Antikor muhandisligi nima?

Antikor muhandisligi yordamida antikorlarning molekulyar hajmini, farmakokinetikasini, immunogenligini, bog'lanish yaqinligini, o'ziga xosligini va effektor funktsiyasini o'zgartirish mumkin bo'ldi. Antikorlarni sintez qilgandan so'ng, antikorlarning o'ziga xos bog'lanishi ularni klinik diagnostika va davolashda juda qimmatli qiladi. Antikor muhandisligi orqali ular dori va diagnostikaning erta rivojlanishi ehtiyojlarini qondirishi mumkin.

Antikor muhandisligining maqsadi tabiiy antikorlar erisha olmaydigan yuqori o'ziga xos, barqaror funktsiyalarni loyihalash va ishlab chiqarish, terapevtik antikorlarni ishlab chiqarish uchun asos yaratishdir.

Alpha Lifetech antikor muhandisligi bo'yicha keng ko'lamli loyiha tajribasiga ega bo'lib, bir nechta turlar uchun moslashtirilgan monoklonal va poliklonal antikor xizmatlarini, shuningdek, fag displey antikorlari kutubxonasini qurish va skrining xizmatlarini taqdim etishi mumkin. Alpha Lifetech mijozlarga samarali, yuqori o'ziga xos va barqaror antikorlarni ishlab chiqarish uchun sifatli biosimilar antikorlar va rekombinant protein mahsulotlari, shuningdek tegishli xizmatlarni taqdim etishi mumkin. Keng qamrovli antikorlar, oqsil platformalari va faglarni ko'rsatish tizimlaridan foydalangan holda biz antikor ishlab chiqarishning yuqori va quyi oqimini qamrab oladigan xizmatlarni, jumladan, antikorlarni insonparvarlashtirish, antikorlarni tozalash, antikorlarni sekvensiyalash va antikorlarni tekshirish kabi texnik xizmatlarni taqdim etamiz.

Antikor muhandisligining kashshof bosqichi ikkita texnologiya bilan bog'liq:

--Rekombinant DNK texnologiyasi

--Gibridoma texnologiyasi

Antikor muhandisligining jadal rivojlanishi uchta muhim texnologiya bilan bog'liq:

--Genlarni klonlash texnologiyasi va polimeraza zanjiri reaktsiyasi

--Protein ifodasi: Rekombinant oqsillar xamirturush, tayoq shaklidagi viruslar va o'simliklar kabi ekspression tizimlar tomonidan ishlab chiqariladi.

--Kompyuter yordamida konstruktiv dizayn

Antikorlarning birinchi avlodi kimerik antikorlarni ishlab chiqarish uchun insoniylashtirildi, bu erda sichqonchaning monoklonal antikorlarining o'zgaruvchan hududi inson IgG molekulalarining doimiy hududi bilan bog'langan. Ikkinchi avlod sichqoncha monoklonal antikorining antigen bog'lovchi hududi (CDR) inson IgG ga ko'chirildi. CDR mintaqasidan tashqari, boshqa barcha antikorlar deyarli inson antikorlaridir va sichqonchani klon antikorlarini insonni davolashda qo'llashda odamning sichqonchaga qarshi antikorlarini (HAMA) qo'zg'atmaslikka harakat qilindi.

 

Fag displey kutubxonasini qurish uchun birinchi qadam immunizatsiya qilingan hayvonlarning B hujayralaridan ajratilishi mumkin bo'lgan (immun kutubxona qurilishi), to'g'ridan-to'g'ri immunizatsiya qilinmagan hayvonlardan (tabiiy kutubxona qurilishi) yoki hatto antikor gen fragmentlari bilan in vitro yig'ilishi mumkin bo'lgan antikorlarni kodlovchi genlarni olishdir (sintetik kutubxona qurilishi). Keyinchalik, genlar PCR orqali kuchaytiriladi, plazmidlarga kiritiladi va tegishli xost tizimlarida (xamirturush ifodasi (odatda Pichia pastoris), prokaryotik ekspresyon (odatda E. coli), sutemizuvchilar hujayralari ifodasi, o'simlik hujayrasi ifodasi va tayoq shaklidagi viruslar bilan zararlangan hasharotlar hujayrasi ifodasi) ifodalanadi. Eng keng tarqalgani E. coli ekspresyon tizimi bo'lib, u fagga o'ziga xos kodlovchi antikorlar ketma-ketligini birlashtiradi va fag qobig'i oqsillaridan birini (pIII yoki pVIII) kodlaydi. ning gen sintezi, Va bakteriofaglar yuzasida ko'rsatiladi. Ushbu texnologiyaning asosi fag displey kutubxonasini qurishdan iborat bo'lib, u o'ziga xos bog'lanishga ega bo'lishi mumkin bo'lgan tabiiy kutubxonalardan afzalliklarga ega. Keyinchalik, antigen o'ziga xosligi bo'lgan antikorlar biologik tanlash jarayoni orqali tekshiriladi, maqsadli antijenler fiksatsiyalanadi, bog'lanmagan faglar qayta-qayta yuviladi va bog'langan faglar keyingi boyitish uchun yuviladi. Uch yoki undan ko'p marta takrorlangandan so'ng, yuqori o'ziga xoslik va yuqori yaqinlikdagi antikorlar ajratiladi.

3-rasm: Antikorlar kutubxonasini qurish va skrining

Rekombinant DNK texnologiyasi antikor fragmentlarini yaratish uchun ishlatilishi mumkin. Fab antikorlari dastlab faqat me'da proteazasi tomonidan gidrolizlanishi mumkin (Fab ') 2 bo'laklarini hosil qilish uchun, so'ngra alohida Fab fragmentlarini hosil qilish uchun papain tomonidan hazm qilinadi. Fv bo'lagi VH va VL dan iborat bo'lib, ular disulfid bog'lari yo'qligi sababli yomon barqarorlikka ega. Shuning uchun VH va VL 15-20 aminokislotadan iborat qisqa peptid orqali bir-biriga bog'lanib, molekulyar og'irligi taxminan 25KDa bo'lgan bitta zanjirli o'zgaruvchan fragment (scFv) antikorini hosil qiladi.

Camelidae (Camel, LIama va Alpaca) da antikor tuzilishini o'rganish antikorlarning faqat og'ir zanjirlarga ega ekanligini va engil zanjirlar yo'qligini aniqladi, shuning uchun ular og'ir zanjirli antikorlar (hcAb) deb ataladi. Og'ir zanjirli antikorlarning o'zgaruvchan domeni 12-15 kDa hajmiga ega bo'lgan yagona domenli antikorlar yoki nanobodlar yoki VHH deb ataladi. Monomerlar sifatida ularda disulfid bog'lari yo'q va juda barqaror, antigenlarga juda yuqori yaqinlik.

5-rasm: Og'ir zanjirli antikor va VHH/ Nanobody

Hujayra erkin ifodasi in vitro oqsil sinteziga erishish uchun tabiiy yoki sintetik DNK ifodasidan foydalanadi, odatda E. coli ekspresyon tizimidan foydalanadi. U oqsillarni tez ishlab chiqaradi va in vivo ko'p miqdorda rekombinant oqsillarni ishlab chiqarishda hujayralardagi metabolik va sitotoksik yukni oldini oladi. Bundan tashqari, sintez qilish qiyin bo'lgan oqsillarni ishlab chiqarishi mumkin, masalan, tarjimadan keyin o'zgartirish yoki membrana oqsillarini sintez qilish qiyin.