Dịch vụ khám phá kháng thể scFv

Công ty Alpha LifetechChúng tôi tự hào cung cấp dịch vụ xây dựng thư viện scFv toàn diện để đáp ứng nhu cầu đa dạng của các nhà khoa học trên toàn thế giới. Mục tiêu của chúng tôi là hiểu và đáp ứng nhu cầu của các khách hàng khác nhau và hỗ trợ giải quyết mọi vấn đề phát sinh trong công tác nghiên cứu.

scFv - Kháng thể đơn chuỗi biến đổi là gì?

Kháng thể đơn chuỗi bao gồm một đoạn kháng thể biến đổi nhẹ (VL) và nặng (VH) được nối với nhau bằng một liên kết peptide linh hoạt, có thể dễ dàng được biểu hiện ở dạng chức năng trên bề mặt phage và do đó thường được gọi là đoạn biến đổi đơn chuỗi (scFv). Đoạn scFv là đơn vị nhỏ nhất của phân tử immunoglobulin (ngoại trừ nanobodies) có chức năng trong hoạt động liên kết kháng nguyên và cho phép kỹ thuật protein cải thiện các đặc tính của scFv (đoạn biến đổi đơn chuỗi) như tăng ái lực và thay đổi tính đặc hiệu. Tại Alpha Lifetech Inc., kháng thể scFv được tạo ra chủ yếu từ tế bào lai (hybridoma), tế bào lách từ chuột được miễn dịch và tế bào lympho B từ người. Tổng RNA hoặc mRNA được phân lập đầu tiên từ tế bào lai, lách, tế bào lympho và tế bào tủy xương, sau đó được phiên mã ngược thành cDNA để làm khuôn mẫu cho khuếch đại gen kháng thể (PCR).

Phát triển kháng thể scFv - Công nghệ hiển thị phage

Tính đa dạng của thư viện được xác định bởi số lượng bản sao độc lập. Để tạo ra thư viện kháng thể scFv kích thước lớn, các nhà khoa học của chúng tôi sẽ sử dụng chiến lược hai bước độc quyền của chúng tôi để tạo thư viện. Trong bước đầu tiên của quy trình được mô tả, các bộ sưu tập chính được chuẩn bị từ các sản phẩm PCR mã hóa các miền VH, Vκ và Vλ, tạo ra các thư viện có kích thước trung bình điển hình (1 - 100 triệu bản sao). Trong bước thứ hai, các đoạn VH (hoặc VL) được phân lập bằng cách cắt DNA plasmid đã được tinh sạch từ các bộ sưu tập chính và được nhân bản vào vectơ phagemid chấp nhận chứa các bộ sưu tập VL (hoặc VH). Sự đổi mới này làm tăng đáng kể kích thước của thư viện (10¹⁰-10¹²bản sao).

Sàng lọc kháng thể scFv quy mô lớn và năng suất cao

Đối với việc điều chế scFv quy mô lớn, rõ ràng là việc lựa chọn hệ thống biểu hiện sẽ có tác động đáng kể đến thiết kế quy trình, chiến lược xử lý sau đó và chi phí quy trình. Việc lựa chọn phương pháp sản xuất sẽ phụ thuộc vào tầm quan trọng của việc biến đổi sau dịch mã và thời gian phát triển lâm sàng cũng như hiệu quả kinh tế, những yếu tố này về cơ bản cũng phụ thuộc vào "hệ thống chủ". Không có hệ thống biểu hiện nào đảm bảo mức độ biểu hiện sản phẩm cao cho nhiều loại kháng thể hoặc thậm chí protein khác nhau.