Aptamer ishlab chiqish platformasi

Aptamerlar yuqori yaqinlik va yuqori o'ziga xoslik xususiyatiga ega bo'lgan, antikorlar kabi nishon molekulalariga maxsus bog'lanadigan bitta zanjirli oligonukleotidlar (DNK, RNK yoki XNA) bo'lib, ular biosensorlarni ishlab chiqish, diagnostika va terapevtika uchun keng qo'llaniladi.

Alpha Lifetech tomonidan taqdim etilgan aptamer platformasi ikkita toifani o'z ichiga oladi: asosan SELEX aptamer kutubxonasi sintez xizmati va aptamer (DNK, RNK yoki XNA) ishlab chiqish xizmatini o'z ichiga olgan aptamer sintez platformasi va oqsillar, peptidlar, hujayralar, kichik molekulalar, metall ionlari va boshqa maqsadli molekulalar uchun SELEX texnologiyasiga asoslangan skrining xizmatlarini, shuningdek, aptamerni optimallashtirish va identifikatsiyalash tahlili xizmatlarini o'z ichiga olgan aptamer skrining platformasi.

Aptamer sintez platformasi

SELEX aptamer kutubxonasi sintez xizmati

SELEX aptamer kutubxonasi sintez xizmati asosan maqsadli molekulalarga muvofiq in vitro kimyoviy sintez orqali ko'p sonli tasodifiy bitta zanjirli oligonukleotid ketma-ketliklarini o'z ichiga olgan kutubxonani yaratishni o'z ichiga oladi. Kutubxonani yaratish SELEX texnologiyasining boshlang'ich nuqtasi bo'lib, u ulkan tasodifiy kutubxonalarni yaratish orqali keyingi skrining jarayoni uchun mo'l-ko'l nomzod ketma-ketliklarni ta'minlaydi va yuqori affinlikli aptamerlarni skrining qilish imkoniyatini oshiradi.

Kutubxona sintezi asosan quyidagi bosqichlarga bo'linadi:

Qadamlar	Texnologiya tafsilotlari
Maqsadli molekulalarni aniqlang	Aptamerlar uchun tekshirilishi kerak bo'lgan maqsadli molekulalarni aniqlang, ular oqsillar, nuklein kislotalar, kichik molekulyar, metall ionlari va boshqalar bo'lishi mumkin.
Tasodifiy ketma-ketlik dizayni	Tasodifiy ketma-ketlik uzunligi, asos tarkibi va boshqa parametrlar nishon molekulalarining xususiyatlari va skrining talablariga muvofiq ishlab chiqilgan. Odatda, tasodifiy ketma-ketliklar uzunligi o'nlab va yuzlab asoslar orasida bo'ladi.
Ruxsat etilgan ketma-ketliklarning sintezi	Ikkala uchida ham sobit ketma-ketliklarga (masalan, PCR primer ketma-ketliklariga) ega bo'lgan oligonukleotid fragmentlari ishlab chiqilgan va sintez qilingan, ular keyingi amplifikatsiya va skrining jarayonida qo'llaniladi.

Sintezlangan kutubxona sifat nazorati uchun hali ham qo'shimcha ishlov berishga muhtoj. Kutubxonaning konsentratsiyasi keyingi skrining jarayonida qo'llanilishini ta'minlash uchun aniqlandi. Kutubxonadagi tasodifiy ketma-ketliklarning xilma-xilligi va aniqligi kutubxonaning sifati skrining talablariga javob berishini ta'minlash uchun sekvenlash va boshqa usullar bilan tasdiqlandi.

Yuqoridagi bosqichlar orqali yuqori sifatli va juda xilma-xil SELEX aptamer kutubxonasini sintez qilish mumkin, bu keyingi skrining jarayoni uchun mo'l-ko'l nomzod ketma-ketliklarini ta'minlashi mumkin.

Aptamerlarni rivojlantirish xizmatlari (DNK, RNK yoki XNA)

Aptamerlar odatda nuklein kislota aptamerlarini anglatadi. Nuklein kislota aptamerlari DNK aptamerlarini, RNK aptamerlarini va kimyoviy modifikatsiyalangan nuklein kislota aptamerlari bo'lgan XNA aptamerlarini o'z ichiga oladi. SELEX texnikasi aptamerlarni ishlab chiqish uchun keng qo'llaniladi. Aptamerlarni ishlab chiqish xizmatlarining asosiy ish jarayoni kutubxona qurish, nishonni bog'lash, izolyatsiya qilish va tozalash, kuchaytirish, skriningning bir necha bosqichlari va ketma-ketlikni aniqlashni o'z ichiga oladi. Ko'p yillar davomida biz kutubxona qurish va aptamerlarni ishlab chiqishda boy tajribaga e'tibor qaratdik. Biz mijozlarga yaxshiroq xizmatlar ko'rsatishga sodiqmiz.

SELEX texnologiya jarayoni

SELEX jarayoni bir nechta bosqichlardan iborat bo'lib, ularning har biri quyidagi asosiy bosqichlardan iborat:

Kutubxona va maqsadli bog'lash

Yaratilgan nuklein kislotalar kutubxonasi ma'lum maqsadli molekulalar (masalan, oqsillar, kichik molekulali birikmalar va boshqalar) bilan aralashtiriladi, shunda kutubxonadagi nuklein kislotalar ketma-ketligi maqsadli molekulalarga bog'lanish imkoniyatiga ega bo'ladi.

Bog'lanmagan molekulalarni ajratish

Nishon molekulasiga bog'lanmagan nuklein kislota ketma-ketliklari aralashmadan affinlik xromatografiyasi, magnit boncuk ajratish va boshqalar kabi maxsus usullar bilan ajratiladi.

Bog'lovchi molekulalarning amplifikatsiyasi

Nishon molekulaga bog'langan nuklein kislota ketma-ketligi odatda polimeraza zanjiri reaksiyasi (PCR) texnologiyasidan foydalangan holda kuchaytiriladi. Keyingi skrining bosqichi uchun kuchaytirilgan ketma-ketliklar boshlang'ich kutubxona sifatida ishlatiladi.

1-rasm: SELEX skrining jarayoni

Aptamer skrining platformasi

Aptamer skrining xizmati

Alpha Lifetech sizning molekulalaringizning turli turlari uchun turli xil SELEX metodologiyalarini qo'llagan holda turli xil ixtisoslashgan aptamer skrining xizmatlarini taklif etadi:

Nishon turlari	Texnik tafsilotlar
SELEX tomonidan oqsil aptamer skriningi	Protein aptamer skriningining asosiy maqsadi maqsadli oqsil molekulalariga maxsus bog'lana oladigan aptamerlarni skrining qilishdir. Bu aptamerlarni sintez qilish osonroq, barqarorroq va atrof-muhit omillariga kamroq sezgir.
SELEX tomonidan peptid aptamer skriningi	Peptid aptamerlari yuqori o'ziga xoslik va yaqinlikka ega bo'lgan qisqa peptid ketma-ketliklari sinfidir, ular maqsadli moddalarga maxsus bog'lanishi va biotibbiyot sohasida keng qo'llanilish potentsialini namoyish qilishi mumkin. Muayyan skrining jarayoni orqali maqsadli molekulalarga maxsus bog'lanishi mumkin bo'lgan peptid aptamerlari ko'p sonli tasodifiy peptid ketma-ketlik kutubxonalaridan skrining qilinadi.
Hujayra-maxsus Aptamer skriningi (Cell-SELEX)	Nishon hujayralar yoki hujayra yuzasidagi maxsus molekulalar nishon sifatida tayyorlanadi. Nishonlar butun hujayralar, hujayra membranasidagi retseptorlar, oqsillar yoki boshqa kichik molekulalar bo'lishi mumkin.
Capture SELEX tomonidan kichik molekulali aptamer skriningi	SELEXni ushlash - bu SELEXning bir varianti bo'lgan kichik molekulali aptamerlarni skrining qilish uchun in vitro skrining usuli. SELEXni ushlash, odatda kamroq funktsional guruhlarga ega bo'lgan va to'g'ridan-to'g'ri qattiq fazali tayanchlarda immobilizatsiya qilish qiyin bo'lgan kichik molekulali nishonlarni aptamer skriningi uchun juda mos keladi.
Tirik hayvonlarga asoslangan SELEX xizmatlari	Tirik hayvonlarga asoslangan skrining xizmati biosfera, tibbiyot va biotexnologiya sohalarida keng qo'llaniladigan eksperimental usul bo'lib, u tirik hayvonlardan ma'lum molekulalar, tibbiyot xodimlari, terapevtik vositalar yoki biologik jarayonlarni skrining qilish va baholash uchun eksperimental modellar sifatida foydalanadi. Xizmatlar inson tanasidagi fiziologik muhitni simulyatsiya qilish, inson tanasida eksperimental natijalarning samaradorligi va xavfsizligini aniqroq bashorat qilish va baholash uchun mo'ljallangan.

Aptamer optimallashtirish xizmati

Aptamerlarning gidrofilligi, ishlab chiqarish jarayonida yuqori affinlik yo'qotilishi va tez ajralib chiqishi ularning qo'llanilishini cheklaydi. Hozirgi vaqtda aptamerlarning samaradorligini oshirish uchun turli xil optimallashtirish usullari o'rganilgan.

Shuningdek, bizda aptamerni optimallashtirishning turli usullari mavjud, ular orasida kesish, modifikatsiya, tegishli guruhga (tiol, karboksil, amin, fluorofor va boshqalar) konjugatsiya mavjud.

Aptamer tavsifini tahlil qilish xizmati

Aptamer tavsifini tahlil qilish xizmati aptamerning o'ziga xos bog'lanish qobiliyati, barqarorligi va o'ziga xoslik talablariga javob berishini ta'minlash uchun olingan aptamerning ishlashni baholash tuzilmasini aniqlash va funktsional tekshirish bo'yicha professional xizmatni anglatadi. U asosan yaqinlik va o'ziga xoslik tahlilini, barqarorlikni baholashni va biologik funktsiyani tekshirishni o'z ichiga oladi.