Платформа розробки антитіл на фаговому дисплеї
На основі побудови комплексної системи платформи платформи антитіл Alpha Lifetech може надавати технічні послуги з підготовки антитіл, очищення антитіл, секвенування антитіл тощо.
ЗВ'ЯЖІТЬСЯ З НАМИ01
Платформа розробки антитіл на фаговому дисплеї
Альфа Лайфтех, маючи великий досвід проектів із виявлення антитіл, може надати індивідуальні послуги моноклональних і поліклональних антитіл для багатьох видів, а також створення бібліотеки антитіл і послуги скринінгу. Alpha Lifetech може надати клієнтам антитіла та рекомбінантні антитіла з гарантованою якістю, а також відповідні послуги для приготування ефективних, високоспецифічних і стабільних антитіл. Використовуючи комплексні платформи антитіл і розробку антитіл, ми надаємо послуги, що охоплюють вихідний і нижчий етапи виробництва антитіл, включаючи технічні послуги, такі як підготовка антитіл, очищення, секвенування антитіл і перевірка.
Alpha Lifetech має розвинену платформу виявлення антитіл, яка надає клієнтам низку послуг, включаючи імунітет тварин, створення та скринінг бібліотеки антитіл на фаговому дисплеї, секвенування антитіл, експресію антитіл, очищення антитіл, валідацію антитіл і маркування антитіл на основі технології гібридом, технології окремих В-клітин, технології фагового дисплея тощо. Alpha Lifetech має стандартну виробничу лінію, і крім послуг з підготовки антитіл, також можуть бути надані допоміжні послуги, такі як гуманізація антитіл, дозрівання афінності антитіл, розробка та розробка препаратів ADC, а також розробка подальшої послідовності CAR-T. Водночас Alpha Lifetech створила бібліотеку антитіл на основі технологічних платформ фагового дисплея M13, T4 і T7 з ємністю зберігання до 10^8-10^9. Позитивний рівень, рівень вставок і різноманітність бібліотеки можуть досягати понад 90%.
Технологія фагового дисплея
Виробництво моноклональних антитіл спочатку було підготовлено за допомогою технології гібридомних моноклональних антитіл для отримання мишачих гібридомних моноклональних антитіл. Зокрема, шляхом злиття клітин селезінки імунізованих мишей з клітинами мієломи людини або мишей утворюються гібридомні клітини, які секретують специфічні гібридомні моноклональні антитіла. Шляхом гуманізованої модифікації мишачих моноклональних антитіл і модифікації генної інженерії антитіл для надання їм постійної області людського імуноглобуліну можна зменшити їхню імуногенність. Інженерія моноклональних антитіл широко використовується в біомедичних і клінічних застосуваннях.
Alpha Lifetech може надати комплексні послуги з розробки антитіл, починаючи від розробки протоколу доклінічного дослідження до виявлення кон’югатів антитіл і лікарських засобів (ADC) і валідації на тваринах. Кон’югати антитіл (ADC) можуть доставляти хіміотерапевтичні препарати до ракових клітин. Після зв’язування зі специфічними мішенями, експресованими на ракових клітинах, ADC вивільняє цитотоксичні препарати в ракові клітини. Alpha Lifetech також може надати клієнтам комплексні послуги дозрівання афінності антитіл. Завдяки вдосконаленій оптимізації мутацій і високопродуктивній технології скринінгу фагового дисплея антитіла з певною спорідненістю спочатку перевіряються, а потім вводяться мутації амінокислот для створення різноманітних варіантів. Згодом високоафінні антитіла оцінювали та перевіряли за допомогою методів скринінгу. Після кількох раундів оптимізації та структурного аналізу врешті-решт були отримані антитіла з вищою афінністю та більшою специфічністю.
Alpha Lifetech може створювати різні типи бібліотек фагового дисплея антитіл, включаючи імунні бібліотеки, нативні бібліотеки, напівсинтетичні бібліотеки та синтетичні бібліотеки. Завдяки високій місткості бібліотек антитіл можна отримати високоспецифічні антитіла. Можуть бути надані декілька фагмідних векторів, таких як pMECS, pComb3X і pCANTAB 5E, а також штами, такі як TG1 E. coli, XL1 Blue і ER2738. На додаток до ємності бібліотеки до 10^9, швидкість введення цільових фрагментів бібліотеки також висока, що створює достатні умови для скринінгу антитіл, які задовольняють клієнтів. Блок-схема послуги підготовки антитіл Alpha Lifetech на основі технології фагового дисплея показана на малюнку 1.
Рис.1 Схема процесу отримання моноклональних антитіл на основі технології фагового дисплея.
Процес виробництва антитіл на фаговому дисплеї
| Кроки | Вміст послуги | Хронологія |
|---|---|---|
| Крок 1: Імунізація тварин | (1) Імунізація тварин 4 рази, повторна імунізація 1 дозою, загалом імунізовано 5 доз. (2) Була зібрана негативна сироватка перед імунізацією та проведено ELISA для четвертої дози для виявлення титру сироватки. (3) Якщо титр сироваткових антитіл четвертої дози відповідає вимогам, одна додаткова доза імунізації буде введена за 7 днів до забору крові. Якщо він не відповідає вимогам, планову імунізацію продовжать. (4) Кваліфікована ефективність, забір крові та відділення моноцитів | 10 тижнів |
| Крок 2: Підготовка кДНК | (1) Загальна екстракція РНК PBMC (набір для екстракції РНК) (2) Високоточна RT-PCR підготовка кДНК (набір для зворотної транскрипції) | 1 день |
| Крок 3: Створення бібліотеки антитіл | (1) Використовуючи кДНК як матрицю, гени ампліфікували двома раундами ПЛР. (2) Фагова конструкція та трансформація: фагмідний вектор для сплайсингу генів, електропораційна трансформація бактерій-господарів TG1, конструювання бібліотеки антитіл. (3) Ідентифікація: Вибір випадковим чином 24 клонів, частота позитивних результатів ПЛР-ідентифікації + частота введення. (4) Підготовка допоміжних фагів: ампліфікація + очищення фагів M13. (5) Порятунок бібліотеки фагового дисплея | 3-4 тижні |
| Крок 4: Скринінг бібліотеки антитіл (3 раунди) | (1) Стандартний 3-раундовий скринінг (твердофазний скринінг): скринінг під тиском для максимально можливого видалення неспецифічних антитіл. (2) Вибраний бактеріофаг для ампліфікації одного клону + індукована експресія IPTG + виявлення позитивних клонів ELISA. (3) Усі позитивні клони були відібрані для секвенування генів. | 4-5 тижнів |
Служби підтримки
Ми можемо надати різні послуги зі створення імунної бібліотеки тварин і послуги скринінгу бібліотеки природних антитіл відповідно до потреб клієнтів
Кілька цілей
Доступні послуги з виявлення кількох цільових антитіл: білків, пептидів, малих молекул, вірусів, мембранних білків, мРНК тощо.
Кілька векторів
Послуга створення персоналізованої бібліотеки, ми можемо надати різні вектори бактеріофагів, включаючи PMECS, pComb3X і pCANTAB 5E, і модифікувати їх відповідно до потреб клієнтів
Зріла платформа
Місткість зберігання може досягати 10 ^ 8-10 ^ 9, швидкість введення вище 90%, а афінність антитіл, отриманих під час скринінгу, зазвичай знаходиться на рівні нМ пМ
Служба розробки моноклональних антитіл
Ми можемо надати послуги з розробки високоякісних моноклональних антитіл високої чистоти та високої специфічності, включаючи виробництво моноклональних антитіл миші та моноклональних антитіл кролика
Технологічна платформа Hybridoma
Включаючи програму імунізації, послуги з підготовки антитіл, очищення антитіл, високоефективне секвенування антитіл, валідацію антитіл тощо
Платформа для сортування одноклітин B
Альфа Лайфтек має переваги в часі скринінгу та отриманні якісних антитіл. Він може забезпечувати дизайн, синтез і модифікацію антигену, імунітет тварин, скринінг збагачення окремих В-клітин, секвенування окремих клітин.
Платформа розробки антитіл на фаговому дисплеї
Alpha Lifetech може надавати технічні послуги з розробки антитіл на фаговому дисплеї, починаючи з підготовки антитіл, очищення антитіл, секвенування антитіл тощо.
Якщо у вас виникли запитання, зв’яжіться з нами в будь-який час.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102