Введення в бібліотеки синтезованих антитіл

Синтезована бібліотека антитіл, також відома як бібліотека De novo, — це синтетичний метод, який використовує такі методи, як синтез ДНК або фаговий дисплей, для розробки та синтезу повних варіабельних областей антитіл, включаючи каркасні області та CDR, не покладаючись на наївні бібліотеки антитіл.

Бібліотека напівсинтетичних антитіл створюється шляхом поєднання бібліотек природних антитіл із синтетичним різноманіттям. Зазвичай це включає синтез олігонуклеотидів ДНК для отримання набору різних комплементарних визначальних областей (CDR), які потім поєднуються з постійним каркасом антитіл, отриманим із природних джерел, таких як В-клітини людини або тварини. Синтезований CDR вносить різноманітність у бібліотеку, в результаті чого антитіла націлені на широкий спектр епітопів. Бібліотека напівсинтетичних антитіл забезпечує компроміс між природною різноманітністю імунної системи та контрольованою різноманітністю, досягнутою за допомогою синтетичних методів.

Різниця між наївними та синтетичними бібліотеками антитіл залежить від джерела генів імуноглобулінів. Тим часом різниця між напівсинтезованою та синтезованою бібліотекою антитіл полягає в тому, що перша складається з частини наївних сегментів антитіл, таких як легкий ланцюг або важкий ланцюг, і лише один з них синтезується in vitro; в той час як синтезований повністю отриманий в результаті штучного синтезу за допомогою ПЛР in vitro.

Alpha Lifetech може надати

Alpha Lifetech Inc.може запропонувати бібліотеку напівсинтезованих/синтезованих антитіл тварин і людей на основі нашої професійної платформи виявлення антитіл. Завдяки багаторічному досвіду генетичної модифікації та побудови бібліотек можна створити синтезовані бібліотеки, здатні виробляти синтетичні антитіла з афінністю та специфічністю, що перевищують здатність природних антитіл.Альфа ЛайфтекЕксперти з гордістю повідомляють, що ми можемо гарантувати високий рівень успіху у створенні бібліотеки антитіл, яка містить 10^8 – 10^10 незалежних клонів.

Alpha Lifetech Inc.з гордістю пропонує комплексні послуги зі створення бібліотек антитіл для задоволення різноманітних потреб глобальних дослідників, включаючи scFv, Fab, антитіла VHH та індивідуальні бібліотеки. Наша мета полягає в тому, щоб зрозуміти та задовольнити вимоги різних клієнтів, а також допомогти у вирішенні будь-яких майбутніх та нових проблем у дослідницькій роботі.

Сервісний процес конструювання бібліотек синтезованих антитіл

Дизайн
Фаза проектування включає вибір каркасів антитіл і областей, що визначають комплементарність (CDR), на основі існуючих послідовностей антитіл або структурних даних. Синтетичні CDR антитіла також можуть бути розроблені для введення специфічних функціональних можливостей або посилення властивостей зв’язування.

Синтез
Синтетична ДНК, що кодує розроблені послідовності антитіл, включаючи каркасні області та CDR, синтезується за допомогою хімічних або ферментативних методів.

Збірка
Синтезовані фрагменти ДНК збирають у вектори експресії антитіл за допомогою таких методів, як ПЛР, лігування або збирання Гібсона. Потім ці вектори можна вводити в системи експресії, такі як клітини бактерій, дріжджів або ссавців, для виробництва антитіл.

Відбір і відбір
Сконструйовані бібліотеки антитіл перевіряють і відбирають антитіла з бажаними властивостями за допомогою високопродуктивних методів скринінгу. Це може включати такі методи, як фаговий дисплей, дріжджовий дисплей або рибосомний дисплей, залежно від формату бібліотеки та застосування.

Служба створення бібліотек синтезованих антитіл

Alpha Lifetech Inc.надає клієнтам універсальний дизайн і синтезовані послуги бібліотек антитіл шляхом лігування репертуарів V-генів важкого та легкого ланцюгів у фаговий вектор за допомогою системи сайт-специфічної рекомбінації Cre-lox для створення репертуару Fab, що відображається на фагах, що включає 6,5 × 10^10 клонів. Бібліотека виявила антигени проти численних антигенів, деякі з яких мали наномолярну афінність. Створення бібліотеки антитіл людини базується на технології відображення фагів M13 (показано на малюнку нижче).