Платформа для розробки антитіл на основі фагового дисплея
Завдяки комплексній системі платформи антитіл, Alpha Lifetech може надавати технічні послуги з підготовки антитіл, очищення антитіл, секвенування антитіл тощо.
ЗВ'ЯЖІТЬСЯ З НАМИ01
Платформа для розробки антитіл на основі фагового дисплея
Компанія Alpha Lifetech, маючи великий досвід у розробці антитіл, може надавати індивідуальні послуги з розробки моноклональних та поліклональних антитіл для різних видів, а також послуги зі створення бібліотек антитіл та скринінгу. Alpha Lifetech може забезпечити клієнтів високоякісними антитілами та рекомбінантними антитілами, а також відповідні послуги для підготовки ефективних, високоспецифічних та стабільних антитіл. Використовуючи комплексні платформи антитіл та інженерію антитіл, ми надаємо послуги, що охоплюють початковий та нижній етапи виробництва антитіл, включаючи технічні послуги, такі як підготовка антитіл, очищення, секвенування антитіл та валідація.
Alpha Lifetech має зрілу платформу для виявлення антитіл, яка надає клієнтам низку послуг, включаючи імунітет тварин, створення та скринінг бібліотек антитіл для фагового дисплею, секвенування антитіл, експресію антитіл, очищення антитіл, валідацію антитіл та маркування антитіл на основі технології гібридом, технології окремих B-клітин, технології фагового дисплею тощо. Alpha Lifetech має стандартну виробничу лінію, і на додаток до послуг з підготовки антитіл, також можуть надаватися допоміжні послуги, такі як гуманізація антитіл, дозрівання афінності антитіл, розробка та розробка лікарських засобів ADC, а також подальший дизайн послідовностей CAR-T. Водночас Alpha Lifetech створила бібліотеку антитіл на основі платформ технології фагового дисплею M13, T4 та T7 з ємністю зберігання до 10^8-10^9. Коефіцієнт позитивних результатів, коефіцієнт вставки та різноманітність бібліотеки можуть сягати понад 90%.
Технологія фагового дисплея
Спочатку для отримання моноклональних антитіл гібридомних антитіл використовувалася технологія гібридомних моноклональних антитіл для отримання гібридомних моноклональних антитіл миші. Зокрема, шляхом злиття клітин селезінки імунізованих мишей з клітинами мієломи людини або мишей утворюються гібридомні клітини, які секретують специфічні гібридомні моноклональні антитіла. Шляхом гуманізованої модифікації мишачих моноклональних антитіл та генно-інженерної модифікації антитіл для надання їм постійної області людського імуноглобуліну можна зменшити їхню імуногенність. Інженерія моноклональних антитіл широко використовується в біомедичних та клінічних застосуваннях.
Компанія Alpha Lifetech може надати комплексні послуги з розробки антитіл, від розробки протоколів доклінічних досліджень до виявлення кон'югатів антитіл-ліків (ADC) та їх валідації на тваринах. Кон'югати антитіл-ліків (ADC) можуть доставляти хіміотерапевтичні препарати до ракових клітин. Після зв'язування зі специфічними мішенями, що експресуються на ракових клітинах, ADC вивільняє цитотоксичні препарати в ракові клітини. Alpha Lifetech також може надати клієнтам комплексні послуги з дозрівання афінності антитіл. Завдяки передовій оптимізації мутацій та технології скринінгу високопродуктивного фагового дисплею, антитіла з певною афінністю спочатку скринінгуються, а потім вводяться амінокислотні мутації для створення різноманітних варіантів. Згодом високоафінні антитіла були оцінені та скринінговані за допомогою методів скринінгу. Після кількох раундів оптимізації та структурного аналізу були отримані антитіла з вищою афінністю та сильнішою специфічністю.
Alpha Lifetech може створювати різні типи бібліотек фагового дисплею антитіл, включаючи імунні бібліотеки, нативні бібліотеки, напівсинтетичні бібліотеки та синтетичні бібліотеки. Завдяки високій ємності бібліотек антитіл можна отримати високоспецифічні антитіла. Можна надати кілька фагемідних векторів, таких як pMECS, pComb3X та pCANTAB 5E, а також штами, такі як TG1 E. coli, XL1 Blue та ER2738. Окрім ємності бібліотеки до 10^9, швидкість вставки цільових фрагментів у бібліотеку також висока, що створює достатні умови для скринінгу антитіл, які задовольняють клієнтів. Блок-схема служби підготовки антитіл Alpha Lifetech на основі технології фагового дисплею показана на рисунку 1.
Рис.1. Схема процесу приготування моноклональних антитіл на основі технології фагового дисплею.
Робочий процес виробництва антитіл фагового дисплея
| Кроки | Зміст послуги | Хронологія |
|---|---|---|
| Крок 1: Імунізація тварин | (1) Імунізація тварин 4 рази, бустерна імунізація 1 доза, загалом 5 доз імунізовано. (2) Перед імунізацією було зібрано негативну сироватку, а для визначення титру сироватки четвертої дози було проведено ІФА. (3) Якщо титр антитіл у сироватці крові після четвертої дози відповідає вимогам, ще одну дозу імунізації буде введено за 7 днів до забору крові. Якщо він не відповідає вимогам, планову імунізацію буде продовжено. (4) Кваліфікована потенція, збір крові та розділення моноцитів | 10 тижнів |
| Крок 2: Підготовка кДНК | (1) Екстракція загальної РНК PBMC (набір для екстракції РНК) (2) Високоточна RT-PCR підготовка кДНК (набір для зворотної транскрипції) | 1 день |
| Крок 3: Створення бібліотеки антитіл | (1) Використовуючи кДНК як матрицю, гени ампліфікували за допомогою двох раундів ПЛР. (2) Конструювання та трансформація фагів: сплайсинг генів фагмідного вектора, електропораційна трансформація бактерій-господарів TG1, конструювання бібліотеки антитіл. (3) Ідентифікація: Випадковим чином вибрати 24 клони, коефіцієнт позитивної ПЛР-ідентифікації + коефіцієнт вставки. (4) Підготовка фагів за допомогою асистованого методу: ампліфікація + очищення фага M13. (5) Порятунок бібліотеки фагового дисплея | 3-4 тижні |
| Крок 4: Скринінг бібліотеки антитіл (3 раунди) | (1) Стандартний 3-етапний скринінг (твердофазний скринінг): скринінг під тиском для максимально можливого видалення неспецифічних антитіл. (2) Ампліфікація одного клону, відібраний бактеріофаг + експресія, індукована IPTG + ІФА-детектування позитивних клонів. (3) Усі позитивні клони були відібрані для секвенування генів. | 4-5 тижнів |
Служби підтримки
Ми можемо надати різні послуги зі створення імунних бібліотек на основі тварин та послуги зі скринінгу бібліотек природних антитіл відповідно до потреб клієнтів.
Кілька цілей
Доступні послуги з виявлення кількох цільових антитіл: білки, пептиди, малі молекули, віруси, мембранні білки, мРНК тощо.
Кілька векторів
Персоналізована послуга з будівництва бібліотеки, ми можемо надати різні бактеріофагні вектори, включаючи PMECS, pComb3X та pCANTAB 5E, та модифікувати їх відповідно до потреб клієнта.
Платформа для дорослих
Місткість зберігання може досягати 10^8-10^9, коефіцієнти введення перевищують 90%, а спорідненість антитіл, отриманих шляхом скринінгу, зазвичай знаходиться на рівні нМ/пМ.
Служба розробки моноклональних антитіл
Ми можемо надати високоякісні, високочисті та високоспецифічні послуги з розробки моноклональних антитіл, включаючи виробництво моноклональних антитіл миші та моноклональних антитіл кролика.
Технологічна платформа гібридом
Включаючи програму імунізації, послуги з підготовки антитіл, очищення антитіл, високопродуктивне секвенування антитіл, валідацію антитіл тощо.
Платформа сортування окремих B-клітин
Alpha Lifetech має переваги у часі скринінгу та отриманні високоякісних антитіл. Він може забезпечити дизайн, синтез та модифікацію антигенів, імунітет тварин, скринінг збагачення окремих B-клітин, секвенування окремих клітин.
Платформа для розробки антитіл на основі фагового дисплея
Alpha Lifetech може надавати технічні послуги з розробки антитіл для фагового дисплею, починаючи від підготовки антитіл, очищення антитіл, секвенування антитіл тощо.
Якщо у вас виникнуть будь-які питання, будь ласка, звертайтеся до нас у будь-який час.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102