וואָס איז אַנטיבאָדי אינזשעניריע?

מיט די הילף פון אַנטיבאָדי ינזשעניעריע, עס איז מעגלעך צו מאָדיפיצירן די מאָלעקולאַר גרייס, פאַרמאַקאָקינעטיקס, ימיונאַדזשעניקאַטי, ביינדינג קירבות, ספּעציפֿישקייט און יפעקטיוונאַס פון אַנטיבאָדיעס. נאָך סינטאַסייזינג אַנטיבאָדיעס, די ספּעציפיש ביינדינג פון אַנטיבאָדיעס מאכט זיי העכסט ווערטפול אין קליניש דיאַגנאָסיס און באַהאַנדלונג. דורך אַנטיבאָדי ינזשעניעריע, זיי קענען טרעפן די באדערפענישן פון מעדיצין און דיאַגנאָסטיק פרי אַנטוויקלונג.

דער ציל פון אַנטיבאָדי ינזשעניעריע איז צו פּלאַן און פּראָדוצירן העכסט ספּעציפיש, סטאַביל פאַנגקשאַנז אַז נאַטירלעך אַנטיבאָדיעס קענען נישט דערגרייכן, ארויפלייגן דעם יסוד פֿאַר דער פּראָדוקציע פון ​​טעראַפּיוטיק אַנטיבאָדיעס.

Alpha Lifetech, מיט זיין ברייט פּרויעקט דערפאַרונג אין אַנטיבאָדי ינזשעניעריע, קענען צושטעלן קאַסטאַמייזד מאַנאַקלאָנאַל און פּאָליקלאָנאַל אַנטיבאָדי באַדינונגס פֿאַר קייפל מינים, ווי געזונט ווי פאַסע אַרויסווייַזן אַנטיבאָדי ביבליאָטעק קאַנסטראַקשאַן און זיפּונג באַדינונגס. Alpha Lifetech קענען צושטעלן קאַסטאַמערז מיט קוואַליטעט ביאָסימילאַר אַנטיבאָדיעס און רעקאָמבינאַנט פּראָטעין פּראָדוקטן, ווי געזונט ווי קאָראַספּאַנדינג באַדינונגס, צו פּראָדוצירן עפעקטיוו, העכסט ספּעציפיש און סטאַביל אַנטיבאָדיעס. דורך ניצן פולשטענדיק אַנטיבאָדי, פּראָטעין פּלאַטפאָרמס און פאַדזש אַרויסווייַזן סיסטעמען, מיר צושטעלן סערוויסעס וואָס דעקן די אַפּסטרים און דאַונסטרים פון אַנטיבאָדי פּראָדוקציע, אַרייַנגערעכנט טעכניש באַדינונגס אַזאַ ווי אַנטיבאָדי כיומאַניזיישאַן, אַנטיבאָדי רייניקונג, אַנטיבאָדי סיקוואַנסינג און וואַלאַדיישאַן פון אַנטיבאָדיעס.

די פּייאַנירינג בינע פון ​​אַנטיבאָדי ינזשעניעריע איז שייך צו צוויי טעקנאַלאַדזשיז:

- רעקאָמבינאַנט דנאַ טעכנאָלאָגיע

- היברידאָמאַ טעכנאָלאָגיע

די גיך אַנטוויקלונג פון אַנטיבאָדי ינזשעניעריע איז שייך צו דריי וויכטיק טעקנאַלאַדזשיז:

- גענע קלאָונינג טעכנאָלאָגיע און פּאָלימעראַסע קייט רעאַקציע

-פּראָטעין אויסדרוק: רעקאָמבינאַנט פּראָטעינס זענען געשאפן דורך אויסדרוק סיסטעמען אַזאַ ווי הייוון, רוט-שייפּט ווירוסעס און געוויקסן

- קאָמפּיוטער אַידאַד סטראַקטשעראַל פּלאַן

דער ערשטער דור פון אַנטיבאָדיעס זענען כיומאַנייזד פֿאַר די פּראָדוקציע פון ​​טשימעריק אַנטיבאָדיעס, ווו די בייַטעוודיק געגנט פון מויז מאָנאָקלאָנאַל אַנטיבאָדיעס איז געווען לינגקט צו די קעסיידערדיק געגנט פון מענטשלעך יגג מאַלאַקיולז. די אַנטיגען ביינדינג געגנט (CDR) פון די צווייט-דור מויז מאָנאָקלאָנאַל אַנטיבאָדי איז טראַנספּלאַנטיד אין מענטשלעך יגג. אַחוץ פֿאַר די CDR געגנט, אַלע אנדערע אַנטיבאָדיעס זענען כּמעט מענטשלעך אַנטיבאָדיעס, און השתדלות זענען געמאכט צו ויסמיידן ינדוסינג רעספּאָנסעס פון מענטשלעך אַנטי מויז אַנטיבאָדי (HAMA) ווען ניצן מויז קלאָון אַנטיבאָדיעס פֿאַר מענטש באַהאַנדלונג.

 

צו בויען אַ פאַגע אַרויסווייַזן ביבליאָטעק, דער ערשטער שריט איז צו קריגן די גענעס וואָס קאָדירונג אַנטיבאָדיעס, וואָס קענען זיין אפגעזונדערט פון ב סעלז פון ימיונייזד אַנימאַלס (ימיון ביבליאָטעק קאַנסטראַקשאַן), יקסטראַקטיד גלייַך פון ניט ימיונייזד אַנימאַלס (נאַטירלעך ביבליאָטעק קאַנסטראַקשאַן), אָדער אפילו אַסעמבאַלד אין וויטראָ מיט אַנטיבאָדי דזשין פראַגמאַנץ (קאַנסטראַקשאַן פון סינטעטיש ביבליאָטעק). דערנאָך, די גענעס זענען אַמפּלאַפייד דורך פּקר, ינסערטאַד אין פּלאַסמיידז און אויסגעדריקט אין פּאַסיק באַלעבאָס סיסטעמען (הייוון אויסדרוק (יוזשאַוואַלי Pichia pastoris), פּראָקאַריאָטיק אויסדרוק (יוזשאַוואַלי E. קאָלי), מאַממאַליאַן צעל אויסדרוק, פאַבריק צעל אויסדרוק, און ינסעקט צעל אויסדרוק ינפעקטאַד מיט רוט-שייפּט ווירוסעס). די מערסט פּראָסט איז די E. קאָלי אויסדרוק סיסטעם, וואָס ינטאַגרייץ אַ ספּעציפיש קאָדירונג אַנטיבאָדי סיקוואַנס אַנטו די פאַדזש און קאָדעקס איינער פון די פאַדזש שאָל פּראָטעינס (פּיייי אָדער פּווייי). די דזשין פוסיאָן פון, און געוויזן אויף די ייבערפלאַך פון באַקטעריאָפאַגעס. די האַרץ פון דעם טעכנאָלאָגיע איז צו בויען אַ פאַגע אַרויסווייַזן ביבליאָטעק, וואָס האט די מייַלע איבער נאַטירלעך לייברעריז אין אַז עס קענען האָבן ספּעציפיש ביינדינג. דערנאָך, אַנטיבאָדיעס מיט אַנטיגען ספּעסיפיקאַטי זענען סקרינד דורך אַ בייאַלאַדזשיקאַל סעלעקציע פּראָצעס, ציל אַנטיגענס זענען פאַרפעסטיקט, אַנבאַונד פאַגעס זענען ריפּיטידלי געוואשן אַוועק, און געבונדן פאַגעס זענען געוואשן אַוועק פֿאַר ווייַטער ענריטשמענט. נאָך דריי אָדער מער ראָונדס פון יבערכאַזערונג, אַנטיבאָדיעס מיט הויך ספּעסיפיקאַטי און הויך קירבות זענען אפגעזונדערט.

פייג 3: אַנטיבאָדי ביבליאָטעק קאַנסטראַקשאַן און זיפּונג

רעקאָמבינאַנט דנאַ טעכנאָלאָגיע קענען ווערן גענוצט צו דזשענערייט אַנטיבאָדי פראַגמאַנץ. פאַב אַנטיבאָדיעס קענען טכילעס בלויז זיין כיידראַלייזד דורך גאַסטריק פּראָטעאַסע צו פּראָדוצירן (פאַב ') 2 פראַגמאַנץ, וואָס זענען דאַן דיידזשעסטיד דורך פּאַפּיין צו דזשענערייט יחיד פאַב פראַגמאַנץ. די Fv פראַגמענט באשטייט פון VH און VL, וואָס האָבן נעבעך פעסטקייַט רעכט צו דער אַוועק פון דיסולפידע קייטן. דעריבער, VH און VL זענען לינגקט צוזאַמען דורך אַ קורץ פּעפּטייד פון 15-20 אַמינאָ אַסאַדז צו פאָרעם אַ איין קייט בייַטעוודיק פראַגמענט (SCFv) אַנטיבאָדי מיט אַ מאָלעקולאַר וואָג פון בעערעך 25KDa.

די לערנען פון אַנטיבאָדי סטרוקטור אין קאַמעלידאַע (קאַמעל, ליאַמאַ, און אַלפּאַקאַ) האט ילוסידאַד אַז אַנטיבאָדיעס האָבן בלויז שווער קייטן און קיין ליכט קייטן, דעריבער זיי זענען גערופן שווער קייט אַנטיבאָדיעס (הקאַב). די וועריאַבאַל פעלד פון שווער קייט אַנטיבאָדיעס איז גערופן איין פעלד אַנטיבאָדיעס אָדער נאַנאָבאָדיעס אָדער VHH, מיט אַ גרייס פון 12-15 kDa. ווי מאָנאָמערס, זיי האָבן קיין דיסולפידע קייטן און זענען זייער סטאַביל, מיט אַ זייער הויך קירבות פֿאַר אַנטיגענס.

פייַג 5: העאַווי קייט אַנטיבאָדי און ווהה / נאַנאָבאָדי

צעל פריי אויסדרוק ניצט די אויסדרוק פון נאַטירלעך אָדער סינטעטיש דנאַ צו דערגרייכן אין וויטראָ פּראָטעין סינטעז, טיפּיקלי ניצן די E. קאָלי אויסדרוק סיסטעם. עס טראגט פּראָטעינס געשווינד און אַוווידז די מעטאַבאַליק און סיטאָטאָקסיק מאַסע אויף סעלז ווען פּראַדוסינג גרויס אַמאַונץ פון רעקאָמבינאַנט פּראָטעינס אין וויוואָו. עס קענען אויך פּראָדוצירן פּראָטעינס וואָס זענען שווער צו סינטאַסייז, אַזאַ ווי די וואָס זענען שווער צו מאָדיפיצירן נאָך איבערזעצונג אָדער סינטאַסייז מעמבראַנע פּראָטעינס.