Nền tảng phát triển kháng thể bằng phương pháp hiển thị phage
Công nghệ hiển thị phage

Quy trình sản xuất kháng thể bằng phương pháp hiển thị phage
| Các bước | Nội dung dịch vụ | Dòng thời gian |
|---|---|---|
| Bước 1: Tiêm chủng cho động vật | (1) Tiêm chủng cho động vật 4 lần, tiêm nhắc lại 1 liều, tổng cộng 5 liều tiêm chủng. (2) Huyết thanh âm tính trước khi tiêm chủng được thu thập và ELISA được thực hiện trên liều thứ tư để phát hiện hiệu giá huyết thanh. (3) Nếu nồng độ kháng thể huyết thanh của liều thứ tư đạt yêu cầu, sẽ tiêm thêm một liều vắc-xin nữa 7 ngày trước khi lấy máu. Nếu không đạt yêu cầu, sẽ tiếp tục tiêm chủng theo quy trình thông thường. (4) Hiệu lực đủ điều kiện, thu thập máu và tách bạch cầu đơn nhân | 10 tuần |
| Bước 2: Chuẩn bị cDNA | (1) Chiết xuất RNA tổng số PBMC (Bộ dụng cụ chiết xuất RNA) (2) Chuẩn bị cDNA RT-PCR có độ chính xác cao (bộ kit phiên mã ngược) | 1 ngày |
| Bước 3: Xây dựng thư viện kháng thể | (1) Sử dụng cDNA làm khuôn mẫu, các gen được khuếch đại bằng hai vòng PCR. (2) Xây dựng và chuyển đổi phage: vectơ phagemid ghép gen, chuyển đổi điện xung của vi khuẩn chủ TG1, xây dựng thư viện kháng thể. (3) Nhận dạng: Chọn ngẫu nhiên 24 bản sao, tỷ lệ dương tính nhận dạng PCR + tỷ lệ chèn. (4) Chuẩn bị phage có hỗ trợ: Khuếch đại và tinh chế phage M13. (5) Cứu thư viện hiển thị phage | 3-4 tuần |
| Bước 4: Sàng lọc thư viện kháng thể (3 vòng) | (1) Sàng lọc 3 vòng mặc định (sàng lọc pha rắn): sàng lọc áp suất để loại bỏ các kháng thể không đặc hiệu ở mức tối đa có thể. (2) Khuếch đại dòng đơn được chọn lọc bằng thực khuẩn thể + biểu hiện cảm ứng IPTG + phát hiện các dòng dương tính bằng ELISA. (3) Tất cả các dòng vô tính dương tính đều được chọn để giải trình tự gen. | 4-5 tuần |
Dịch vụ hỗ trợ
Chúng tôi có thể cung cấp các dịch vụ xây dựng thư viện miễn dịch dựa trên động vật và dịch vụ sàng lọc thư viện kháng thể tự nhiên khác nhau tùy theo nhu cầu của khách hàng.
Nhiều mục tiêu
Chúng tôi cung cấp dịch vụ tìm kiếm kháng thể nhắm đến nhiều mục tiêu khác nhau: protein, peptide, phân tử nhỏ, virus, protein màng, mRNA, v.v.
Nhiều vectơ
Chúng tôi cung cấp dịch vụ xây dựng thư viện theo yêu cầu, có thể cung cấp nhiều loại vector vi khuẩn thực khuẩn bao gồm PMECS, pComb3X và pCANTAB 5E, và điều chỉnh chúng theo nhu cầu của khách hàng.
Nền tảng trưởng thành
Dung lượng lưu trữ có thể đạt tới 10^8-10^9, tỷ lệ chèn đều trên 90%, và ái lực của kháng thể thu được thông qua sàng lọc thường ở mức nM/pM.
Dịch vụ phát triển kháng thể đơn dòng
Chúng tôi cung cấp dịch vụ phát triển kháng thể đơn dòng chất lượng cao, độ tinh khiết cao và tính đặc hiệu cao, bao gồm sản xuất kháng thể đơn dòng từ chuột và kháng thể đơn dòng từ thỏ.
Nền tảng công nghệ Hybridoma
Bao gồm chương trình tiêm chủng, dịch vụ điều chế kháng thể, tinh chế kháng thể, giải trình tự kháng thể tốc độ cao, thẩm định kháng thể, v.v.
Nền tảng phân loại tế bào B đơn lẻ
Alpha Lifetech có lợi thế về thời gian sàng lọc và thu được kháng thể chất lượng cao. Công ty có thể cung cấp thiết kế, tổng hợp và chỉnh sửa kháng nguyên, nghiên cứu miễn dịch trên động vật, sàng lọc làm giàu tế bào B đơn lẻ, giải trình tự tế bào đơn lẻ.
Nền tảng phát triển kháng thể bằng phương pháp hiển thị phage
Alpha Lifetech có thể cung cấp các dịch vụ kỹ thuật phát triển kháng thể bằng phương pháp hiển thị phage, bao gồm chuẩn bị kháng thể, tinh chế kháng thể, giải trình tự kháng thể, v.v.






16/07/2018 

