Система фагового дисплея
Компанія Alpha Lifetech створила ідеальну стабільну систему фагового дисплея, яка економить час на наукові дослідження або проектні дослідження та полегшує подальше виробництво.
ЗВ'ЯЖІТЬСЯ З НАМИ01
Система фагового дисплея
Компанія Alpha Lifetech вже багато років глибоко займається технологією фагового дисплея. Alpha Lifetech створила ідеальну стабільну платформу фагового дисплея, яка економить час на наукові дослідження або проектні дослідження та спрощує подальше виробництво. Ми пропонуємо клієнтам кілька систем фагового дисплея на вибір, включаючи системи фагового дисплея M13, T7, T4 та λ. Залежно від ваших експериментальних потреб, ви можете вибрати відповідну систему фагового дисплея. Alpha Lifetech також може надавати клієнтам такі послуги, як виробництво антитіл VHH, scfv та Fab.
Вступ до фагового дисплею
Технологія фагового дисплею – це метод, який використовує фаги (віруси, що інфікують бактерії) для пошуку функціональних зв'язуючих молекул специфічних білків або пептидів. Методи побудови бібліотеки фагових антитіл включають побудову бібліотеки антитіл Fab, scFv, vhh тощо. За типами бактеріофагів їх можна розділити на бактеріофаги m13, T7, T4, λ та інші бактеріофаги. За типом бібліотеки її можна розділити на бібліотеки випадкових пептидів, кДНК, антитіл та білків. Технологія фагового дисплею проста в експлуатації та недорога у використанні, вона містить Fab, scfv та vhh фагові дисплеї. Однак цей метод обмежує різноманітність молекулярної генетики в бібліотеці, оскільки не може експресувати занадто довгі послідовності.
Технологія фагового дисплею здатна формувати фізичний зв'язок між відображеною молекулою та послідовністю ДНК, що кодує відображену молекулу, а амінокислотну послідовність специфічного кон'югату можна миттєво визначити шляхом секвенування ДНК потрібного фрагмента в геномі фага.
Наразі технологія фагового дисплею широко використовується. Серед них є значні досягнення в дослідженні та розробці нових вакцин (недорогі та ефективні синтетичні вакцини), розробці препаратів на основі антитіл (скринінг інгібіторів ферментів), передачі клітинних сигналів (скринінг модельованих епітопів) та дослідженні антигенних епітопів (отримання моноклональних антитіл).
Принцип фагового дисплею
Фаговий дисплей – це молекулярна технологія, заснована на генетичній модифікації фагової ДНК, яка зв'язує цільовий фрагмент з білком фагової оболонки та таким чином експресує його на поверхні фага. Чужорідна послідовність ДНК вводиться в певне місце в нуклеотидній послідовності фагового геному, яке кодує білок фагової оболонки (рис. 1).
Коли відбувається фагова інфекція, ген фага починає експресуватися всередині бактеріального хазяїна, а вставлений цільовий фрагмент відображається на поверхні фага як комбінація спорідненого гена, що кодує білок оболонки, та клонованої послідовності.
Рис.1 Архітектура віріона бактеріофага М13 та принцип технології фагового дисплею.(Джерело посилання: Фаговий дисплей та інші технології пептидного дисплея | Огляди мікробіології FEMS | Oxford Academic (oup.com))
Системи фагового дисплею
Нитчасті фаги є найпоширенішою системою фагового дисплею, і системи фагового дисплею можуть бути побудовані з використанням інших фагів. Такі системи можуть відображати відносно великі пептиди або скринінгувати бібліотеки кДНК ефективніше, ніж системи на основі нитчастих фагів.
Рис.2 Типи бактеріофагів, що використовуються у фаговому дисплеї.(Джерело посилання: Фаговий дисплей та інші технології пептидного дисплея | Огляди мікробіології FEMS | Oxford Academic (oup.com))
Перевага системи фагового дисплея
Системи фагового дисплею зазвичай використовують ниткоподібні фаги, включаючи M13, fd та f1. Порівняно з фагами M13, фаги бактеріофага T7 складаються з дволанцюгової ДНК, яка демонструє більшу стабільність та менш схильна до мутацій під час реплікації. Фаг T7, як носій, швидко росте та може утворювати бляшки протягом 3 годин, що економить багато часу на клонування та скринінг.
Конструювання фагової бібліотеки T7 використовувалося для експресії генів на поверхні та не на поверхні, а також для конструювання дисплейних бібліотек пептидів, кДНК, геномної ДНК та антитіл. Це дозволяє використовувати фаг T7 не лише як антимікробний засіб, але й для скринінгу лікарських засобів у скринінгу органів-мішеней (таких як мозок, печінка та легені), скринінгу мішеней для розпізнавання антитіл, дослідження фізіологічних механізмів тощо. Його також можна використовувати для діагностики та лікування різних захворювань.
Інші форми бактеріофагів
Вибірково-інфекційний фаг
На відміну від традиційного фагового дисплею, селективний інфекційний фаг (SIP) безпосередньо пов'язує взаємодію продукційного білка-ліганда з фаговою інфекцією та розширенням без необхідності етапів елюції.
Рис.3 Вибірково-інфікуючий фаг (SIP).(Джерело посилання: Фаговий дисплей та інші технології пептидного дисплея | Огляди мікробіології FEMS | Oxford Academic (oup.com))
Ландшафтні фаги
Ландшафтні фаги спричинені тисячами копій чужорідних пептидів, розташованих навколо трубчастих капсидів у надщільних повторюваних візерунках, а полівалентне відображення на ландшафтних фагах спонукає до високоафінного відбору, тому неможливо розрізнити високу та низьку афінність пептидних лігандів.
Рис.4 Ідея ландшафтних фагів. (Джерело посилання: Фаговий дисплей та інші технології пептидного дисплея | Огляди мікробіології FEMS | Oxford Academic (oup.com))
Багатофагові дисплейні системи
Система відображення фагів M13, T7, T4, λ на вибір клієнтів.
Висока пропускна здатність скринінгу
Ми можемо використовувати системи фагового дисплея для швидкого створення великомасштабних фагових бібліотек та досягнення високопродуктивних скринінгових експериментів.
Індивідуальна послуга фагового дисплею
Клієнти можуть налаштувати комплексні послуги відповідно до вимог проекту, такі як скринінг високоафінних антитіл тощо.
Широкий діапазон застосування
Застосовується в таких галузях, як інженерія антитіл, пептидна та білкова інженерія, розробка та відкриття ліків, дослідження взаємодії білків тощо.
Якщо у вас виникнуть будь-які питання, будь ласка, звертайтеся до нас у будь-який час.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102