Платформа для побудови бібліотеки пептидів фагового дисплея

Alpha Lifetech пропонує низку технологій побудови пептидних бібліотек. Ми в основному надаємо послуги з побудови пептидних бібліотек T7 та пептидних бібліотек M13 відповідно до типів фагів; ми надаємо послуги з побудови лінійно-петлевих пептидних бібліотек 7 та пептидних бібліотек 12 відповідно до розміру послідовності молекул пептидів тощо. Ми також надаємо послуги з побудови пептидних бібліотек на замовлення. Ми також надаємо послуги з синтезу та побудови пептидів на замовлення.

Технологія фагового дисплею як метод перенесення функціональних екзогенних пептидів у фазі на поверхню капсиду, підтримуючи структурну та функціональну активність екзогенного білка або пептиду, не впливає на здатність рекомбінантного фага інфікувати клітину-хазяїна. Кожна фагова вірусна частинка може відображати лише один екзогенний випадковий пептид на своїй поверхні, а сукупність усіх фагів, що відображають різні пептиди, утворює бібліотеку фагових пептидів. Бібліотеки фагових пептидів є потужними інструментами для експресії кількох спеціально синтезованих пептидів та скринінгу специфічних пептидів, і широко використовуються в галузях аналізу антигенних епітопів, скринінгу ліків та розробки вакцин.

Вступ до побудови бібліотеки пептидів

Конструювання пептидних бібліотек полягає в ампліфікації пептидних бібліотек шляхом лігування послідовностей ДНК пептидів у різних форматах з відповідними послідовностями білків фагової оболонки та використання фагового повторного складання для перенесення цільового пептиду на поверхню фага. Конструювання пептидних бібліотек на основі технології фагового дисплею належить до категорії біосинтезу пептидного синтезу, і на ринку існують методи рідкофазного та твердофазного синтезу пептидів. Наразі Alpha Lifetech пропонує різноманітні технології конструювання пептидних бібліотек, які можуть забезпечувати попередньо створені пептидні бібліотеки та рандомізовані пептидні бібліотеки відповідно до розміру послідовності молекул пептидів, включаючи конструювання 7-пептидних бібліотек, 12-пептидних бібліотек, 15-пептидних бібліотек, циклічних 7-пептидних бібліотек та циклічних 12-пептидних бібліотек, а також можуть бути налаштовані для синтезу пептидних бібліотек для різних типів та застосувань.

Застосування побудови та скринінгу бібліотеки пептидів

Рандомізовані пептидні бібліотеки, створені за допомогою технології фагового дисплею, забезпечують функціональний доступ до пептидів та фізичний зв'язок між фенотипом (відображений пептид) та генотипом (кодована ДНК); ці бібліотеки підходять для процесів скринінгу, які відокремлюють зв'язані клони від незв'язаних клонів шляхом афінного очищення. Фагово-відображені пептидні бібліотеки можуть бути використані для (i) характеристики імунних клітинних епітопів, (ii) скринінгу біоактивних пептидів, зв'язаних з рецепторами або білками, пептидів, зв'язаних з небілковими мішенями, клітинно- або органоспецифічних пептидів тощо, та (iii) розробки пептидно-опосередкованих систем доставки ліків.

Процес створення бібліотеки пептидів фагового дисплея

Рис.1 Платформа побудови бібліотеки пептидів фагового дисплея

Робочий процес створення бібліотеки пептидів фагового дисплея

Процес	Зміст послуги	Хронологія
1. Синтез нуклеотидної послідовності	Випадковий синтез нуклеотидних послідовностей заданої замовником довжини	2-3 тижні
2. Полімеризація та перетравлення	Полімеризація та перетравлення синтезованої послідовності ДНК	1 день
3. Будівництво бібліотек електроперетворення	Були сконструйовані бактерії-господарі ER2738, а потім E. coli трансформували добре сконструйованою рекомбінантною плазмідою.	1 тиждень
4. Визначення розміру та різноманітності бібліотеки пептидів	Виявлення розміру пептидної бібліотеки шляхом підрахунку колоній та різноманітності пептидної бібліотеки шляхом секвенування	2-3 дні
5. Побудова бібліотеки пептидів фагового дисплея	Шляхом інфікування бібліотеки пептидів, що пакують фаги	1 тиждень