Panimula sa Synthesized Antibody Libraries

Ang synthesized antibody library, na kilala rin bilang isang De novo library, ay isang synthetic na pamamaraan na gumagamit ng mga diskarte tulad ng DNA synthesis o phage display upang magdisenyo at mag-synthesize ng kumpletong antibody variable na mga rehiyon, kabilang ang mga framework region at CDR, nang hindi umaasa sa naïve antibody library.

Ang semi-synthetic antibody library ay nilikha sa pamamagitan ng pagsasama-sama ng mga natural na nagaganap na antibody library na may synthetic na pagkakaiba-iba. Karaniwang kinabibilangan ito ng pag-synthesize ng DNA oligonucleotides upang makabuo ng isang set ng iba't ibang complementary determining regions (CDRs), na pagkatapos ay pinagsama sa isang pare-parehong framework ng antibody na nagmula sa mga likas na pinagmumulan tulad ng mga cell ng tao o hayop. Ang synthesized CDR ay nagpapakilala ng pagkakaiba-iba sa library, na nagreresulta sa mga antibodies na nagta-target ng malawak na hanay ng mga epitope. Ang semi-synthetic antibody library ay nagbibigay ng kompromiso sa pagitan ng natural na pagkakaiba-iba ng immune system at ang kinokontrol na pagkakaiba-iba na nakamit sa pamamagitan ng mga synthetic na pamamaraan.

Ang pagkakaiba sa pagitan ng naïve at synthetic antibody library ay nakasalalay sa pinagmulan ng mga immunoglobulin genes. Samantala, ang pagkakaiba sa pagitan ng isang semi-synthesized at synthesized na antibody library ay nakasalalay sa na ang una ay binubuo ng bahagi ng naïve na mga segment ng antibody, tulad ng light chain o heavy chain, at isa lamang sa mga ito ang na-synthesize sa vitro; habang ang na-synthesize ay ganap na nagmula sa isang artipisyal na synthesis ng PCR sa vitro.

Maaaring Magbigay ang Alpha Lifetech

Alpha Lifetech Inc.ay maaaring mag-alok ng semi-synthesized/synthesized antibody library mula sa mga hayop at tao batay sa aming propesyonal na platform ng pagtuklas ng antibody. Sa mga taon ng karanasan sa genetic modification at pagtatayo ng library, ang mga synthesized na aklatan ay maaaring itayo na nakakagawa ng mga sintetikong antibodies na may kaugnayan at pagtitiyak na lampas sa kapasidad ng mga natural na antibodies.Alpha Lifetech'sIpinagmamalaki ng mga eksperto na ipahayag na maaari naming ginagarantiyahan ang isang mataas na rate ng tagumpay sa pagtatayo ng isang antibody library na naglalaman ng 10^8 – 10^10 na mga independyenteng clone.

Alpha Lifetech Inc.Ipinagmamalaki na mag-alok ng komprehensibong mga serbisyo sa pagtatayo ng antibody library upang matugunan ang magkakaibang pangangailangan ng mga pandaigdigang mananaliksik, kabilang ang scFv, Fab, VHH antibody, at mga customized na aklatan. Ang aming layunin ay maunawaan at matugunan ang mga hinihingi ng iba't ibang mga customer at tumulong sa anumang paparating at umuusbong na mga problema sa gawaing pananaliksik.

Proseso ng Serbisyo sa Konstruksyon ng Synthesized Antibody Libraries

Disenyo
Ang yugto ng disenyo ay kinabibilangan ng pagpili ng mga antibody framework at complementarity-determining regions (CDRs) batay sa mga umiiral nang antibody sequence o structural data. Ang mga sintetikong CDR antibodies ay maaari ding idisenyo upang ipakilala ang mga partikular na pag-andar o pahusayin ang mga katangiang nagbubuklod.

Synthesis
Ang sintetikong DNA na naka-encode sa mga idinisenyong pagkakasunud-sunod ng antibody, kabilang ang parehong mga rehiyon ng framework at mga CDR, ay na-synthesize gamit ang mga kemikal o enzymatic na pamamaraan.

Assembly
Ang mga synthesized na fragment ng DNA ay pinagsama-sama sa mga antibody expression vector gamit ang mga diskarte tulad ng PCR, ligation, o Gibson assembly. Ang mga vector na ito ay maaaring ipasok sa mga expression system tulad ng bacterial, yeast, o mammalian cells para sa produksyon ng antibody.

Screening at Pagpili
Ang mga itinayong antibody na aklatan ay sina-screen at pinipili para sa mga antibodies na may gustong katangian gamit ang mga high-throughput na pamamaraan ng screening. Ito ay maaaring may kasamang mga diskarte gaya ng phage display, yeast display, o ribosome display, depende sa format at application ng library.

Synthesized Antibody Libraries Construction Service

Alpha Lifetech Inc.nagbibigay sa mga customer ng one-stop na disenyo at synthesized na serbisyo ng mga antibody library sa pamamagitan ng pag-ligating sa mabibigat at magaan na chain na V-gene repertoires sa isang phage vector gamit ang Cre-lox site-specific recombination system upang lumikha ng repertoire ng Fabs na ipinapakita sa phage na binubuo ng 6.5 × 10^10 clone. Ang library ay nagbunga ng Abs laban sa maraming antigens, ang ilan ay may nanomolar affinities. Ang henerasyon ng human antibody library ay batay sa M13 phage display technology (ipinapakita sa figure sa ibaba).