Dịch vụ phát triển kháng thể đơn dòng

Công ty TNHH Alpha Lifetechcó thể cung cấp dự đoán epitope, tổng hợp peptide, biểu hiện protein, sản xuất kháng thể đa dòng hoặc đơn dòng cũng như tinh chế kháng thể từ nuôi cấy tế bào, dịch cổ trướng hoặc toàn bộ huyết thanh.

Công ty TNHH Alpha Lifetechcó kinh nghiệm cung cấp cho khách hàng nhiều dịch vụ dòng tế bào ổn định bao gồm tế bào lai, dòng tế bào chỉnh sửa bộ gen, dòng tế bào hạ gục và dòng tế bào biểu hiện quá mức. Chúng tôi cố gắng cung cấp các dịch vụ dòng tế bào tùy chỉnh tiên tiến cho mọi khách hàng và các dịch vụ của chúng tôi đã được chứng minh và đáng tin cậy.

Chiến lược phát triển kháng thể

1. Thiết kế và chuẩn bị kháng nguyên
Các kháng nguyên này có thể là protein, peptide hoặc các phân tử khác. Thiết kế các chất sinh miễn dịch đòi hỏi một phương pháp tiếp cận toàn diện tích hợp kiến ​​thức về cấu trúc kháng nguyên, miễn dịch học và hệ thống phân phối. Alpha Lifetech có công nghệ thiết kế kháng nguyên có thể thiết kế các chất sinh miễn dịch cho khách hàng có nhu cầu.
Alpha Lifetech cung cấp các sản phẩm protein tái tổ hợp để khách hàng lựa chọn. Chúng tôi có nhiều hệ thống biểu hiện protein khác nhau, chẳng hạn như hệ thống biểu hiện E. coli, hệ thống biểu hiện nấm men, hệ thống biểu hiện baculovirus-côn trùng, hệ thống biểu hiện động vật có vú, v.v., để sản xuất protein tái tổ hợp mà bạn cần cho nghiên cứu.

2.Tiêm chủng cho động vật
Alpha Lifetech có thể cung cấp chất sinh miễn dịch cho khách hàng và bạn có thể lựa chọn giữa các loài động vật có khả năng miễn dịch như chuột, thỏ, cừu, alpaca, chuột lang, chuột đồng, v.v.

3.Phương pháp sản xuất kháng thể đơn dòng

●Sản xuất Mabs bằng công nghệ Hybridoma
Tế bào lai là tế bào lai được tạo ra bằng cách hợp nhất hai loại tế bào, cụ thể là dòng tế bào u tủy chuột và tế bào plasma (tế bào lympho B), trong đó tế bào dị hợp tử có thể sản xuất kháng thể liên tục chống lại kháng nguyên quan tâm trong ống nghiệm. Quá trình sản xuất dòng tế bào lai bao gồm ba phần: thiết kế kháng nguyên (hapten, phân tử nhỏ và peptide), miễn dịch động vật, hợp nhất tế bào và sàng lọc dòng tế bào dương tính. Sử dụng các phương pháp miễn dịch độc đáo, chúng tôi đạt được hiệu quả hợp nhất tế bào cực kỳ cao (1-10 tế bào lai trên một nghìn tế bào B) và nồng độ kháng thể cao, tối đa hóa tỷ lệ thành công của chúng tôi trong các xét nghiệm phân tích tiếp theo bao gồm sàng lọc sinh hóa, xét nghiệm dựa trên tế bào trong ống nghiệm và nghiên cứu trên động vật.

●Sản xuất Mabs bằng công nghệ hiển thị phage
Hiển thị phage cung cấp một phương pháp khác để tạo ra kháng thể đơn dòng. Tế bào lympho B được phân lập từ máu động vật và mRNA của chúng được chiết xuất. Thông qua PCR, mRNA này được chuyển đổi thành cDNA, khuếch đại tất cả các phân đoạn VH và VL. Các phân đoạn này sau đó được nhân bản vào một vectơ, thường là các đoạn biến đổi chuỗi đơn (scFv), cùng với protein PIII của một thể thực khuẩn. Sau đó, cấu trúc này được sử dụng để lây nhiễm E. coli, dẫn đến việc tạo ra một thư viện chứa khoảng 10^10 tế bào thông qua quá trình tiêm chủng với một thể thực khuẩn hỗ trợ. Sau đó, E. coli có thể tiết ra thể thực khuẩn chứa các phân đoạn VH và VL như một phần của lớp vỏ của nó. Sau đó, các phân đoạn VH và VL cụ thể nhắm vào kháng nguyên quan tâm có thể được chọn và sử dụng để tiêm chủng lại E. coli bằng thể thực khuẩn. Sau đó, các tế bào chứa plasmid được phân lập và giải trình tự.

4. Kiểm tra hợp nhất

●Sự hợp nhất và lựa chọn tế bào
Các tế bào B thu hoạch sau đó được hợp nhất với các tế bào u tủy, là các tế bào ung thư có thể tăng sinh vô thời hạn trong nuôi cấy. Sự hợp nhất thường đạt được bằng cách sử dụng một kỹ thuật như hợp nhất polyethylene glycol (PEG).
Sau khi hợp nhất, các tế bào lai được nuôi cấy trong môi trường chọn lọc chỉ cho phép các tế bào lai sống sót. Môi trường thường chứa aminopterin, ngăn chặn sự phát triển của các tế bào u tủy chưa hợp nhất.

●Sàng lọc và Clonging
Các tế bào lai tạo kết quả được sàng lọc để sản xuất kháng thể đặc hiệu với kháng nguyên mục tiêu. Điều này thường được thực hiện bằng các kỹ thuật như xét nghiệm miễn dịch liên kết với enzyme (ELISA), Western blot, kết tủa miễn dịch và đo lưu lượng tế bào.

Khi các tế bào lai tạo ra kháng thể được xác định, chúng được nhân bản để tạo ra một quần thể các tế bào giống hệt nhau. Điều này đảm bảo rằng kháng thể do mỗi tế bào lai tạo ra là giống hệt nhau.

5. Xác minh chức năng kháng thể
Alpha Lifetech cung cấp dịch vụ xác nhận chức năng kháng thể, chẳng hạn như phương pháp Western blotting, miễn dịch mô hóa học hoặc xét nghiệm chức năng, để xác định đặc tính của kháng thể đơn dòng và xác nhận tính đặc hiệu, ái lực và chức năng của kháng thể.

6. Tối ưu hóa kháng thể
Việc tinh chế kháng thể từ dịch nuôi cấy bằng các kỹ thuật như sắc ký ái lực protein A hoặc protein G, và Alpha Lifetech cũng có thể cung cấp các phương pháp biến đổi kháng thể để cải thiện ái lực kháng thể.

7. Sản xuất kháng thể
Alpha Lifetech có thể đánh giá các kháng thể ứng viên cho các ứng dụng sàng lọc thông lượng cao và sản xuất quy mô lớn.