Sentezlenmiş Antikor Kütüphanelerine Giriş

Sentezlenmiş antikor kütüphanesi, diğer adıyla De novo kütüphanesi, DNA sentezi veya faj gösterimi gibi teknikleri kullanarak, ham antikor kütüphanelerine dayanmadan, çerçeve bölgeleri ve CDR'ler de dahil olmak üzere, antikorun tüm değişken bölgelerini tasarlayan ve sentezleyen sentetik bir yöntemdir.

Yarı sentetik antikor kütüphanesi, doğal olarak oluşan antikor kütüphanelerinin sentetik çeşitlilikle birleştirilmesiyle oluşturulur. Genellikle, farklı tamamlayıcı belirleyici bölgeler (CDR'ler) üretmek için DNA oligonükleotidlerinin sentezlenmesini içerir; bunlar daha sonra insan veya hayvan B hücreleri gibi doğal kaynaklardan elde edilen sabit bir antikor çerçevesiyle birleştirilir. Sentezlenen CDR, kütüphaneye çeşitlilik kazandırarak çok çeşitli epitopları hedefleyen antikorlar elde edilmesini sağlar. Yarı sentetik antikor kütüphanesi, bağışıklık sisteminin doğal çeşitliliği ile sentetik yöntemlerle elde edilen kontrollü çeşitlilik arasında bir uzlaşma sağlar.

Naif ve sentetik antikor kütüphaneleri arasındaki ayrım, immünoglobulin genlerinin kaynağına bağlıdır. Öte yandan, yarı sentezlenmiş ve sentezlenmiş antikor kütüphaneleri arasındaki fark, birincisinin hafif zincir veya ağır zincir gibi naif antikor segmentlerinin bir kısmından oluşması ve bunlardan sadece birinin in vitro olarak sentezlenmesi; sentezlenmiş olanın ise tamamen in vitro PCR ile yapay bir sentezden elde edilmesidir.

Alpha Lifetech şunları sağlayabilir:

Alpha Lifetech Inc.Profesyonel antikor keşif platformumuz temelinde, hayvanlardan ve insanlardan elde edilen yarı sentezlenmiş/sentezlenmiş antikor kütüphanesi sunabiliyoruz. Genetik modifikasyon ve kütüphane oluşturma alanındaki yılların deneyimiyle, doğal antikorların kapasitesinin ötesinde afinite ve özgüllüğe sahip sentetik antikorlar üretebilen sentezlenmiş kütüphaneler oluşturabiliyoruz.Alpha Lifetech'inUzmanlarımız, 10^8 – 10^10 bağımsız klon içeren bir antikor kütüphanesinin oluşturulmasında yüksek bir başarı oranını garanti edebildiğimizi gururla duyuruyor.

Alpha Lifetech Inc.scFv, Fab, VHH antikor ve özelleştirilmiş kütüphaneler de dahil olmak üzere, küresel araştırmacıların çeşitli ihtiyaçlarını karşılamak üzere kapsamlı antikor kütüphanesi oluşturma hizmetleri sunmaktan gurur duyuyoruz. Amacımız, farklı müşterilerin taleplerini anlamak ve karşılamak ve araştırma çalışmalarında ortaya çıkan her türlü soruna yardımcı olmaktır.

Sentezlenmiş Antikor Kütüphaneleri Oluşturma Hizmet Süreci

Tasarım
Tasarım aşaması, mevcut antikor dizilerine veya yapısal verilere dayanarak antikor iskeletlerinin ve tamamlayıcılık belirleyici bölgelerin (CDR'ler) seçilmesini içerir. Sentetik CDR antikorları, belirli işlevsellikler kazandırmak veya bağlanma özelliklerini geliştirmek için de tasarlanabilir.

Sentez
Tasarlanan antikor dizilerini (hem çerçeve bölgeleri hem de CDR'ler dahil) kodlayan sentetik DNA, kimyasal veya enzimatik yöntemler kullanılarak sentezlenir.

Toplantı
Sentezlenen DNA parçaları, PCR, ligasyon veya Gibson birleştirme gibi teknikler kullanılarak antikor ekspresyon vektörleri halinde bir araya getirilir. Bu vektörler daha sonra antikor üretimi için bakteri, maya veya memeli hücreleri gibi ekspresyon sistemlerine aktarılabilir.

Eleme ve Seçim
Oluşturulan antikor kütüphaneleri, yüksek verimli tarama yöntemleri kullanılarak taranır ve istenen özelliklere sahip antikorlar seçilir. Bu, kütüphane formatına ve uygulamasına bağlı olarak faj gösterimi, maya gösterimi veya ribozom gösterimi gibi teknikleri içerebilir.

Sentezlenmiş Antikor Kütüphaneleri Oluşturma Hizmeti

Alpha Lifetech Inc.Müşterilerine, ağır ve hafif zincir V-geni repertuarlarını Cre-lox bölgeye özgü rekombinasyon sistemi kullanarak bir faj vektörüne bağlayarak, 6,5 × 10^10 klondan oluşan bir faj üzerinde sergilenen Fab repertuarı oluşturarak, antikor kütüphanelerinin tek elden tasarım ve sentez hizmetini sunmaktadır. Kütüphane, bazıları nanomolar afiniteye sahip çok sayıda antijene karşı antikorlar üretmiştir. İnsan antikor kütüphanesinin oluşturulması, M13 faj gösterim teknolojisine dayanmaktadır (aşağıdaki şekilde gösterilmiştir).