Аптамер характеристикасын анализлау хезмәте

Alpha Lifetech күп еллар дәвамында адаптерлар белән бәйле хезмәтләр күрсәтә, комплекс адаптерлар эшләү һәм анализлау хезмәтләрен тәкъдим итә.

БЕЗНЕҢ БЕЛӘН ЭЛЕМТӘГӘ КЕРЕГЕЗ

Аптамер характеристикасын анализлау хезмәте

Alpha Lifetech күп еллар дәвамында апамерларга бәйле хезмәтләр күрсәтә һәм хәзерге вакытта апамер синтезы, SELEX скринингы, югары җитештерүчәнлекле секвенирлау һәм апамерны оптимизацияләү һәм характеристикалау кебек комплекслы апамер эшләү схемаларын тәкъдим итә ала. Аптамерларны скрининглау өчен SELEX ысулының өстенлекләренә нигезләнеп, Alpha Lifetech апамерларны скрининглау өчен күбрәк ысулларны киңәйтте.

Аптамер характеристикасын анализлауга кереш

Якынлыкны тикшерү

Аптамерның оптимальләштерелгән якынлыгы аптамер бәйләнеше белән бәйле тиешле ысуллар белән тикшерелде. Мисаллар арасында изотермик титрлау калориметриясе (ITC), агым цитометриясе (FCM) һәм өслек плазмон резонансы (SPR), микрофлюидик һ.б. бар. Аптамерның якынлыгы гадәттә диссоциация константасы (KD) белән күрсәтелә, бу физик зурлык кире кайтарыла торган реакциядә молекуляр диссоциация дәрәҗәсен санлаштыру өчен кулланыла. KD кыйммәте ни кадәр кечерәк булса, комплекс шулкадәр тотрыклырак, ягъни якынлык шулкадәр көчлерәк; киресенчә, KD кыйммәте ни кадәр зуррак булса, комплекс шулкадәр тотрыксызрак һәм якынлык шулкадәр көчсезрәк. Бу адым апамерның эшчәнлеген билгеләүнең ачкычы булып тора, аптамерның якынлыгы өлгерүен тәэмин итә һәм практик куллануда максатчан молекулага югары якынлык һәм селективлык белән бәйләнә ала.

1 нче рәсем. Аптамер аффинитетының өлгерү процессы. Сылтама чыганагы:Кингхорн AB, Фрейзер, LA, 2017.

Функцияне тикшерү

Аффинитет тикшерүеннән тыш, аптамерның функциясен тикшерү кирәк. Моңа аптамерның тотрыклылыгын, спецификлыгын һәм билгеле бер мохиттә башка молекулалар белән үзара бәйләнешен тикшерү керә. Функциональ тикшерү нәтиҗәләре фәнни тикшеренүләрдә һәм сәнәгать кушымталарында апамерларның кыйммәтенә турыдан-туры йогынты ясаячак.

Махсус тикшерү

Конкурент эксперимент: Аптамерның билгеле бер максатка бәйләнеш сәләте башка охшаш максатлар булганда бәяләнә. Әгәр аптамер башка молекулаларның комачаулавысыз максат молекуласына махсус бәйләнеш урнаштыра алса, бу аның югары спецификлыкка ия булуын күрсәтә.

Кросс-реакция эксперименты: Аптамер билгеле бер максатка гына бәйләнгәнме-юкмы икәнен тикшерү өчен, аның спецификасын тикшерү өчен, аңа бәйле яки бәйләнмәгән максатлар сериясе бәйләнә.

тотрыклылыкны тикшерү

Нуклеаза деградациясе эксперименты: Аптамерлар төрле концентрациядәге нуклеазаларга дучар ителде һәм аларның деградациясе күзәтелде. Төрле вакыт нокталарында деградация дәрәҗәсен чагыштырып, аптамерның антинуклеаза деградациясе сәләтен бәяләргә мөмкин.

Температура һәм вакыт тотрыклылыгы эксперименты: Аптамерның структураль һәм функциональ тотрыклылыгын күзәтү өчен, ул төрле температура һәм вакыт шартларына урнаштырылды. Бу апамерларны саклау һәм куллануның оптималь шартларын билгеләргә ярдәм итә.

Биологик активлыкны ачыклау

Тиешле ысул гадәттә нуклеин кислотасы аптамерының конкрет куллану максатына туры китереп сайлана.

(1) Молекуляр дәрәҗәдәге сынау: Аптамер максатлы молекула белән кушылганнан соң барлыкка килгән комплексларны ачыклау яки аптамер аркасында максатлы молекуланың экспрессия дәрәҗәсендәге үзгәрешләрне ачыклау өчен молекуляр биология ысулларын, мәсәлән, гель электрофорезын, Вестерн-блотны һ.б. куллану.

(2)Күзәнәк дәрәҗәсендә тестлау: Күзәнәк культурасы технологиясен кулланып, күзәнәк морфологиясе, пролиферациясе һәм апоптоз кебек биологик үзгәрешләрне күзәтү һәм аптамерларның биологик активлыгын бәяләү өчен, аптамерлар максатлы күзәнәкләр белән инкубацияләнә.

(3) Хайваннар моделен сынау: Тиешле хайван модельләрендә нуклеин кислотасы аптамерлары инъекция яки дару бирү юлы белән бирелә, һәм хайваннарның физиологик күрсәткечләре һәм патологик үзгәрешләре аптамерларның биологик активлыгын һәм куркынычсызлыгын in vivo бәяләү өчен күзәтелә.