Giới thiệu về thư viện kháng thể tổng hợp

Thư viện kháng thể tổng hợp, còn được gọi là thư viện De novo, là một phương pháp tổng hợp sử dụng các kỹ thuật như tổng hợp DNA hoặc hiển thị phage để thiết kế và tổng hợp các vùng biến đổi kháng thể hoàn chỉnh, bao gồm các vùng khung và CDR, mà không cần dựa vào các thư viện kháng thể nguyên bản.

Thư viện kháng thể bán tổng hợp được tạo ra bằng cách kết hợp các thư viện kháng thể tự nhiên với sự đa dạng tổng hợp. Quá trình này thường bao gồm việc tổng hợp các oligonucleotide DNA để tạo ra một tập hợp các vùng xác định bổ sung (CDR) khác nhau, sau đó được kết hợp với một khung kháng thể cố định có nguồn gốc từ các nguồn tự nhiên như tế bào B của người hoặc động vật. CDR tổng hợp đưa sự đa dạng vào thư viện, tạo ra các kháng thể nhắm mục tiêu vào nhiều loại epitope khác nhau. Thư viện kháng thể bán tổng hợp cung cấp sự cân bằng giữa sự đa dạng tự nhiên của hệ thống miễn dịch và sự đa dạng được kiểm soát đạt được thông qua các phương pháp tổng hợp.

Sự khác biệt giữa thư viện kháng thể nguyên bản và thư viện kháng thể tổng hợp phụ thuộc vào nguồn gốc của gen immunoglobulin. Trong khi đó, sự khác biệt giữa thư viện kháng thể bán tổng hợp và thư viện kháng thể tổng hợp nằm ở chỗ thư viện bán tổng hợp bao gồm một phần các đoạn kháng thể nguyên bản, chẳng hạn như chuỗi nhẹ hoặc chuỗi nặng, và chỉ một trong số chúng được tổng hợp trong ống nghiệm; trong khi thư viện tổng hợp hoàn toàn được tạo ra từ quá trình tổng hợp nhân tạo bằng PCR trong ống nghiệm.

Alpha Lifetech có thể cung cấp

Công ty Alpha LifetechChúng tôi có thể cung cấp thư viện kháng thể bán tổng hợp/tổng ​​hợp từ động vật và người dựa trên nền tảng khám phá kháng thể chuyên nghiệp của mình. Với nhiều năm kinh nghiệm trong chỉnh sửa gen và xây dựng thư viện, chúng tôi có thể xây dựng các thư viện tổng hợp có khả năng tạo ra các kháng thể tổng hợp với ái lực và tính đặc hiệu vượt trội so với kháng thể tự nhiên.Alpha LifetechCác chuyên gia tự hào thông báo rằng chúng tôi có thể đảm bảo tỷ lệ thành công cao trong việc xây dựng thư viện kháng thể chứa từ 10^8 đến 10^10 bản sao độc lập.

Công ty Alpha LifetechChúng tôi tự hào cung cấp dịch vụ xây dựng thư viện kháng thể toàn diện để đáp ứng nhu cầu đa dạng của các nhà nghiên cứu trên toàn cầu, bao gồm kháng thể scFv, Fab, VHH và các thư viện tùy chỉnh. Mục tiêu của chúng tôi là hiểu và đáp ứng nhu cầu của các khách hàng khác nhau và hỗ trợ giải quyết mọi vấn đề phát sinh trong công việc nghiên cứu.

Dịch vụ xây dựng thư viện kháng thể tổng hợp

Thiết kế
Giai đoạn thiết kế bao gồm việc lựa chọn khung kháng thể và các vùng xác định tính bổ sung (CDR) dựa trên trình tự kháng thể hiện có hoặc dữ liệu cấu trúc. Kháng thể CDR tổng hợp cũng có thể được thiết kế để đưa vào các chức năng cụ thể hoặc tăng cường các đặc tính liên kết.

Tổng hợp
ADN tổng hợp mã hóa các trình tự kháng thể được thiết kế, bao gồm cả vùng khung và vùng CDR, được tổng hợp bằng các phương pháp hóa học hoặc enzym.

Cuộc họp
Các đoạn DNA tổng hợp được lắp ráp thành các vector biểu hiện kháng thể bằng các kỹ thuật như PCR, nối hoặc lắp ráp Gibson. Sau đó, các vector này có thể được đưa vào các hệ thống biểu hiện như tế bào vi khuẩn, nấm men hoặc tế bào động vật có vú để sản xuất kháng thể.

Sàng lọc và lựa chọn
Các thư viện kháng thể được xây dựng sẽ được sàng lọc và lựa chọn các kháng thể có đặc tính mong muốn bằng các phương pháp sàng lọc tốc độ cao. Điều này có thể bao gồm các kỹ thuật như hiển thị phage, hiển thị nấm men hoặc hiển thị ribosome, tùy thuộc vào định dạng thư viện và ứng dụng.

Dịch vụ xây dựng thư viện kháng thể tổng hợp

Công ty Alpha LifetechCung cấp cho khách hàng dịch vụ thiết kế và tổng hợp trọn gói các thư viện kháng thể bằng cách nối các chuỗi V-gene nặng và nhẹ vào vectơ phage sử dụng hệ thống tái tổ hợp đặc hiệu vị trí Cre-lox để tạo ra một tập hợp các Fab được hiển thị trên phage bao gồm 6,5 × 10^10 bản sao. Thư viện tạo ra các kháng thể chống lại nhiều kháng nguyên, một số có ái lực ở mức nanomolar. Việc tạo ra thư viện kháng thể người dựa trên công nghệ hiển thị phage M13 (được minh họa trong hình dưới đây).