Вступ до синтезованих бібліотек антитіл

Бібліотека синтезованих антитіл, також відома як бібліотека De novo, — це синтетичний метод, який використовує такі методи, як синтез ДНК або фаговий дисплей, для розробки та синтезу повних варіабельних областей антитіл, включаючи каркасні області та CDR, без використання наївних бібліотек антитіл.

Бібліотека напівсинтетичних антитіл створюється шляхом поєднання природних бібліотек антитіл із різноманітністю синтетичних антитіл. Зазвичай це включає синтез олігонуклеотидів ДНК для отримання набору різних комплементарно-визначальних ділянок (CDR), які потім поєднуються з константним каркасом антитіл, отриманим з природних джерел, таких як B-клітини людини або тварин. Синтезована CDR вносить різноманітність у бібліотеку, в результаті чого утворюються антитіла, спрямовані на широкий спектр епітопів. Бібліотека напівсинтетичних антитіл забезпечує компроміс між природною різноманітністю імунної системи та контрольованою різноманітністю, досягнутою за допомогою синтетичних методів.

Різниця між наївними та синтетичними бібліотеками антитіл залежить від джерела генів імуноглобулінів. Тим часом, різниця між напівсинтезованою та синтезованою бібліотекою антитіл полягає в тому, що перша складається з частини наївних сегментів антитіл, таких як легкий або важкий ланцюг, і лише один з них синтезується in vitro; тоді як синтезована повністю отримана в результаті штучного синтезу за допомогою ПЛР in vitro.

Альфа Лайфтех може забезпечити

Компанія «Альфа Лайфтех»може запропонувати бібліотеку напівсинтезованих/синтезованих антитіл тварин та людей на основі нашої професійної платформи для виявлення антитіл. Завдяки багаторічному досвіду в генетичній модифікації та створенні бібліотек, можна створити синтезовані бібліотеки, здатні виробляти синтетичні антитіла зі спорідненістю та специфічністю, що перевищують можливості природних антитіл.Альфа ЛайфтехЕксперти з гордістю повідомляють, що ми можемо гарантувати високий рівень успіху у створенні бібліотеки антитіл, що містить 10^8 – 10^10 незалежних клонів.

Компанія «Альфа Лайфтех»пишається тим, що пропонує комплексні послуги зі створення бібліотек антитіл для задоволення різноманітних потреб дослідників з усього світу, включаючи scFv, Fab, VHH антитіла та індивідуальні бібліотеки. Наша мета — розуміти та задовольняти потреби різних клієнтів, а також допомагати з будь-якими майбутніми та виникаючими проблемами в дослідницькій роботі.

Процес створення бібліотек синтезованих антитіл

Дизайн
Фаза проектування включає вибір каркасних структур антитіл та ділянок, що визначають комплементарність (CDR), на основі існуючих послідовностей антитіл або структурних даних. Синтетичні CDR-антитіла також можуть бути розроблені для введення специфічних функціональних можливостей або посилення властивостей зв'язування.

Синтез
Синтетична ДНК, що кодує розроблені послідовності антитіл, включаючи як каркасні області, так і CDR, синтезується за допомогою хімічних або ферментативних методів.

Асамблея
Синтезовані фрагменти ДНК збираються у вектори експресії антитіл за допомогою таких методів, як ПЛР, лігування або складання за Гібсоном. Ці вектори потім можна вводити в системи експресії, такі як бактеріальні, дріжджові або клітини ссавців, для виробництва антитіл.

Відбір та перевірка
Сконструйовані бібліотеки антитіл скринінгують та відбирають на наявність антитіл з бажаними властивостями за допомогою високопродуктивних методів скринінгу. Це може включати такі методи, як фаговий дисплей, дріжджовий дисплей або рибосомний дисплей, залежно від формату бібліотеки та застосування.

Послуги з будівництва бібліотек синтезованих антитіл

Компанія «Альфа Лайфтех»надає клієнтам комплексні послуги з проектування та синтезу бібліотек антитіл шляхом лігування репертуарів генів V важкого та легкого ланцюгів у фаговий вектор за допомогою системи сайт-специфічної рекомбінації Cre-lox для створення репертуару Fab, що відображаються на фазі, що складається з 6,5 × 10^10 клонів. Бібліотека дала антитіла проти численних антигенів, деякі з яких мали наномолярну спорідненість. Генерація бібліотеки людських антитіл базується на технології фагового дисплея M13 (показано на малюнку нижче).