Kí ni ìmọ̀ ẹ̀rọ antibody?

Pẹ̀lú ìrànlọ́wọ́ ìmọ̀ ẹ̀rọ antibody, ó ti ṣeé ṣe láti yí ìwọ̀n molikula, pharmacokinetics, immunogenicity, binding affiliation, specificity àti effective function ti antibody padà. Lẹ́yìn ṣíṣe àwọn antibody, ìsopọ̀ pàtó ti antibody mú kí wọ́n níye lórí gan-an nínú àyẹ̀wò àti ìtọ́jú. Nípasẹ̀ ìmọ̀ ẹ̀rọ antibody, wọ́n lè bá àìní oògùn àti ìdàgbàsókè ìwádìí ní ìbẹ̀rẹ̀ mu.

Ète ìmọ̀ ẹ̀rọ antibody ni láti ṣe àgbékalẹ̀ àti láti ṣe àwọn iṣẹ́ pàtó, tí ó dúró ṣinṣin tí àwọn antibody àdánidá kò lè ṣe, kí a sì fi ìpìlẹ̀ lélẹ̀ fún ìṣẹ̀dá àwọn antibody ìtọ́jú.

Alpha Lifetech, pẹ̀lú ìrírí tó gbòòrò nínú iṣẹ́ àgbékalẹ̀ rẹ̀ nínú ìmọ̀ ẹ̀rọ antibody, lè pèsè àwọn iṣẹ́ antibody monoclonal àti polyclonal tí a ṣe àdáni fún ọ̀pọ̀lọpọ̀ irú ẹ̀dá, àti iṣẹ́ ìkọ́lé ìkàwé antibody àpapọ phage àti ìṣàyẹ̀wò. Alpha Lifetech lè fún àwọn oníbàárà ní àwọn antibody biosimilar tó dára àti àwọn ọjà protein recombinant, àti àwọn iṣẹ́ tó báramu, láti ṣe àwọn antibody tó munadoko, tó ṣe pàtàkì, tó sì dúró ṣinṣin. Nípa lílo antibody tó péye, àwọn platform protein àti phage display, a ń pèsè àwọn iṣẹ́ tó bo ìṣàgbékalẹ̀ antibody tó wà ní òkè àti ìsàlẹ̀, títí kan àwọn iṣẹ́ ìmọ̀ ẹ̀rọ bíi humanization antibody, cleaning antibody, antibody sequencing, àti antibody validation.

Ipele aṣaaju-ọna ti imọ-ẹrọ antibody ni ibatan si awọn imọ-ẹrọ meji:

---Imọ-ẹrọ DNA ti a tunṣe

--Imọ-ẹrọ Hybridoma

Idagbasoke iyara ti imọ-ẹrọ antibody ni ibatan si awọn imọ-ẹrọ pataki mẹta:

--Imọ-ẹrọ cloning Gene ati iṣẹda polymerase pq

--Ìfihàn Prótéènì: Àwọn prótéènì àtúnṣe ni a ń ṣe nípasẹ̀ àwọn ètò ìgbékalẹ̀ bíi ìwúkàrà, àwọn kòkòrò àrùn tí ó ní àwòrán ọ̀pá, àti àwọn ewéko

--Apẹrẹ eto iranlọwọ kọmputa

A ṣe àgbékalẹ̀ ìran àkọ́kọ́ ti àwọn èròjà ara-ẹni fún ìṣẹ̀dá àwọn èròjà ara-ẹni chimeric, níbi tí agbègbè oníyípadà ti àwọn èròjà ara-ẹni monoclonal mouse ti so pọ̀ mọ́ agbègbè tí ó dúró ṣinṣin ti àwọn èròjà ara-ẹni IgG. A gbé agbègbè ìsopọ̀ antigen (CDR) ti èròjà ara-ẹni monoclonal mouse ìran kejì sínú IgG ènìyàn. Yàtọ̀ sí agbègbè CDR, gbogbo èròjà ara-ẹni mìíràn fẹ́rẹ̀ẹ́ jẹ́ èròjà ara-ẹni, a sì ṣe àwọn ìsapá láti yẹra fún fífún àwọn ìdáhùn antibody anti mouse (HAMA) ènìyàn nígbà tí a bá ń lo èròjà ara-ẹni clone mouse fún ìtọ́jú ènìyàn.

 

Láti kọ́ ìkàwé ìfihàn phage, ìgbésẹ̀ àkọ́kọ́ ni láti gba àwọn jínì tí ó ń ṣàfihàn àwọn èròjà ara, èyí tí a lè yà sọ́tọ̀ láti inú àwọn sẹ́ẹ̀lì B ti àwọn ẹranko tí a ti ṣe àjẹsára (ìkọ́lé ìkàwé àdánidá), tí a yọ jáde tààrà láti inú àwọn ẹranko tí a kò ti ṣe àjẹsára (ìkọ́lé ìkàwé àdánidá), tàbí kí a kó wọn jọ ní vitro pẹ̀lú àwọn ègé jínì antibody (ìkọ́lé ìkàwé àdánidá). Lẹ́yìn náà, a máa ń mú àwọn èròjà ara pọ̀ sí i nípa lílo PCR, a máa fi sínú àwọn plasmids, a sì máa ń sọ wọ́n jáde nínú àwọn ètò ìgbalejò tó yẹ (ìkọ́lé ìwúkàrà (nígbà gbogbo Pichia pastoris), ìkọ́lé prokaryotic (nígbà gbogbo E. coli), ìkọ́lé sẹ́ẹ̀lì ẹranko, ìkọ́lé sẹ́ẹ̀lì ewéko, àti ìkọ́lé sẹ́ẹ̀lì kòkòrò tí ó ní àwọn kòkòrò tí ó ní àwòrán ọ̀pá). Èyí tí ó wọ́pọ̀ jùlọ ni ètò ìkọ́lé E. coli, èyí tí ó so ìtẹ̀lé ìkọ́lé antibody pàtó kan pọ̀ mọ́ phage tí ó sì ń ṣàkọsílẹ̀ ọ̀kan nínú àwọn protein shell shell (pIII tàbí pVIII). Ìṣọ̀kan jínì, Àti tí a fihàn lórí ojú àwọn bacteriophages. Kókó ìmọ̀-ẹ̀rọ yìí ni láti kọ́ ìkàwé ìkọ́lé ìkọ́lé phage kan, èyí tí ó ní àǹfààní ju àwọn ìkàwé àdánidá lọ nítorí pé ó lè ní ìsopọ̀ pàtó. Lẹ́yìn náà, a máa ń ṣe àyẹ̀wò àwọn èròjà tí ó ní èròjà antigen nípa lílo ìlànà yíyàn ẹ̀dá, a máa ń tún àwọn èròjà antigen tí a fojú sí ṣe, a máa ń fọ àwọn èròjà tí kò ní ìdè mọ́ kúrò leralera, a sì máa ń fọ àwọn èròjà tí a ti dè mọ́ kúrò fún ìdàgbàsókè sí i. Lẹ́yìn ìpele mẹ́ta tàbí jù bẹ́ẹ̀ lọ ti àtúnṣe, a máa ń ya àwọn èròjà antigen tí ó ní èròjà ...

Àwòrán 3: Ìkọ́lé àti Ìṣàyẹ̀wò Ilé Ìkàwé Aláìsàn-ara

A le lo imọ-ẹrọ DNA ti a tun ṣe lati ṣe awọn ege antibody. Ni akọkọ, protease inu ikun nikan ni a le fi hydrolyzes awọn aporo Fab lati ṣe awọn ege (Fab ') 2, eyiti papain lẹhinna yoo jẹ lati inu lati ṣe awọn ege Fab kọọkan. Apakan Fv ni VH ati VL, eyiti ko ni iduroṣinṣin to dara nitori aini awọn asopọ disulfide. Nitorinaa, a so VH ati VL pọ nipasẹ peptide kukuru ti awọn amino acids 15-20 lati ṣẹda aporo oniyipada chain kan (scFv) pẹlu iwuwo molikula ti o to 25KDa.

Ìwádìí nípa ìṣètò àwọn èròjà ara nínú Camelidae (Camel, LIama, àti Alpaca) ti ṣàlàyé pé àwọn èròjà ara nìkan ní àwọn ẹ̀wọ̀n tó wúwo nìkan, wọn kò sì ní àwọn ẹ̀wọ̀n tó fúyẹ́, nítorí náà ni a ṣe ń pè wọ́n ní àwọn èròjà ara tí ó wúwo (hcAb). A ń pe àwọn èròjà ara tí ó wúwo ní àwọn èròjà ara tí ó wúwo ní ẹyọ kan ṣoṣo tàbí àwọn èròjà ara tàbí VHH, pẹ̀lú ìwọ̀n 12-15 kDa. Gẹ́gẹ́ bí àwọn monomers, wọn kò ní àwọn ìdè disulfide, wọ́n sì dúró ṣinṣin gan-an, pẹ̀lú ìfẹ́ gíga fún àwọn èròjà ara.

Àwòrán 5: Ẹgbẹ́-àrùn Ẹ̀wọ̀n Tó Lágbára àti Ẹgbẹ́-àrùn VHH/ Nanobody

Ìfọ̀rọ̀wérọ̀ sẹ́ẹ̀lì ń lo ìfọ̀rọ̀wérọ̀ DNA àdánidá tàbí ti àdánidá láti ṣàṣeyọrí ìṣẹ̀dá amuaradagba in vitro, ní lílo ètò ìfọ̀rọ̀wérọ̀ E. coli. Ó ń mú àwọn amuaradagba jáde kíákíá, ó sì ń yẹra fún ìfúnpọ̀ àti ìpalára cytotoxic lórí àwọn sẹ́ẹ̀lì nígbà tí ó bá ń mú ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn amuaradagba àtúnṣe jáde ní vivo. Ó tún lè mú àwọn amuaradagba jáde tí ó ṣòro láti ṣe, bí àwọn tí ó ṣòro láti yípadà lẹ́yìn ìtúmọ̀ tàbí ṣíṣẹ̀dá àwọn protein membrane.