Monoklonal Antikor Geliştirme Hizmeti

Alpha Lifetech A.Ş.epitop tahmini, peptit sentezi, protein ekspresyonu, poliklonal veya monoklonal antikor üretimi ve hücre kültüründen, asit sıvısından veya tüm serumdan antikor saflaştırması sağlayabilir.

Alpha Lifetech A.Ş.hibridoma hücreleri, genom düzenleme hücre hatları, devre dışı bırakma hücre hatları ve aşırı ifade hücre hatları dahil olmak üzere müşterilere çeşitli stabil hücre hattı hizmetleri sunma konusunda deneyimlidir. Her müşteriye gelişmiş özel hücre hattı hizmetleri sunmaya çalışıyoruz ve hizmetlerimiz kanıtlanmış ve güvenilirdir.

Antikor Geliştirme Stratejisi

1.Antijen tasarımı ve hazırlanması
Bu antijenler proteinler, peptitler veya diğer moleküller olabilir. İmmünojenlerin tasarlanması, antijen yapısı, immünoloji ve iletim sistemleri bilgisini birleştiren kapsamlı bir yaklaşım gerektirir. Alpha Lifetech, ihtiyaç duyan müşteriler için immünojenler tasarlayabilen antijen tasarım teknolojisine sahiptir.
Alpha Lifetech, müşterilerinin seçebileceği rekombinant protein ürünleri sağlar. Araştırma için ihtiyaç duyduğunuz rekombinant proteinleri üretmek için E. coli ifade sistemi, maya ifade sistemi, bakulovirüs-böcek ifade sistemi, memeli ifade sistemi vb. gibi çeşitli protein ifade sistemlerimiz mevcuttur.

2.Hayvan aşılaması
Alpha Lifetech müşterilerine immünojenler sağlayabilir ve fare, tavşan, koyun, alpaka, kobay, hamster vb. gibi bağışık hayvanlar arasından seçim yapabilirsiniz.

3.Monoklonal antikor üretim yöntemleri

●Hybridoma teknolojisi ile Mabs Üretimi
Hibridoma, iki tür hücrenin, yani fare miyelom hücre hattı ve plazma hücrelerinin (lenfosit B) füzyonuyla üretilen bir hibrit hücredir; burada heterozigot hücre, in vitro ilgi duyulan antijene karşı sürekli antikor üretebilir. Bir hibridoma hücre hattının üretimi üç bölümden oluşur: antijen tasarımı (haptenler, küçük moleküller ve peptitler), hayvan bağışıklaması, hücre füzyonu ve pozitif klon taraması. Benzersiz bağışıklama metodolojilerini kullanarak, istisnai derecede yüksek hücre füzyonu verimlilikleri (bin B hücresi başına 1-10 hibridoma) ve yüksek antikor titreleri elde ediyoruz ve biyokimyasal tarama, in vitro hücre tabanlı analizler ve hayvan çalışmaları gibi sonraki analitik testlerdeki başarı oranımızı en üst düzeye çıkarıyoruz.

●Faj görüntüleme teknolojisi ile Mabs Üretimi
Faj gösterimi, monoklonal antikorlar üretmek için başka bir yöntem sunar. B-lenfositler hayvan kanından izole edilir ve mRNA'ları çıkarılır. PCR yoluyla, bu mRNA tüm VH ve VL segmentlerini çoğaltan cDNA'ya dönüştürülür. Bu segmentler daha sonra bir vektöre, tipik olarak tek zincirli değişken parçalar (scFv) olarak, bir bakteriyofajın PIII proteini ile birlikte klonlanır. Daha sonra, bu yapı E. coli'yi enfekte etmek için kullanılır ve yardımcı bir faj ile aşılama yoluyla yaklaşık 10^10 hücre içeren bir kütüphanenin oluşturulmasıyla sonuçlanır. E. coli daha sonra, VH ve VL segmentlerini barındıran bakteriyofajı kılıfının bir parçası olarak salgılayabilir. Bunu takiben, ilgi duyulan antijeni hedef alan spesifik VH ve VL segmentleri seçilebilir ve E. coli'yi bakteriyofaj ile yeniden aşılamak için kullanılabilir. Daha sonra plazmidi içeren hücreler izole edilir ve dizilenir.

4.Füzyon tarama

●Hücre Füzyonu ve Seçimi
Hasat edilen B hücreleri daha sonra kültürde sonsuza kadar çoğalabilen kanserli hücreler olan miyelom hücreleriyle kaynaştırılır. Kaynaştırma tipik olarak polietilen glikol (PEG) füzyonu gibi bir teknik kullanılarak elde edilir.
Füzyondan sonra hibridoma hücreleri yalnızca hibridomaların hayatta kalmasına izin veren seçici bir ortamda kültürlenir. Ortam genellikle, kaynaşmamış miyelom hücrelerinin büyümesini engelleyen aminopterin içerir.

●Tarama ve Klonlama
Elde edilen hibridoma hücreleri, hedef antijene özgü antikor üretimi açısından taranır. Bu genellikle enzim bağlantılı immünosorbent testi (ELISA), Western blot, immünoçöktürme ve akış sitometrisi gibi teknikler kullanılarak yapılır.

Antikoru üreten hibridoma hücreleri tanımlandıktan sonra, özdeş hücrelerden oluşan bir popülasyon oluşturmak için klonlanırlar. Bu, her hibridoma hücresi tarafından üretilen antikorun özdeş olmasını sağlar.

5.Antikor Fonksiyonel Doğrulaması
Alpha Lifetech, monoklonal antikorları karakterize etmek ve antikor özgüllüğünü, afinitesini ve işlevselliğini doğrulamak için Western blotting, immünohistokimya veya fonksiyonel analizler gibi antikor fonksiyonel doğrulaması sağlar.

6.Antikor optimizasyonu
Protein A veya protein G afinite kromatografisi gibi teknikler kullanılarak kültür süpernatantından antikorların saflaştırılması ve Alpha Lifetech ayrıca antikor afinitesini iyileştirmek için antikor modifikasyon yöntemleri de sağlayabilir.

7.Antikor üretimi
Alpha Lifetech, yüksek verimli tarama uygulamaları ve büyük ölçekli üretim için aday antikorları değerlendirebilir.