Nền tảng phát triển kháng thể hiển thị phage
Công nghệ hiển thị phage

Quy trình sản xuất kháng thể hiển thị phage
Các bước | Nội dung dịch vụ | Dòng thời gian |
---|---|---|
Bước 1: Tiêm chủng cho động vật | (1) Tiêm phòng cho vật nuôi 4 lần, tiêm nhắc lại 1 liều, tổng cộng tiêm phòng 5 liều. (2) Thu thập huyết thanh âm tính trước khi tiêm chủng và thực hiện ELISA ở liều thứ tư để phát hiện nồng độ huyết thanh. (3) Nếu nồng độ kháng thể huyết thanh của liều thứ tư đạt yêu cầu thì tiêm thêm một liều nữa trước khi lấy máu 7 ngày. Nếu không đạt yêu cầu thì tiếp tục tiêm chủng thường quy. (4) Hiệu lực đủ tiêu chuẩn, thu thập máu và phân tách các tế bào đơn nhân | 10 tuần |
Bước 2: Chuẩn bị cDNA | (1) Chiết xuất RNA tổng số PBMC (Bộ chiết xuất RNA) (2) Chuẩn bị RT-PCR độ trung thực cao của cDNA (bộ dụng cụ phiên mã ngược) | 1 ngày |
Bước 3: Xây dựng thư viện kháng thể | (1) Sử dụng cDNA làm khuôn mẫu, gen được khuếch đại bằng hai vòng PCR. (2) Xây dựng và chuyển đổi phage: vector phagemid ghép nối gen, chuyển đổi điện di của vi khuẩn chủ TG1, xây dựng thư viện kháng thể. (3) Định danh: Chọn ngẫu nhiên 24 dòng, tỷ lệ PCR định danh dương tính + tỷ lệ chèn. (4) Chuẩn bị phage hỗ trợ: khuếch đại phage M13 + tinh chế. (5) Giải cứu thư viện hiển thị phage | 3-4 tuần |
Bước 4: Sàng lọc thư viện kháng thể (3 vòng) | (1) Sàng lọc 3 vòng mặc định (sàng lọc pha rắn): sàng lọc áp suất để loại bỏ kháng thể không đặc hiệu ở mức độ tối đa có thể. (2) Vi khuẩn thực khuẩn khuếch đại dòng đơn được chọn + biểu hiện cảm ứng IPTG + phát hiện ELISA các dòng dương tính. (3) Tất cả các bản sao dương tính được chọn để giải trình tự gen. | 4-5 tuần |

Dịch vụ hỗ trợ
Chúng tôi có thể cung cấp các dịch vụ xây dựng thư viện miễn dịch dựa trên động vật khác nhau và dịch vụ sàng lọc thư viện kháng thể tự nhiên theo nhu cầu của khách hàng

Nhiều mục tiêu
Có nhiều dịch vụ khám phá kháng thể mục tiêu: protein, peptide, phân tử nhỏ, vi-rút, protein màng, mRNA, v.v.

Nhiều vectơ
Dịch vụ xây dựng thư viện được cá nhân hóa, chúng tôi có thể cung cấp nhiều loại vectơ thực khuẩn bao gồm PMECS, pComb3X và pCANTAB 5E, và sửa đổi chúng theo nhu cầu của khách hàng

Nền tảng trưởng thành
Khả năng lưu trữ có thể đạt tới 10^8-10^9, tỷ lệ chèn đều trên 90% và ái lực của kháng thể thu được qua sàng lọc thường ở mức nM pM
Dịch vụ phát triển kháng thể đơn dòng
Chúng tôi có thể cung cấp các dịch vụ phát triển kháng thể đơn dòng chất lượng cao, độ tinh khiết cao và có độ đặc hiệu cao, bao gồm sản xuất kháng thể đơn dòng chuột và kháng thể đơn dòng thỏ
Nền tảng công nghệ Hybridoma
Bao gồm chương trình tiêm chủng, dịch vụ chuẩn bị kháng thể, tinh chế kháng thể, giải trình tự thông lượng cao kháng thể, xác nhận kháng thể, v.v.
Nền tảng phân loại tế bào B đơn
Alpha Lifetech có ưu điểm về thời gian sàng lọc và thu được kháng thể chất lượng cao. Nó có thể cung cấp thiết kế kháng nguyên, tổng hợp và sửa đổi, miễn dịch động vật, sàng lọc làm giàu tế bào B đơn, giải trình tự tế bào đơn.

Nền tảng phát triển kháng thể hiển thị phage
Alpha Lifetech có thể cung cấp các dịch vụ kỹ thuật phát triển kháng thể hiển thị phage từ khâu chuẩn bị kháng thể, tinh chế kháng thể, giải trình tự kháng thể, v.v.