บทนำสู่ห้องสมุดแอนติบอดีสังเคราะห์

คลังแอนติบอดีสังเคราะห์ หรือเรียกอีกอย่างว่า คลัง De novo เป็นวิธีการสังเคราะห์ที่ใช้เทคนิคต่างๆ เช่น การสังเคราะห์ DNA หรือการแสดงฟาจ เพื่อออกแบบและสังเคราะห์ภูมิภาคแปรผันของแอนติบอดีที่สมบูรณ์ รวมถึงภูมิภาคกรอบงานและ CDR โดยไม่ต้องพึ่งพาคลังแอนติบอดีแบบไร้เดียงสา

คลังแอนติบอดีกึ่งสังเคราะห์สร้างขึ้นโดยการรวมคลังแอนติบอดีที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติเข้ากับความหลากหลายแบบสังเคราะห์ โดยปกติจะเกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์โอลิโกนิวคลีโอไทด์ของ DNA เพื่อผลิตชุดของบริเวณที่กำหนดความสมบูรณ์ (CDR) ที่แตกต่างกัน ซึ่งจากนั้นจะรวมเข้ากับกรอบแอนติบอดีคงที่ที่ได้มาจากแหล่งธรรมชาติ เช่น เซลล์ B ของมนุษย์หรือสัตว์ CDR ที่สังเคราะห์จะนำความหลากหลายมาสู่คลัง ส่งผลให้แอนติบอดีกำหนดเป้าหมายไปที่เอพิโทปที่หลากหลาย คลังแอนติบอดีกึ่งสังเคราะห์ให้การประนีประนอมระหว่างความหลากหลายตามธรรมชาติของระบบภูมิคุ้มกันและความหลากหลายที่ควบคุมได้ซึ่งได้รับผ่านวิธีการสังเคราะห์

ความแตกต่างระหว่างคลังแอนติบอดีแบบไร้เดียงสาและแบบสังเคราะห์ขึ้นอยู่กับแหล่งที่มาของยีนอิมมูโนโกลบูลิน ในขณะเดียวกัน ความแตกต่างระหว่างคลังแอนติบอดีแบบกึ่งสังเคราะห์และแบบสังเคราะห์อยู่ที่ คลังแอนติบอดีแบบกึ่งสังเคราะห์ประกอบด้วยส่วนหนึ่งของส่วนแอนติบอดีแบบไร้เดียงสา เช่น ห่วงโซ่เบาหรือห่วงโซ่หนัก และมีการสังเคราะห์ในหลอดทดลองเพียงส่วนเดียวเท่านั้น ในขณะที่คลังแอนติบอดีแบบสังเคราะห์ได้มาจากการสังเคราะห์ด้วยเทคนิค PCR ในหลอดทดลองโดยสมบูรณ์

Alpha Lifetech สามารถให้บริการได้

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์สามารถนำเสนอคลังแอนติบอดีกึ่งสังเคราะห์/สังเคราะห์จากสัตว์และมนุษย์โดยอาศัยแพลตฟอร์มการค้นหาแอนติบอดีระดับมืออาชีพของเรา ด้วยประสบการณ์หลายปีในด้านการดัดแปลงพันธุกรรมและการสร้างคลัง เราจึงสามารถสร้างคลังแอนติบอดีสังเคราะห์ที่สามารถผลิตแอนติบอดีสังเคราะห์ที่มีความสัมพันธ์และความจำเพาะเกินกว่าความสามารถของแอนติบอดีตามธรรมชาติได้อัลฟา ไลฟ์เทคผู้เชี่ยวชาญรู้สึกภูมิใจที่จะประกาศว่าเราสามารถรับประกันอัตราความสำเร็จที่สูงในการสร้างคลังแอนติบอดีที่มีโคลนอิสระจำนวน 10^8 – 10^10 โคลน

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์มีความภูมิใจที่จะเสนอบริการสร้างคลังแอนติบอดีที่ครอบคลุมเพื่อตอบสนองความต้องการที่หลากหลายของนักวิจัยทั่วโลก รวมถึง scFv, Fab, แอนติบอดี VHH และคลังแอนติบอดีที่ปรับแต่งได้ เป้าหมายของเราคือการทำความเข้าใจและตอบสนองความต้องการของลูกค้าที่แตกต่างกัน และช่วยเหลือในปัญหาที่กำลังจะเกิดขึ้นในงานวิจัย

กระบวนการบริการการสร้างห้องสมุดแอนติบอดีสังเคราะห์

ออกแบบ
ขั้นตอนการออกแบบเกี่ยวข้องกับการเลือกกรอบงานแอนติบอดีและภูมิภาคที่กำหนดความสมบูรณ์ (CDR) ตามลำดับแอนติบอดีที่มีอยู่หรือข้อมูลโครงสร้าง แอนติบอดี CDR สังเคราะห์ยังสามารถออกแบบเพื่อแนะนำฟังก์ชันเฉพาะหรือเพิ่มคุณสมบัติการจับได้อีกด้วย

สังเคราะห์
DNA สังเคราะห์ที่เข้ารหัสลำดับแอนติบอดีที่ออกแบบไว้ ซึ่งรวมถึงทั้งส่วนกรอบและ CDR ได้รับการสังเคราะห์โดยใช้วิธีทางเคมีหรือทางเอนไซม์

การประกอบ
ชิ้นส่วน DNA ที่สังเคราะห์ขึ้นจะถูกประกอบเป็นเวกเตอร์แสดงออกของแอนติบอดีโดยใช้เทคนิคต่างๆ เช่น PCR การผูก หรือการประกอบแบบกิ๊บสัน จากนั้นจึงสามารถนำเวกเตอร์เหล่านี้เข้าไปในระบบแสดงออก เช่น เซลล์แบคทีเรีย ยีสต์ หรือสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เพื่อผลิตแอนติบอดี

การคัดกรองและการคัดเลือก
ห้องสมุดแอนติบอดีที่สร้างขึ้นจะได้รับการคัดกรองและคัดเลือกแอนติบอดีที่มีคุณสมบัติตามต้องการโดยใช้วิธีการคัดกรองที่มีปริมาณงานสูง ซึ่งอาจเกี่ยวข้องกับเทคนิคต่างๆ เช่น การแสดงฟาจ การแสดงยีสต์ หรือการแสดงไรโบโซม ขึ้นอยู่กับรูปแบบและการใช้งานของห้องสมุด

บริการก่อสร้างห้องสมุดแอนติบอดีสังเคราะห์

บริษัท อัลฟา ไลฟ์เทค อิงค์ให้บริการออกแบบและสังเคราะห์คลังแอนติบอดีแบบครบวงจรแก่ลูกค้า โดยเชื่อมโยงคลังแอนติบอดี V-gene ของโซ่หนักและโซ่เบาเข้ากับเวกเตอร์ฟาจโดยใช้ระบบการรวมตัวเฉพาะไซต์ Cre-lox เพื่อสร้างคลังแอนติบอดีที่แสดงบนฟาจที่ประกอบด้วยโคลน 6.5 × 10^10 คลังแอนติบอดีให้ผลเป็นแอนติบอดีต่อแอนติเจนจำนวนมาก ซึ่งบางชนิดมีความสัมพันธ์แบบนาโนโมลาร์ การสร้างคลังแอนติบอดีของมนุษย์นั้นขึ้นอยู่กับเทคโนโลยีการแสดงฟาจ M13 (แสดงในรูปด้านล่าง)