Aptamer Sentez Platformu
Nükleik asit aptamerlerine giriş
Nükleik asit aptamerleri, aptamerler, kompleksler ve kimyasal antikorlar olarak da bilinir ve ligand üstel zenginleştirme sistemi evrimi (SELEX) tekniği ile in vitro selex taraması yoluyla elde edilir. Hedef moleküle özgül ve etkili bir şekilde bağlanan tek zincirli deoksiribonükleik asit (ssDNA) veya ribonükleik asittir (RNA) ve tipik olarak 20-80 bazdan oluşur.
İn vitro tarama yoluyla elde edilen nükleik asit aptamerleri yapısal olarak kararlı, sentezlenmesi basit ve modifiye edilmesi kolaydır ve sentez ve uygulama açısından yaygın olarak kullanılan biyolojik kaynaklı antikorlardan üstündür; ayrıca, nükleik asit aptamerleri çeşitli farklı kuvvetler aracılığıyla hedeflerine özgül olarak bağlanabilir; genel olarak, hidrojen bağları, elektrostatik kuvvetler, hidrofobik etkileşimler vb. yoluyla geniş bir yelpazedeki konformasyonlara (örneğin, saç tokası, içbükey-dışbükey, sözde bükülmüş, vb.) dayalı küçük moleküllerle etkileşime girerler. Hedefe bağlı olarak, nükleik asit aptamerleri DNA aptamerleri, RNA aptamerleri, protein aptamerleri ve hücre zarı aptamerlerini içerir.
Alpha Lifetech'in aptamer sentez platformu, esas olarak SELEX aptamer kütüphanesi sentez hizmeti ve aptamer (DNA, RNA veya XNA) geliştirme hizmetinin yanı sıra, aptamer tarama, aptamer optimizasyonu ve aptamer tanımlama analizi hizmetlerini de içermektedir.
Aptamer sentezinin teknik süreci
Temel İlke ve Teknolojik Süreç
Nükleik asit aptamer sentezi teknolojisinin süreci şu şekildedir: Tek zincirli oligonükleotidlerden oluşan bir kütüphane, in vitro olarak kimyasal sentezlenir, hedef madde ile karıştırılır ve karışımda hedef madde ile nükleik asit kompleksi bulunur. Hedef maddeye bağlanmayan nükleik asitler yıkanarak uzaklaştırılır ve hedef maddeye bağlanan nükleik asit molekülleri izole edilir. Bu nükleik asit molekülleri, bir sonraki tarama turu için PCR amplifikasyonu yapmak üzere şablon olarak kullanılır. Tekrarlanan SELEX tarama ve amplifikasyon işlemleriyle, hedef maddeye bağlanmayan veya hedef maddeye düşük veya orta derecede afinitesi olan bazı DNA veya RNA molekülleri yıkanarak uzaklaştırılır ve aptamerler, yani hedef maddeye yüksek afinitesi olan DNA veya RNA molekülleri, çok büyük rastgele kütüphaneden ayrılır. Saflıkları SELEX işlemiyle artar ve sonunda kütüphanenin büyük bir bölümünü oluştururlar.
Teknik Süreçteki Önemli Noktalar
Nükleik asit aptamerlerinin SELEX tarama süreci, kimyasal olarak sentezlenmiş rastgele oligonükleotid kütüphanelerinin oluşturulmasıyla başlar. Rastgele oligonükleotid kütüphaneleri büyük bir kütüphane kapasitesine sahiptir. Yüksek çeşitlilik, önemli bir avantajıdır. Teorik olarak, bir oligonükleotiddeki rastgele dizi n bazdan oluşuyorsa, kütüphane kapasitesi 4n'dir. Yapay olarak modifiye edilmiş kütüphaneyi ele alırsak, rastgele dizilerin çeşitliliğini artıracaktır. Şu anda, SELEX deneylerinde yaygın olarak kullanılan oligonükleotidlerin rastgele dizilerinin uzunluğu genellikle 30 bazdır ve kütüphane kapasitesi 10^18'e kadar çıkabilir. Kütüphane kapasitesi, yüksek afiniteli ligandların SELEX taraması için çok önemlidir. Bununla birlikte, sentetik kütüphanelerin konsantrasyonu belirli olduğundan, çok uzun rastgele diziler, kütüphanelerdeki her bir oligonükleotidin bolluğunu azaltacak ve bu da belirli bir aptamer için SELEX tarama olasılığını düşürecektir. Genellikle, SELEX taramasının ilk turunda 10^13~10^15 kütüphane kapasitesi pratik ihtiyaçları karşılayabilir.

Şekil 1. SELEX Teknik Süreci
Nükleik asit aptamerinin avantajları
| Avantajlar | Detaylar |
|---|---|
| Doğrudan | Geleneksel hayvan deneyleri sürecinden kaçınılarak ve doğrudan in vitro kütüphanelerden seçim yapılarak; immünojenik olmayan, düşük immünojenik veya hatta toksik olan hedef moleküllerin aptamerlerinin selex taraması gerçekleştirilir. |
| Geniş Uygulama Yelpazesi | Hedef moleküller organik boyalar, amino asitler, proteinler, antibiyotikler, peptitler, vitaminler, ilaçlar, hatta hücreler, patojenler, virüsler, dokular vb. olabilir. |
| Güçlü Yakınlık | Aptamerler, hedef moleküllerin in vitro taranmasında yüksek özgüllük ve afinite gösterirler. |
| İstikrar | Aptamerler küçük boyutlu, kolay elde edilebilen, sentezleri tekrarlanabilir ve kimyasal sentez ve modifikasyon yoluyla kararlılıkları artırılabilen maddelerdir. Aptamerler kimyasal olarak kararlıdır, uzun raf ömrüne sahiptir ve oda sıcaklığında taşınabilir. |
01/
Klinik tıp: hedefe yönelik tümör tedavisi, kanser tanı teknikleri
Gladtrust'ın kredi raporları, en büyük çevrimiçi işletme kredi bilgisi veritabanı olan CreditVision temel alınarak başarıyla oluşturulmuştur.
Veritabanı, 200.000'den fazla veri kaynağından gelen bilgileri zamanında toplar ve dinamik olarak günceller. Bilgi güncelleme ve yönetim süreci, bilgilerin doğruluğunu garanti eder.
Veritabanı, 200.000'den fazla veri kaynağından gelen bilgileri zamanında toplar ve dinamik olarak günceller. Bilgi güncelleme ve yönetim süreci, bilgilerin doğruluğunu garanti eder.
02/
Analitik test alanı: organik kirleticilerin tespiti, küçük moleküllü ilaçların tespiti, gıda kaynaklı patojenlerin tespiti
Bu alanda, nükleik asit aptamer sentez teknolojisi, kolloidal altın immünokromatografi ile birlikte kullanılacaktır. Bu yöntemde, önce kolloidal altın hazırlanıp kalite kontrolü yapılacak, ardından nükleik asit aptamerine bağlanacak, karakterize edilecek ve bir bağlama pedine püskürtülecektir. Tespit edilecek poliklonal antikor tespit çizgisi olarak, nükleik asit aptamerinin tamamlayıcı dizisi ise kalite kontrol çizgisi olarak kullanılarak test şeritleri hazırlanacak ve böylece negatif ve pozitif deney sonuçlarına dayanarak hedef maddenin varlığı analiz edilecektir.
03/
Biyolojik alan: biyosensörlerin geliştirilmesi
Nükleik asit aptamer sensörleri, hedef maddeyi tanımak ve tanıma sonucunu ölçülebilir bir sinyale dönüştürmek için aptameri bir tanıma elemanı olarak kullanır. Sinyal dönüşümü elektrokimyasal, optik, sıcaklık, piezoelektrik, manyetik ve mikromekanik veya bu tekniklerin bir kombinasyonu olabilir. Mevcut algılama yöntemleriyle karşılaştırıldığında, nükleik asit aptamer tabanlı sensörler genellikle kullanımı kolay, özgül, duyarlı ve hassastır ve bu avantajlar, gerçek örneklerde uygulanmalarını kolaylaştırır ve gelişme için iyi bir potansiyele sahiptir.

SELEX Aptamer Sentez Servisi
Alpha Lifetech'in SELEX aptamer sentez hizmeti, SELEX aptamer kütüphanesi oluşturma, SELEX optimizasyonu vb. hizmetleri içermektedir. Alpha Lifetech, in vitro tarama süreciyle müşterileri için yüksek afinite ve yüksek özgüllüğe sahip SELEX aptamerleri elde etmeyi amaçlamaktadır.
DEVAMINI OKU
Nükleik Asit Aptamer Geliştirme Hizmeti
Alpha Lifetech'in nükleik asit aptamer geliştirme hizmeti, esas olarak SELEX aptamer taraması için SELEX teknolojisine dayanmaktadır ve DNA aptamerleri, RNA aptamerleri ve XNA aptamerlerinin geliştirilmesini, kütüphane tasarımını, oligonükleotid sentezini, kütüphane oluşturmayı ve doğrulamayı içermektedir.
DEVAMINI OKUHerhangi bir sorunuz olursa, lütfen istediğiniz zaman bizimle iletişime geçmekten çekinmeyin.
Leave Your Message
0102





