Panimula sa mga Sintesadong Aklatan ng Antibody

Ang synthesized antibody library, na kilala rin bilang De novo library, ay isang sintetikong pamamaraan na gumagamit ng mga pamamaraan tulad ng DNA synthesis o phage display upang magdisenyo at mag-synthesize ng kumpletong mga rehiyon ng variable ng antibody, kabilang ang mga rehiyon ng framework at CDR, nang hindi umaasa sa mga naïve antibody library.

Ang semi-synthetic antibody library ay nalilikha sa pamamagitan ng pagsasama-sama ng mga natural na nagaganap na antibody library at synthetic diversity. Karaniwan itong nagsasangkot ng synthesis ng DNA oligonucleotides upang makagawa ng isang hanay ng iba't ibang complementary determining regions (CDRs), na pagkatapos ay pinagsama sa isang constant antibody framework na nagmula sa mga natural na pinagkukunan tulad ng mga B cell ng tao o hayop. Ang na-synthesize na CDR ay nagpapakilala ng diversity sa library, na nagreresulta sa mga antibodies na nagta-target sa malawak na hanay ng mga epitope. Ang semi-synthetic antibody library ay nagbibigay ng kompromiso sa pagitan ng natural na diversity ng immune system at ng kontroladong diversity na nakakamit sa pamamagitan ng mga synthetic na pamamaraan.

Ang pagkakaiba sa pagitan ng mga naïve at synthetic antibody library ay nakadepende sa pinagmulan ng mga immunoglobulin gene. Samantala, ang pagkakaiba sa pagitan ng isang semi-synthesized at synthesized antibody library ay nakasalalay sa katotohanan na ang una ay binubuo ng bahagi ng mga naïve antibody segment, tulad ng light chain o heavy chain, at isa lamang sa mga ito ang na-synthesize in vitro; habang ang na-synthesize ay ganap na nagmula sa isang artipisyal na synthesis sa pamamagitan ng PCR in vitro.

Kayang ibigay ng Alpha Lifetech

Alpha Lifetech Inc.maaaring mag-alok ng isang semi-synthesized/synthesized antibody library mula sa mga hayop at tao batay sa aming propesyonal na platform ng pagtuklas ng antibody. Dahil sa mga taon ng karanasan sa genetic modification at pagbuo ng library, maaaring maitayo ang mga synthesized library na kayang gumawa ng mga sintetikong antibodies na may affinity at specificity na higit pa sa kapasidad ng mga natural na antibodies.Alpha Lifetech'sIpinagmamalaki ng mga eksperto na ipahayag na magagarantiya namin ang mataas na antas ng tagumpay sa pagtatayo ng isang antibody library na naglalaman ng 10^8 – 10^10 na mga independent clone.

Alpha Lifetech Inc.Ipinagmamalaki naming mag-alok ng komprehensibong serbisyo sa pagtatayo ng antibody library upang matugunan ang magkakaibang pangangailangan ng mga pandaigdigang mananaliksik, kabilang ang scFv, Fab, VHH antibody, at mga customized na library. Ang aming layunin ay maunawaan at matugunan ang mga pangangailangan ng iba't ibang customer at tumulong sa anumang paparating at umuusbong na mga problema sa gawaing pananaliksik.

Proseso ng Serbisyo sa Pagtatayo ng mga Synthesized Antibody Library

Disenyo
Ang yugto ng disenyo ay kinabibilangan ng pagpili ng mga balangkas ng antibody at mga rehiyon na tumutukoy sa komplementaridad (CDR) batay sa mga umiiral na sequence ng antibody o datos ng istruktura. Ang mga sintetikong CDR antibodies ay maaari ding idisenyo upang magpakilala ng mga partikular na functionality o mapahusay ang mga katangian ng pagbubuklod.

Sintesis
Ang sintetikong DNA na nagko-code sa mga dinisenyong sequence ng antibody, kabilang ang parehong mga rehiyon ng balangkas at mga CDR, ay sinisintetiko gamit ang mga kemikal o enzymatic na pamamaraan.

Asembleya
Ang mga na-synthesize na fragment ng DNA ay binubuo sa mga antibody expression vector gamit ang mga pamamaraan tulad ng PCR, ligation, o Gibson assembly. Ang mga vector na ito ay maaaring ipasok sa mga expression system tulad ng bacterial, yeast, o mammalian cells para sa produksyon ng antibody.

Pagsusuri at Pagpili
Ang mga binuong antibody library ay sinusuri at pinipili para sa mga antibody na may ninanais na mga katangian gamit ang mga high-throughput screening methods. Maaaring kasama rito ang mga pamamaraan tulad ng phage display, yeast display, o ribosome display, depende sa format at aplikasyon ng library.

Serbisyo sa Pagtatayo ng mga Synthesized Antibody Library

Alpha Lifetech Inc.Nagbibigay sa mga customer ng one-stop na disenyo at serbisyong synthesized ng mga antibody libraries sa pamamagitan ng pag-ligate ng heavy at light chain V-gene repertoires sa isang phage vector gamit ang Cre-lox site-specific recombination system upang lumikha ng repertoire ng mga Fab na ipinapakita sa phage na binubuo ng 6.5 × 10^10 clones. Ang library ay nagbunga ng Abs laban sa maraming antigens, ang ilan ay may nanomolar affinities. Ang pagbuo ng human antibody library ay batay sa M13 phage display technology (ipinapakita sa figure sa ibaba).