมกับโครงสร้างแอนติบอดีคงที่ที่ได้มาจากแหล่งธรรมชาติ เช่น เซลล์บีของมนุษย์หรือสัตว์ บริเวณกำหนดความจำเพาะที่สังเคราะห์ขึ้นนี้จะเพิ่มความหลากหลายให้กับคลัง ทำให้ได้แอนติบอดีที่สามารถกำหนดเป้าหมายไปยังอีพิโทปได้หลากหลาย คลังแอนติบอดีกึ่งสังเคราะห์จึงเป็นการประนีประนอมระหว่างความหลากหลายตามธรรมชาติของระบบภูมิคุ้มกันและความหลากหลายที่ควบคุมได้ซึ่งได้มาจากการสังเคราะห์

ความแตกต่างระหว่างคลังแอนติบอดีแบบดั้งเดิมและแบบสังเคราะห์ขึ้นอยู่กับแหล่งที่มาของยีนอิมมูโนโกลบูลิน ในขณะเดียวกัน ความแตกต่างระหว่างคลังแอนติบอดีแบบกึ่งสังเคราะห์และแบบสังเคราะห์อยู่ที่ว่าแบบกึ่งสังเคราะห์ประกอบด้วยส่วนหนึ่งของส่วนประกอบแอนติบอดีแบบดั้งเดิม เช่น สายโซ่เบาหรือสายโซ่หนัก และมีเพียงส่วนใดส่วนหนึ่งเท่านั้นที่ถูกสังเคราะห์ขึ้นในหลอดทดลอง ในขณะที่แบบสังเคราะห์นั้นได้มาจากการสังเคราะห์เทียมโดยใช้ PCR ในหลอดทดลองทั้งหมด

บริษัท Alpha Lifetech สามารถจัดหาได้

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์เราสามารถนำเสนอคลังแอนติบอดีกึ่งสังเคราะห์/สังเคราะห์จากสัตว์และมนุษย์ โดยอาศัยแพลตฟอร์มการค้นพบแอนติบอดีระดับมืออาชีพของเรา ด้วยประสบการณ์หลายปีในการดัดแปลงพันธุกรรมและการสร้างคลังแอนติบอดี เราสามารถสร้างคลังแอนติบอดีสังเคราะห์ที่มีความสามารถในการจับและจำเพาะเจาะจงสูงกว่าแอนติบอดีจากธรรมชาติได้บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทคผู้เชี่ยวชาญมีความภาคภูมิใจที่จะประกาศว่าเราสามารถรับประกันอัตราความสำเร็จสูงในการสร้างคลังแอนติบอดีที่มีโคลนอิสระจำนวน 10^8 – 10^10 โคลน

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์บริษัทมีความภูมิใจที่ได้นำเสนอบริการสร้างคลังแอนติบอดีแบบครบวงจร เพื่อตอบสนองความต้องการที่หลากหลายของนักวิจัยทั่วโลก รวมถึงแอนติบอดี scFv, Fab, VHH และคลังแอนติบอดีแบบกำหนดเอง เป้าหมายของเราคือการทำความเข้าใจและตอบสนองความต้องการของลูกค้าที่แตกต่างกัน และให้ความช่วยเหลือในการแก้ไขปัญหาที่อาจเกิดขึ้นในงานวิจัย

กระบวนการบริการสร้างคลังแอนติบอดีสังเคราะห์

ออกแบบ
ขั้นตอนการออกแบบเกี่ยวข้องกับการเลือกโครงสร้างพื้นฐานของแอนติบอดีและบริเวณกำหนดความจำเพาะ (CDR) โดยอิงจากลำดับแอนติบอดีที่มีอยู่หรือข้อมูลโครงสร้าง นอกจากนี้ยังสามารถออกแบบแอนติบอดี CDR สังเคราะห์เพื่อเพิ่มฟังก์ชันเฉพาะหรือเสริมคุณสมบัติการจับได้อีกด้วย

สังเคราะห์
ดีเอ็นเอสังเคราะห์ที่เข้ารหัสลำดับแอนติบอดีที่ออกแบบไว้ ซึ่งรวมถึงทั้งบริเวณโครงร่างและ CDR นั้น จะถูกสังเคราะห์ขึ้นโดยใช้วิธีทางเคมีหรือเอนไซม์

การประกอบ
ชิ้นส่วน DNA ที่สังเคราะห์ขึ้นจะถูกประกอบเข้าด้วยกันเป็นเวกเตอร์สำหรับการแสดงออกของแอนติบอดีโดยใช้เทคนิคต่างๆ เช่น PCR, การเชื่อมต่อ (ligation) หรือการประกอบแบบกิบสัน (Gibson assembly) จากนั้นเวกเตอร์เหล่านี้สามารถนำเข้าสู่ระบบการแสดงออก เช่น เซลล์แบคทีเรีย เซลล์ยีสต์ หรือเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เพื่อผลิตแอนติบอดีได้

การคัดกรองและการคัดเลือก
คลังแอนติบอดีที่สร้างขึ้นจะถูกคัดกรองและคัดเลือกแอนติบอดีที่มีคุณสมบัติที่ต้องการโดยใช้วิธีการคัดกรองแบบความเร็วสูง ซึ่งอาจเกี่ยวข้องกับเทคนิคต่างๆ เช่น การแสดงผลด้วยฟาจ การแสดงผลด้วยยีสต์ หรือการแสดงผลด้วยไรโบโซม ขึ้นอยู่กับรูปแบบของคลังและแอปพลิเคชัน

บริการสร้างคลังแอนติบอดีสังเคราะห์

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์บริษัทนี้ให้บริการออกแบบและสังเคราะห์ไลบรารีแอนติบอดีแบบครบวงจรแก่ลูกค้า โดยการเชื่อมต่อยีน V-chain สายหนักและสายเบาเข้ากับเวกเตอร์ฟาจโดยใช้ระบบการรวมตัวใหม่แบบเฉพาะจุด Cre-lox เพื่อสร้างไลบรารีของ Fab ที่แสดงบนฟาจซึ่งประกอบด้วยโคลน 6.5 × 10^10 โคลน ไลบรารีนี้ให้ผลลัพธ์เป็นแอนติบอดีต่อแอนติเจนจำนวนมาก บางชนิดมีความสัมพันธ์ระดับนาโนโมลาร์ การสร้างไลบรารีแอนติบอดีของมนุษย์นี้ใช้เทคโนโลยีการแสดงผลฟาจ M13 เป็นพื้นฐาน (แสดงในรูปด้านล่าง)