Sintezlangan antikor kutubxonalariga kirish

Sintezlangan antikorlar kutubxonasi, shuningdek, De novo kutubxonasi sifatida ham tanilgan, bu sodda antikorlar kutubxonalariga tayanmasdan, to'liq antikor o'zgaruvchan mintaqalarini, jumladan, ramka mintaqalari va CDRlarni loyihalash va sintez qilish uchun DNK sintezi yoki fag displeyi kabi texnikalardan foydalanadigan sintetik usuldir.

Yarim sintetik antikorlar kutubxonasi tabiiy ravishda mavjud bo'lgan antikorlar kutubxonalarini sintetik xilma-xillik bilan birlashtirish orqali yaratiladi. Odatda, u DNK oligonukleotidlarini sintez qilish orqali turli xil komplementar determinant mintaqalar (CDR) to'plamini hosil qilishni o'z ichiga oladi, ular keyinchalik inson yoki hayvon B hujayralari kabi tabiiy manbalardan olingan doimiy antikorlar doirasi bilan birlashtiriladi. Sintezlangan CDR kutubxonaga xilma-xillikni kiritadi, natijada turli xil epitoplarni nishonga oluvchi antikorlar paydo bo'ladi. Yarim sintetik antikorlar kutubxonasi immun tizimining tabiiy xilma-xilligi va sintetik usullar orqali erishilgan nazorat ostidagi xilma-xillik o'rtasida murosaga kelishni ta'minlaydi.

Naif va sintetik antikor kutubxonalari o'rtasidagi farq immunoglobulin genlarining manbasiga bog'liq. Shu bilan birga, yarim sintezlangan va sintezlangan antikor kutubxonasi o'rtasidagi farq shundaki, birinchisi yengil zanjir yoki og'ir zanjir kabi naif antikor segmentlarining bir qismidan iborat bo'lib, ulardan faqat bittasi in vitro sintezlanadi; sintezlangani esa butunlay in vitro PCR orqali sun'iy sintezdan olinadi.

Alpha Lifetech taqdim eta oladi

Alpha Lifetech MChJprofessional antikorlarni kashf etish platformamiz asosida hayvonlar va odamlardan yarim sintezlangan/sintezlangan antikorlar kutubxonasini taklif qilishi mumkin. Genetik modifikatsiya va kutubxona yaratish sohasida ko'p yillik tajribaga ega bo'lgan holda, tabiiy antikorlarning imkoniyatlaridan tashqarida yaqinlik va o'ziga xoslikka ega sintetik antikorlarni ishlab chiqarishga qodir bo'lgan sintezlangan kutubxonalarni yaratish mumkin.Alpha Lifetech'sMutaxassislar 10^8 – 10^10 mustaqil klonlarni o'z ichiga olgan antikor kutubxonasini yaratishda yuqori muvaffaqiyat darajasini kafolatlay olishimizni faxr bilan e'lon qilishadi.

Alpha Lifetech MChJglobal tadqiqotchilarning turli ehtiyojlarini, jumladan, scFv, Fab, VHH antitelo va moslashtirilgan kutubxonalarni qondirish uchun keng qamrovli antitelo kutubxonasini yaratish xizmatlarini taklif qilishdan faxrlanadi. Bizning maqsadimiz turli mijozlarning talablarini tushunish va qondirish hamda tadqiqot ishlarida yuzaga keladigan va paydo bo'ladigan har qanday muammolarga yordam berishdir.

Sintezlangan antikor kutubxonalarini qurish xizmati jarayoni

Dizayn
Dizayn bosqichi mavjud antikor ketma-ketliklari yoki strukturaviy ma'lumotlar asosida antikor ramkalarini va komplementarlikni aniqlovchi mintaqalarni (CDR) tanlashni o'z ichiga oladi. Sintetik CDR antikorlari ham ma'lum funktsiyalarni kiritish yoki bog'lanish xususiyatlarini kuchaytirish uchun ishlab chiqilishi mumkin.

Sintez
Dizaynlangan antikor ketma-ketliklarini, shu jumladan ramka mintaqalarini va CDRlarni kodlovchi sintetik DNK kimyoviy yoki fermentativ usullar yordamida sintez qilinadi.

Yig'ilish
Sintezlangan DNK fragmentlari PCR, ligatsiya yoki Gibson yig'ish kabi usullar yordamida antikor ekspressiya vektorlariga yig'iladi. Keyin bu vektorlar antikor ishlab chiqarish uchun bakterial, xamirturush yoki sutemizuvchi hujayralar kabi ekspressiya tizimlariga kiritilishi mumkin.

Skrining va tanlov
Yaratilgan antikor kutubxonalari yuqori o'tkazuvchanlikdagi skrining usullari yordamida kerakli xususiyatlarga ega antikorlar uchun skrining qilinadi va tanlanadi. Bu kutubxona formati va qo'llanilishiga qarab, fag displeyi, xamirturush displeyi yoki ribosoma displeyi kabi usullarni o'z ichiga olishi mumkin.

Sintezlangan antikor kutubxonalarini qurish xizmati

Alpha Lifetech MChJmijozlarga og'ir va yengil zanjirli V-gen repertuarlarini Cre-lox saytiga xos rekombinatsiya tizimidan foydalanib, fagda namoyish etiladigan Fabs repertuarini yaratish orqali antikor kutubxonalarini bir martalik loyihalash va sintez qilish xizmatini taqdim etadi, bu esa 6,5 ​​× 10^10 klonlardan iborat fagda namoyish etiladigan Fabs repertuarini yaratadi. Kutubxona ko'plab antigenlarga, ba'zilari nanomolyar yaqinlikka ega bo'lganlarga qarshi Abs hosil qildi. Inson antikor kutubxonasini yaratish M13 fag displey texnologiyasiga asoslangan (quyidagi rasmda ko'rsatilgan).